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人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)
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2018-11-24 10:00 793閱讀次數(shù)
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碘[125I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)【藥品名稱(chēng)】通用名:碘[125I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]HumanLuteiniziingHormoneRadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音:Dian[125I]Rencuhuangtishengcheng極suFangshemianyifenxiYaohe【成分】規(guī)格成分100管50管制品狀態(tài)1)LH標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液體2)125I-LH(紅色)1瓶1瓶?jī)龈善?)兔抗-LH抗體(藍(lán)色)1瓶1瓶?jī)龈善?)驢抗兔免疫分離劑1瓶(50ml)1瓶(25ml)液體5)LH質(zhì)控血清2瓶(每瓶0.5ml)2瓶(每瓶0.5ml)液體【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)呈疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物?!痉派湫院怂匕胨テ凇勘酒匪煤怂貫榈鈁125I],其物理半衰期(T1/2)為60天?!九R床意義】LH由垂體前葉嗜堿細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基,α亞基與FSH、TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu),兩者通過(guò)非共價(jià)鍵連接,分子量約為30KD。LH和FSH都呈脈沖式分泌,故有較明顯的日內(nèi)和日間變異。女性月極n中期的LH高峰促成排卵;男性L(fǎng)H主要刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌睪丸酮,又協(xié)同F(xiàn)SH促進(jìn)精子成熟。LH的測(cè)定在預(yù)測(cè)排卵,診斷不孕癥,研究和判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能及有關(guān)內(nèi)分泌疾病的ZL監(jiān)測(cè)等方面有重要意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的臨床藥理研究也有很大價(jià)值。本藥盒采用放射免疫分析方法,測(cè)定人血清中的LH含量。【測(cè)定原理】應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的LH和加入的125I-LH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)。125I-LH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中LH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知標(biāo)準(zhǔn)LH含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)YZ曲線(xiàn)。從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中LH的含量。【適用儀器】適用于各類(lèi)γ-放射免疫分析儀?!緲颖疽蟆咳§o脈血分離血清,待測(cè);如不當(dāng)天測(cè)量,可將樣品密封后,置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),2~8℃保存不應(yīng)超過(guò)1周,-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月?!居梅ㄓ昧俊?試劑配制、使用方法和保存LH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用。濃度分別為0、5、10、25、50、100、200mIU/ml。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定,未開(kāi)封標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存在標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。125I-LH:凍干品,100管用10ml蒸餾水溶解,50管用5ml蒸餾水溶解,如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)。2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。兔抗-LH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用。加樣前充分搖勻!2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后2~8℃保存45天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后搖勻。LH質(zhì)控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。2測(cè)定步驟取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0-S5和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑!)包括待測(cè)樣品要搖勻,并且**平衡到室溫。操作程序表單位:μl管別試劑總T管NSB管S0~S6管質(zhì)控或待測(cè)樣品管LH標(biāo)準(zhǔn)品300(S0)200質(zhì)控或待測(cè)樣品200125I-LH100100100100兔抗-LH抗體100100混勻,4℃放置過(guò)一夜(16~24小時(shí))驢抗兔免疫分離劑500500500充分搖勻后,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,吸棄上清液,測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。3數(shù)據(jù)處理聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶(hù)一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶(hù)使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。手工作圖或計(jì)算器處理:百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(理想化時(shí)是一條直線(xiàn))。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是Z后的濃度值。3.2.4計(jì)算器處理:使用有線(xiàn)性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。濃度單位mIU/ml項(xiàng)目NSB05102550100200百分結(jié)合率(%)B/TB/B02.240857659342611Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線(xiàn)參數(shù)A=3.48B=-2.34R=-0.995ED75=10.3=30.0ED25=87.7【參考正常值】正常人血清參考值:男性:5~30mIU/ml女性:6~217mIU/ml濾泡期:2~30mIU/ml黃體期:0~20mIU/ml排卵高峰:40~200mIU/ml由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室**能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍?!