本文由 上?？茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2024-09-27 23:50 367閱讀次數(shù)

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• 氣相色譜儀檢定中常見問題的分析與解決

  氣相色譜儀由于其能夠?qū)ξ镔|(zhì)進(jìn)行物理分析的特殊性，已經(jīng)廣泛應(yīng)用到食品、環(huán)境、石化、YL等多個(gè)領(lǐng)域，而氣相色譜儀的檢定工作也隨之重要起來。 基于此， 本文就氣相色譜儀檢定過程中常見的問題以及解決方案進(jìn)行簡要闡述，其中著重講述檢測器點(diǎn)火失敗、色譜峰出現(xiàn)反常、信號(hào)無響應(yīng)等問題的解決方案。 [詳細(xì)]

  2024-09-27 23:50

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 凍干機(jī)制冷系統(tǒng)常見問題分析與解決

  凍干機(jī)制冷系統(tǒng)常見問題分析與解決[詳細(xì)]

  2016-09-05 00:00

  期刊論文

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• 凍干機(jī)真空系統(tǒng)常見問題分析與解決

  凍干機(jī)真空系統(tǒng)常見問題分析與解決[詳細(xì)]

  2016-08-18 00:00

  課件

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• 毛細(xì)管分析常見問題的解決

  毛細(xì)管分析常見問題的解決[詳細(xì)]

  2013-12-21 00:00

  安裝說明

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• GC毛細(xì)管分析常見問題的解決

  GC毛細(xì)管分析常見問題的解決[詳細(xì)]

  2009-04-13 00:00

  其它

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• 氣相色譜毛細(xì)管分析常見問題的解決

  氣相色譜毛細(xì)管分析常見問題的解決[詳細(xì)]

  2009-04-01 00:00

  應(yīng)用文章

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• ELISA實(shí)驗(yàn)中常見問題的解決

  ELISA操作常見問題1．樣品稀釋酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定，以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴(yán)格按使用說明書操作，如某些產(chǎn)品應(yīng)取10μl樣品進(jìn)行稀釋，個(gè)別用戶取5μl甚至1μl樣品進(jìn)行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準(zhǔn)確，檢測結(jié)果出現(xiàn)問題。2．試劑盒平衡試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠，樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短，ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。3．樣品和試劑的混勻稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗(yàn)的均一性。4．加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。5．溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗Z為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對(duì)較短。Z為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時(shí)間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻煩。因?yàn)?，不同試劑盒有不同的溫育時(shí)間和溫育溫度的選擇，隨意更改溫育時(shí)間或者溫育溫度將導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。6．洗板固相免疫測定技術(shù)是一種非均相免疫測定技術(shù)，需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過程中吸附的非特異成份分離開來，以保證ELISA測定的特異性。洗板對(duì)于ELISA測定來說，也是極其關(guān)鍵的一步。洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及時(shí)更換吸水紙，尤其是拍過酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。7．邊緣效應(yīng)使用96孔板的ELISA測定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)”，即外周孔顯色較ZX孔深。經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與ZX孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)”，并且可提高測定的重復(fù)性。8．顯色顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時(shí)間過短，結(jié)果偏低；顯色時(shí)間過長，空白或者非特異性顯色增加。9．比色比色要注意波長的選擇。以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而前者比色波長為450nm，后者為492nm，濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。因此，容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問題。其次，單波長或雙波長比色選擇的問題。所謂的單波長比色即是通常的以對(duì)顯色具有Zda吸收的波長如450nm或492nm進(jìn)行比色測定；而雙波長雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次，敏感波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和；非敏感波長下測定即改變波長至一定值，使得樣本測定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零，此時(shí)測得的吸光度即為臟物的吸光度值。Z后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。因此，雙波長比色測定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測定吸光度的影響的優(yōu)點(diǎn)。由于ELISA測定中單個(gè)空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性，也就是說每次測定或同次測定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測定值，故而在ELISA測定比色時(shí)，**是使用雙波長比色。綜上所述，盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會(huì)影響測定結(jié)果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對(duì)常見問題及原因歸納總結(jié)于下表。操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法問題可能原因解決方法顯色淡，靈敏度偏低1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長，溫度太高盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫2、試劑盒未充分平衡試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意4、保溫時(shí)間不足校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加按說明書要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)6、移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，**一次性使用7、蒸餾水水質(zhì)有問題使用新鮮合格的蒸餾水8、底物作用時(shí)間不足準(zhǔn)確定時(shí)背景深，全部呈有色,1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留濃縮洗液準(zhǔn)確配制；10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染2、樣品污染樣品應(yīng)新鮮采集，或低溫保存，防止污染3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時(shí)間過長調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，準(zhǔn)確定時(shí)4、吸嘴重復(fù)使用，未洗凈或消毒不徹底吸嘴盡可能一次性使用5、蒸餾水被污染使用新鮮蒸餾水6、酶等試劑混用不同批號(hào)試劑勿混用7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過多，加樣時(shí)間太長，導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時(shí)間延長合理安排實(shí)驗(yàn)，避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣重復(fù)性不佳1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長有短重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與**次接近2、保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性3、加樣量不一致樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴出現(xiàn)白板，陽性對(duì)照不顯色顯色液變質(zhì)更換新的顯色液洗滌液配制有誤請(qǐng)按說明書所示稀釋倍數(shù)配制未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入注意不要漏加終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂妹看渭右呵熬鶓?yīng)看清標(biāo)簽[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 氣相色譜儀日常維護(hù)與常見問題

