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大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書

本文由 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 整理匯編

2018-09-14 10:01 410閱讀次數(shù)

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大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書試劑盒組成1包被微孔板:一塊。2酶標(biāo)記物:1瓶[6.0mL],有效期內(nèi)使用。3底物Ⅰ:1瓶[6.0mL],有效期內(nèi)使用。4底物Ⅱ:1瓶[6.0mL],有效期內(nèi)使用。5濃縮清洗液[1:10蒸餾水或純凈水稀釋]:1瓶[50mL],有效期內(nèi)使用。6終止液:1瓶[6.0mL],有效期內(nèi)使用。7標(biāo)準(zhǔn)品:5瓶[1.0mL/瓶],有效期內(nèi)使用。8檢測范圍及各標(biāo)準(zhǔn)品濃度:0,50,100,250,500pg/mL。大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書需要但未提供的試劑和器材◆水溫箱或恒溫箱◆標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀◆自動洗板機(jī)◆樣本稀釋液◆可調(diào)節(jié)移液器及配套吸頭◆蒸餾水和容量瓶◆無菌試管◆震蕩器及磁力攪拌器◆封板膜注意事項(xiàng)1在試驗(yàn)之前要將試劑盒在室溫下平衡至少30分鐘。2使用之前一定要首先確認(rèn)試劑盒內(nèi)所有試劑均為正常狀態(tài)再進(jìn)行后面的操作。3如有問題或不懂之處請務(wù)必與供貨商進(jìn)行溝通,否則造成的任何損失均與本司無關(guān)。4不要重復(fù)使用手中的吸頭和試管以及混淆各組分瓶蓋,否則會引起交叉污染,導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。5該試劑盒內(nèi)不包含有傳染性試劑。6不要混用不同指標(biāo)不同批號的試劑和包被微孔板。7試驗(yàn)過程中試劑和待測樣品均應(yīng)充分混勻。8包被微孔板應(yīng)放置2-8℃干燥保存,避免受潮。9如有剩余試劑請放置2-8℃冷藏保存。10試驗(yàn)過程要嚴(yán)格按照說明書操作,先后順序不得顛倒。11如果樣品量較大應(yīng)注意加樣時間,避免加樣過慢或間隔時間過長。12使用和貯存底物Ⅱ時應(yīng)注意避光。13終止液含有酸性成分具有腐蝕性,勿將其濺落到皮膚或衣服上。如有該情況發(fā)生應(yīng)立即使用冷水沖洗。14試驗(yàn)期間室內(nèi)溫度應(yīng)始終保持在20-25℃。并保持室內(nèi)清潔,無粉塵。15避免直接接觸試劑盒內(nèi)的液體,一旦接觸請盡快用水清洗。16在試驗(yàn)過程中不要吸煙、使用化妝品和吃喝。這將對操作者的健康及試驗(yàn)結(jié)果造成影響。17不要用嘴吸取試劑瓶內(nèi)的試劑。大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書樣品的采集和制備1收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本儲存在2-8℃?zhèn)溆?如有特殊原因需要周期檢測,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,并避免反復(fù)凍融。樣本2-8℃可保存48小時,-20℃條件下可保存1個月,-70℃條件下可保存6個月。2每個樣品量收集體積[100ul×需檢測的指標(biāo),注:樣品體積為處理后可進(jìn)行Z終實(shí)驗(yàn)的樣品體積]。3[血清]操作過程中避免受到刺激,使用非焦化和不含有內(nèi)毒素的試管,靜脈穿刺收集血液并迅速離心,分離出血清[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,具體離心的時間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。Z終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。4[血漿]可使用EDTA[2.0%EDTA.Na2]來抗凝血漿并用于檢測,混合10-20分鐘后,離心祛除顆粒[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,具體離心的時間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。Z終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。5[組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)液(分泌性成分)]使用無菌管收集。離心后取上清液[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,具體離心的時間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。Z終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。組織勻漿:切割標(biāo)本,稱取質(zhì)量。加入PBS[7.0-7.4]充分混合,具體的混合比例由操作者自行決定或可參考相關(guān)文獻(xiàn),如有問題也可與供貨商咨詢溝通后再進(jìn)行后續(xù)操作?;旌虾蟮木彌_液中可加入1μg/L蛋白酶YZ劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),充分混合。細(xì)胞培養(yǎng)液(胞內(nèi)成分):應(yīng)先用PBS[7.0-7.4]稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/mL左右,使用細(xì)胞裂解液或通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。6[體液]離心后祛除顆粒和聚合物[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。具體離心的時間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。Z終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。7不要使用高脂血癥、溶血、污染或滅活的樣品,這樣有可能會導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。

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