井a(chǎn)品性能指標(biāo)】標(biāo)準(zhǔn)范圍:5~200mIU/ml靈敏度:~1.0mIU/ml精密度:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。使用期限:見(jiàn)產(chǎn)品外包裝。【禁忌】本品僅供體外診斷用!【注意事項(xiàng)】收到藥盒后,盡快存放在2~8℃。使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀此說(shuō)明書(shū)。吸棄上清液時(shí),注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù),放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。【貯藏】2~8℃保存?!居行凇?個(gè)月??贵w溶解方法:兔抗-LH抗體:用蒸餾水溶解,100管產(chǎn)品每瓶抗體加ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加ml(如不填寫(xiě),50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請(qǐng)直接使用)。
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人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)
- 碘[125I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)【藥品名稱(chēng)】通用名:碘[125I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]HumanLuteiniziingHormoneRadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音:Dian[125I]Rencuhuangtishengcheng極suFangshemianyifenxiYaohe【成分】規(guī)格成分100管50管制品狀態(tài)1)LH標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液體2)125I-LH(紅色)1瓶1瓶?jī)龈善?)兔抗-LH抗體(藍(lán)色)1瓶1瓶?jī)龈善?)驢抗兔免疫分離劑1瓶(50ml)1瓶(25ml)液體5)LH質(zhì)控血清2瓶(每瓶0.5ml)2瓶(每瓶0.5ml)液體【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)呈疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物。【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I],其物理半衰期(T1/2)為60天?!九R床意義】LH由垂體前葉嗜堿細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基,α亞基與FSH、TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu),兩者通過(guò)非共價(jià)鍵連接,分子量約為30KD。LH和FSH都呈脈沖式分泌,故有較明顯的日內(nèi)和日間變異。女性月極n中期的LH高峰促成排卵;男性L(fǎng)H主要刺激睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌睪丸酮,又協(xié)同F(xiàn)SH促進(jìn)精子成熟。LH的測(cè)定在預(yù)測(cè)排卵,診斷不孕癥,研究和判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能及有關(guān)內(nèi)分泌疾病的ZL監(jiān)測(cè)等方面有重要意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的臨床藥理研究也有很大價(jià)值。本藥盒采用放射免疫分析方法,測(cè)定人血清中的LH含量?!緶y(cè)定原理】應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的LH和加入的125I-LH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫反應(yīng)。125I-LH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中LH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知標(biāo)準(zhǔn)LH含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)YZ曲線(xiàn)。從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中LH的含量?!具m用儀器】適用于各類(lèi)γ-放射免疫分析儀?!緲颖疽蟆咳§o脈血分離血清,待測(cè);如不當(dāng)天測(cè)量,可將樣品密封后,置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),2~8℃保存不應(yīng)超過(guò)1周,-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月?!居梅ㄓ昧俊?試劑配制、使用方法和保存LH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用。濃度分別為0、5、10、25、50、100、200mIU/ml。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定,未開(kāi)封標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存在標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。125I-LH:凍干品,100管用10ml蒸餾水溶解,50管用5ml蒸餾水溶解,如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)。2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。兔抗-LH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用。加樣前充分搖勻!2~8℃保存標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后2~8℃保存45天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后搖勻。LH質(zhì)控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。2測(cè)定步驟取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0-S5和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑!)包括待測(cè)樣品要搖勻,并且**平衡到室溫。操作程序表單位:μl管別試劑總T管NSB管S0~S6管質(zhì)控或待測(cè)樣品管LH標(biāo)準(zhǔn)品300(S0)200質(zhì)控或待測(cè)樣品200125I-LH100100100100兔抗-LH抗體100100混勻,4℃放置過(guò)一夜(16~24小時(shí))驢抗兔免疫分離劑500500500充分搖勻后,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,吸棄上清液,測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。