  氣相色譜儀日常維護(hù)與常見問題[詳細(xì)]

  2016-09-13 00:00

  期刊論文

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• 毛細(xì)管色譜分析常見問題的解決

  毛細(xì)管色譜分析常見問題的解決[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:39

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 氣相色譜儀常見故障的解決

  氣相色譜儀常見故障的解決[詳細(xì)]

  2016-04-14 00:00

  期刊論文

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• 如何解決細(xì)胞培養(yǎng)常見問題

  如何解決細(xì)胞培養(yǎng)常見問題[詳細(xì)]

  2013-11-01 00:00

  安裝說明

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• 超聲波測厚儀校準(zhǔn)中常見問題及解決方式

  為保證校準(zhǔn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠，本文從校準(zhǔn)試塊、耦合劑、校準(zhǔn)方法、測厚儀探頭和聲速幾個(gè)方面分析超聲波測厚儀校準(zhǔn)工作中顯示示值不準(zhǔn)確的原因，并提出了相應(yīng)的建議。[詳細(xì)]

  2018-11-06 14:49

  操作手冊(cè)

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• 氣相色譜儀常見問題解決方案

  氣相色譜儀常見問題解決方案[詳細(xì)]

  2016-05-20 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 氣相色譜儀常見問題解決方案

  氣相色譜儀常見問題解決方案[詳細(xì)]

  2024-09-11 18:03

  報(bào)價(jià)單

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• 氣相色譜儀計(jì)量檢定

  一、溫度的計(jì)量氣相色譜儀對(duì)于溫度的計(jì)量主要體現(xiàn)在柱箱溫度上，一般有以下性能指標(biāo)：(1)柱箱溫度的穩(wěn)定性由于氣相色譜儀的正常工作條件規(guī)定環(huán)境溫度不大于35℃，而且柱箱溫度控制范圍在室溫以上20℃，因此計(jì)量柱箱溫度穩(wěn)定性項(xiàng)目時(shí)，溫度設(shè)置為儀器的Zdi可控溫度55℃即可（室溫35℃），這樣能比較嚴(yán)格的考查柱箱的溫度穩(wěn)定性。[詳細(xì)]

  2018-08-10 10:58

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 氣相色譜儀的故障診斷和解決措施

  氣相色譜儀的故障診斷和解決措施[詳細(xì)]

  2009-05-20 00:00

  專利

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• 可編程恒溫恒濕箱常見問題及如何解決

  可編程恒溫恒濕試驗(yàn)箱平時(shí)使用是偶爾會(huì)遇到一些問題，常見故障主要有哪些呢？這些故障又如何解決呢？詳細(xì)見資料。[詳細(xì)]

  2018-09-10 11:11

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 氣相色譜儀檢定方法探討

  近些年，食品、藥品安全得到社會(huì)的普遍重視，使得色譜儀檢定得以快速發(fā)展，然而實(shí)際應(yīng)用中有可能出現(xiàn)各種各樣的問題，而導(dǎo)致色譜儀檢定不準(zhǔn)確。文章結(jié)合具體實(shí)際案例，對(duì)有關(guān)氣相液相色譜儀檢定方法進(jìn)行研究。[詳細(xì)]

  2018-07-12 17:29

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 檢定氣相色譜儀應(yīng)當(dāng)注意的幾個(gè)問題

  檢定氣相色譜儀應(yīng)當(dāng)注意的幾個(gè)問題[詳細(xì)]

  2024-09-18 18:07

  選購指南

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• 千分尺的檢定問題分析與修理方法

  根據(jù)千分尺的檢定規(guī)程，對(duì)檢定中出現(xiàn)的不合格項(xiàng)和實(shí)際使用中遇到的問題進(jìn)行分析，提供相應(yīng)的修理方法，提高千分尺的示值極ng確度，以滿足檢定要求。[詳細(xì)]

  2024-09-14 00:03

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