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  精子DNA吖啶橙（acridineorange）熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙（acridineorange）熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光，確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡便，性能穩(wěn)定，熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力（vitality）、運動能力（motility）、授精潛力（fertilizingpotential）、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性（integrity）、頂體反應(yīng)（acrosomalreaction）功能的評價是精子分析的重要指標(biāo)，也是決定人工受孕或體外授精（invitrofertilization；IVF）的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙（Acridineorange；AO）染色技術(shù)，是精子染色質(zhì)分析和授精效率評價的Z常用的方法?；谡＞蛹?xì)胞的染色質(zhì)完整性和DNA雙鏈特性，作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA，即雙鏈DNA嵌合（intercalate）時，呈現(xiàn)綠色熒光（激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長530nm）；而與變性DNA，即單鏈DNA結(jié)合時，呈現(xiàn)紅色熒光（激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長630nm），以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升固著液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；染色液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺式離心機：用于樣品操作血細(xì)胞計數(shù)器：用于細(xì)胞計數(shù)載玻片和蓋玻片：用于精子細(xì)胞爬片（共聚焦）熒光顯微鏡：用于觀察染色的精子細(xì)胞細(xì)胞流式儀：用于分析染色的精子細(xì)胞實驗步驟一、細(xì)胞流式儀分析1．移取新鮮獲得的1毫升精液（30分鐘至1小時內(nèi)）到1.5毫升離心管2．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群5．在血細(xì)胞計數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計數(shù)：1×107精子細(xì)胞/毫升6．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g7．小心抽去上清液8．重復(fù)實驗步驟4至7一次（不包括實驗步驟5）9．加入xx微升染色液（ReagentB），混勻顆粒群10．室溫下孵育10分鐘，避免光照11．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g12．小心抽去上清液13．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群14．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g15．小心抽去上清液16．重復(fù)實驗步驟13至15一次17．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群18．即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀雙通道分析：觀察10000個細(xì)胞以上，200細(xì)胞/秒；激發(fā)波長200mW，散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC）藻紅蛋白（phycoerythrin；PE）熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強正常精子DNA異常精子DNA19．細(xì)胞流式儀檢測正常精子DNA（雙鏈DNA）參考圖像如下（X軸：FL3；Y軸：FL1；R1左下角為細(xì)胞碎屑；R2為正常精子細(xì)胞；R3為異常精子細(xì)胞；R4為未成熟精子細(xì)胞）二、熒光顯微鏡分析1．移取新鮮獲得的1毫升精液（30分鐘至1小時內(nèi)）到1.5毫升離心管2．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群5．在血細(xì)胞計數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計數(shù)：1×107精子細(xì)胞/毫升6．放進(jìn)微型臺式離心機離心5分鐘，速度為600g7．小心抽去上清液8．重復(fù)實驗步驟4至7一次（不包括實驗步驟5）9．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群10．即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11．用蓋玻片或另一個載玻片推片12．置于空氣中涼干13．加上xx微升固著液（ReagentB），覆蓋樣品表面14．室溫下孵育2小時15．小心抽去固著液16．小心加上xx微升染色液（ReagentC），覆蓋樣品表面17．室溫下孵育5分鐘，避免光照18．小心抽去染色液19．小心加上xx微升清理液（ReagentA），覆蓋樣品表面20．小心抽去清理液21．蓋上蓋玻片22．即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)（注意：每個視野計數(shù)200個精子）23．分析結(jié)果（參考圖）觀察紅色熒光：濾波器激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光，表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光：濾波器激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光，表明精子DNA正常注意事項1．本產(chǎn)品為50次操作2．操作時須戴手套3．樣品檢測前，建議在血細(xì)胞計數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計數(shù)4．精子細(xì)胞計數(shù)時乘上稀釋倍數(shù)104。標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計數(shù)器（Hemocytometer）的計算方法是：1毫米方塊的細(xì)胞計數(shù)X104（稀釋倍數(shù)）＝實際細(xì)胞數(shù)/毫升5．染色完成后，即刻進(jìn)行檢測分析，否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6．如果流式細(xì)胞儀出現(xiàn)干擾，建議使用630nm散發(fā)波長，或進(jìn)行補償處理，建議使用誘導(dǎo)處理樣品：10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7．本產(chǎn)品常用于凍存精子細(xì)胞的檢測分析8．本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（SpermChromatinStructureAssay；SCSA），分析參數(shù)如下：%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計算方法紅色熒光：紅色＋綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人：小于15％正常人：小于10％閾值：小于30％閾值：小于15％高生育力：0－15％中等生育力：16－27％低或差生育力：27－30％參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9．本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒

  主要用途細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強度顯著增強，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動物、人體等）內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料，特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲，可以檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長525nm，來定量測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測試劑盒

  主要用途純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測試劑是一種旨在通過鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù)，選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色，而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料，即刻發(fā)生熒光去除或淬滅，來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性（瞬時或長期開放狀態(tài)）的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，活體檢測，分辨率高，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔（mitochondrialpermeabilitytransitionpore；MPTP）是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時，線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開放，顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放，而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM，又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素－乙酰氧基甲基酯【bis（bis-carboxymethylaminomethylfluorescein）-acetoxymethylester】，作為熒光探針：**，適宜的分子量622kd，小于1.5kd；第二，幾乎不具有膜結(jié)合性；第三，不是線粒體酶的底物；第四，容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后，被內(nèi)酯酶切離，產(chǎn)生具有極性的熒光性強的鈣黃綠素，被線粒體俘獲。同時線粒體外的鈣黃綠素通過離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時開放，鈣黃綠素釋放出線粒體外，由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓?，表明膜通道孔的開放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液（ReagentA）微升中和液（ReagentB）毫升保存液（ReagentC）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentA）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備黑色96孔板：用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管：用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片：用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺式離心機：用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱：用于染色孵育（共聚焦）熒光顯微鏡：用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于線粒體熒光定量分析實驗步驟直接法準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品（總量為0.2毫克）到1.5毫升離心管加入xx微升染色液（ReagentA），混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘，避免光照放進(jìn)4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液（ReagentC），混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去保存液（ReagentC）小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液（ReagentC），混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作：（A）使用（共聚焦）熒光顯微鏡觀察（定性檢測）：1）移取10微升上述懸液到載波片上，蓋上蓋玻片2）激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增強或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測（定量檢測）：1）移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增強間接法實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentA）置入冰槽里融化，中和液（ReagentB）放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升中和液（ReagentB），混勻后，標(biāo)記為染色工作液，置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品（總量為0.2毫克）到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升含有染色液（ReagentA）和中和液（ReagentB）的染色工作液，充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘，避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作：使用（共聚焦）熒光顯微鏡觀察（定性檢測）：1）移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上，蓋上蓋玻片（每隔5分鐘檢測一次，持續(xù)30分鐘）2）激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增強或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測（定量檢測）：1）移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀（每隔5分鐘檢測一次，持續(xù)30分鐘）：激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增強[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 原子熒光檢測土壤中鉛的解決方案

  原子熒光檢測土壤中鉛的解決方案[詳細(xì)]

  2024-09-27 07:42

  安裝說明

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• 原子熒光檢測土壤中砷的解決方案

  原子熒光檢測土壤中砷的解決方案[詳細(xì)]

  2024-09-27 07:43

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