3數(shù)據(jù)處理聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶(hù)一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶(hù)使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。手工作圖或計(jì)算器處理:百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(理想化時(shí)是一條直線(xiàn))。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是Z后的濃度值。3.2.4計(jì)算器處理:使用有線(xiàn)性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。濃度單位mIU/ml項(xiàng)目NSB05102550100200百分結(jié)合率(%)B/TB/B02.240857659342611Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線(xiàn)參數(shù)A=3.48B=-2.34R=-0.995ED75=10.3=30.0ED25=87.7【參考正常值】正常人血清參考值:男性:5~30mIU/ml女性:6~217mIU/ml濾泡期:2~30mIU/ml黃體期:0~20mIU/ml排卵高峰:40~200mIU/ml由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室**能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍?!井a(chǎn)品性能指標(biāo)】標(biāo)準(zhǔn)范圍:5~200mIU/ml靈敏度:~1.0mIU/ml精密度:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。使用期限:見(jiàn)產(chǎn)品外包裝?!窘伞勘酒穬H供體外診斷用!【注意事項(xiàng)】收到藥盒后,盡快存放在2~8℃。使用前請(qǐng)?jiān)敿?xì)閱讀此說(shuō)明書(shū)。吸棄上清液時(shí),注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù),放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)技術(shù)培訓(xùn)?!举A藏】2~8℃保存?!居行凇?個(gè)月。抗體溶解方法:兔抗-LH抗體:用蒸餾水溶解,100管產(chǎn)品每瓶抗體加ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加ml(如不填寫(xiě),50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請(qǐng)直接使用)。[詳細(xì)]
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2018-11-24 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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貓促黃體生成激素(LH)說(shuō)明書(shū)
- www.biokanu.com貓促黃體生成激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定貓血清,血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成激素(LH)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中貓促黃體生成激素(LH)水平。用純化的貓促黃體生成激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成激素(LH),再與HRP標(biāo)記的促黃體生成激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的貓促黃體生成激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中貓促黃體生成激素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:45ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔促黃體生成激素(LH)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 兔促黃體生成激素(LH)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)(96T)本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:2.5mIU/ml-80mIU/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成激素(LH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔促黃體生成激素(LH)水平。用純化的兔促黃體生成激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成激素(LH),再與HRP標(biāo)記的促黃體生成激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中兔促黃體生成激素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160mIU/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80mIU/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40mIU/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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猴子促黃體生成激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- www.biokanu.com猴子促黃體生成激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定猴子血清,血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體生成激素(LH)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中猴子促黃體生成激素(LH)水平。用純化的猴子促黃體生成激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成激素(LH),再與HRP標(biāo)記的促黃體生成激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中猴子促黃體生成激素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:3600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為2400ng/L,1600ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:100ng/L-3000ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人促黃體激素(LH)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 人促黃體激素(LH)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-04-30 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠促黃體激素(LH)說(shuō)明書(shū)
