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防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書

本文由 上海撫生實業(yè)有限公司 整理匯編

2018-10-09 10:00 265閱讀次數(shù)

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防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書操作注意事項1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。防御素β125(DEFβ125)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlAR人雄激素受體規(guī)格:48T/96TABP人雄激素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TTD-Ag人胸腺依賴性抗原規(guī)格:48T/96TTP-5人胸腺五肽規(guī)格:48T/96TThymosinα1人胸腺肽α1規(guī)格:48T/96TThymosin人胸腺肽規(guī)格:48T/96TTP人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶規(guī)格:48T/96TTSLP人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96TTSLP人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素規(guī)格:48T/96TTARC/CCL17人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子規(guī)格:48T/96TTI-Ag人胸腺非依賴性抗原規(guī)格:48T/96TTECK/CCL25人胸腺表達(dá)趨化因子規(guī)格:48T/96TTLa人胸腺白血病抗原規(guī)格:48T/96TBRAK/CXCL14人胸腎表達(dá)趨化因子規(guī)格:48T/96TTS人胸苷酸合成酶規(guī)格:48T/96TSmad7人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7規(guī)格:48T/96TSmad1人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子規(guī)格:48T/96TNN-T4人新生甲狀腺素規(guī)格:48T/96TN-TSH人新生兒促甲狀腺素規(guī)格:48T/96Th-FABP人心型脂肪酸結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96TANP人心鈉肽規(guī)格:48T/96TANP人心鈉肽規(guī)格:48T/96TANF人心納素規(guī)格:48T/96T人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit,48T/96T人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96TCT-1人心肌營養(yǎng)素1規(guī)格:48T/96TcTnT人心肌特異性肌鈣蛋白T規(guī)格:48T/96TANKRD1人心肌錨蛋白重復(fù)域1規(guī)格:48T/96TCMLC-1人心肌肌凝蛋白輕鏈1規(guī)格:48T/96TcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TcTn-Ⅰ人心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TCMR人協(xié)同刺激分子受體規(guī)格:48T/96TAFP-L3人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白規(guī)格:48T/96TAFP-L2人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白規(guī)格:48T/96TAFP-L1人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白規(guī)格:48T/96TAAV人腺相關(guān)病毒規(guī)格:48T/96TAAV人腺相關(guān)病毒規(guī)格:48T/96TADA人腺苷脫氨酶規(guī)格:48T/96TAC-1人腺苷酸環(huán)化酶1規(guī)格:48T/96TABCG2人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2規(guī)格:48T/96TABCA1人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1規(guī)格:48T/96TADV-Ag人腺病毒抗原規(guī)格:48T/96TAPAF1人銜接蛋白酶活化因子1規(guī)格:48T/96TASP人酰化刺激蛋白規(guī)格:48T/96TFSP人纖維母細(xì)胞表面抗原規(guī)格:48T/96TFSP人纖維母細(xì)胞表面抗原規(guī)格:48T/96TFRA人纖維連接素相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96Tfgl2人纖維介素蛋白規(guī)格:48T/96TTAFI人纖溶YZ因子規(guī)格:48T/96TPAI-1人纖溶酶原激活物YZ因子1規(guī)格:48T/96TPAI人纖溶酶原激活物YZ因子規(guī)格:48T/96TPLGA人纖溶酶原激活劑規(guī)格:48T/96TPlg人纖溶酶原規(guī)格:48T/96TPAP人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物規(guī)格:48T/96TPL/Fbn人纖溶酶/纖維蛋白溶酶規(guī)格:48T/96TFN人纖連蛋白規(guī)格:48T/96Tfibromodulin人纖調(diào)蛋白規(guī)格:48T/96TBV人細(xì)菌性陰道病規(guī)格:48T/96TCyclin-D3人細(xì)胞周期素D3規(guī)格:48T/96TCyclin-D2人細(xì)胞周期素D2規(guī)格:48T/96TCyclin-D1人細(xì)胞周期素D1規(guī)格:48T/96TSOCS-3人細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)YZ因子3規(guī)格:48T/96TERK人細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶規(guī)格:48T/96TMEPE人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白規(guī)格:48T/96TCYP21B人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶規(guī)格:48T/96TCYP21A人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶規(guī)格:48T/96TCyt-C人細(xì)胞色素C規(guī)格:48T/96Tcytovillin/ezrin人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白規(guī)格:48T/96Tcytovillin/ezrin人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白規(guī)格:48T/96TSmIg人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白規(guī)格:48T/96TCYFRA21-1人細(xì)胞角蛋白21-1片段規(guī)格:48T/96TCK-20人細(xì)胞角蛋白20規(guī)格:48T/96TCK-19人細(xì)胞角蛋白1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