- www.biokanu.com大鼠促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體激素(LH)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠促黃體激素(LH)水平。用純化的大鼠促黃體激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體激素(LH),再與HRP標(biāo)記的促黃體激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠促黃體激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠促黃體激素(LH)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:45ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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雌二醇(E2)放射免疫分析藥盒使用說(shuō)明書(shū)
- 碘[125I]雌二醇放射免疫分析藥盒使用說(shuō)明書(shū)【藥品名稱(chēng)】通用名:碘[125I]雌二醇放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]EstradiolRadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音:Dian[125I]Ci’erchunFangshemianyifenxiYaohe簡(jiǎn)稱(chēng):碘[125I]-E2放免藥盒【成分】1.125I-E2:1瓶,紅色液體。放射性活度<0.11MBq/瓶(100管)。2.E2標(biāo)準(zhǔn)品:7瓶,淡黃色液體(去激素人血清配制)。濃度分別為:0;10;50;100;250;500;1000pg/ml。3.兔抗-E2抗體:1瓶,藍(lán)色液體(兔抗)。4.質(zhì)量血清:2瓶,淡黃色液體。參考值范圍:質(zhì)控血清Ⅰ56.5±12.8pg/ml質(zhì)控血清Ⅱ248.6±58.6pg/ml5.分離試劑:1瓶,懸浮液(含驢抗兔血清和PEG)?!痉派湫院怂匕胨テ凇康鈁125I]物理半衰期(T1/2)為59.7天?!緶y(cè)定原理】本藥盒采用競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析方法,將放射性標(biāo)記抗原和非標(biāo)記待測(cè)抗原同時(shí)與限量特異抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng),通過(guò)分離未結(jié)合的標(biāo)記抗原,測(cè)定標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物的放射性計(jì)數(shù),利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和RIA的數(shù)學(xué)模型計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量?!九R床意義】人體內(nèi)雌二醇是雌激素中生物活性Z強(qiáng)的雌激素。男性雌二醇由睪丸產(chǎn)生,女性則由卵巢分泌。循環(huán)血液中的雌二醇絕大部分與性激素結(jié)合球蛋白結(jié)合,在肝臟代謝,變成水溶性硫酸酯或葡萄糖醛酸酯,經(jīng)腎臟排出。男性E2水平升高主要是由睪丸或肝臟腫瘤所致。女性E2會(huì)促進(jìn)生殖上皮、乳腺、長(zhǎng)骨的生長(zhǎng)和第二性征的發(fā)育。測(cè)定E2對(duì)青春期前女性?xún)?nèi)分泌疾病的診斷,對(duì)閉經(jīng)、月極n紊亂、卵巢功能評(píng)估有重要意義,是研究生殖生理和診斷不孕癥的重要手段?!窘伞渴軝z者在試驗(yàn)期間不得接受內(nèi)放射性核素檢查或ZL?!緲悠凡杉咳§o脈血分離血清,勿需加防腐劑及其它處理,溶血和脂血標(biāo)本影響測(cè)定結(jié)果。如不立即測(cè)量,可將血清樣品密封后,置于2-8℃或-20℃存儲(chǔ)。2-8℃保存不應(yīng)超過(guò)48小時(shí);-20℃保存不超過(guò)2個(gè)月,應(yīng)避免反復(fù)凍融?!静僮鞒绦颉咳@底聚苯乙烯試管若干,編號(hào)后按以下加樣順序表進(jìn)行加樣。加樣前所有試劑包括待測(cè)樣品要搖勻。為了加樣準(zhǔn)確各種試劑和樣品**平衡到室溫之后加樣。加樣程序表單位:μl管別試劑總T管NSB管S0管S1~6管樣品或質(zhì)控管純化水100“0”標(biāo)準(zhǔn)品100100S1~6標(biāo)準(zhǔn)品100樣品或質(zhì)控血清100125I-E2100100100100100兔抗-E2抗體100100100充分混勻置37℃水浴1.5小時(shí)。分離試劑500500500500充分搖勻,3600轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,吸棄上清液。用γ-測(cè)量?jī)x測(cè)定各管沉淀的放射性計(jì)數(shù)。【數(shù)據(jù)處理】1.設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為:B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%以上各標(biāo)準(zhǔn)品B/B0%為縱軸,以相應(yīng)濃度為橫軸,在logit-log或半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制劑量反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),待測(cè)樣品濃度可在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出。2.計(jì)算機(jī)處理:采用RIA數(shù)據(jù)處理軟件,選擇合適的數(shù)學(xué)模型計(jì)算結(jié)果。【技術(shù)指標(biāo)】非特異結(jié)合率(NSB):<5%零管結(jié)合率:>30%靈敏度:<5pg/ml。精密度:批內(nèi)變異系數(shù)<10%,批間變異系數(shù)<15%。準(zhǔn)確度:回收率94-109%.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):相關(guān)系數(shù)>0.990。單位換算:(pmol/ml)=(pg/ml)×3.67【注意事項(xiàng)】所有試劑包括待測(cè)樣品事先應(yīng)在室溫平衡。使用時(shí)須充分搖勻。分離試劑在2~8℃保存,不可冰凍。離心速度可用3000轉(zhuǎn)/分,但至少30分鐘。離心時(shí)機(jī)內(nèi)溫度在4~25℃之間。不同批號(hào)試劑不能混合使用,建議樣品做雙管檢驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)使用放射性同位素,操作應(yīng)由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員按放免檢驗(yàn)的規(guī)定進(jìn)行。產(chǎn)生的放射性廢物應(yīng)按國(guó)家有關(guān)規(guī)定處理?!驹袐D、哺乳期婦女、兒童用藥】無(wú)特殊要求【正常參考值】男:青春期前:<10pg/ml女:青春期前:<8pg/ml成人:<70pg/ml卵泡期:10-90pg/ml排卵期:100-500pg/ml黃體期:50-240pg/ml絕經(jīng)期:<60pg/ml各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件和接觸的人群建立自己的正常值范圍。以上數(shù)據(jù)僅供參考?!举A藏】2~8℃遮光保存,常溫運(yùn)輸5天內(nèi)不影響藥盒質(zhì)量?!居行凇恳粋€(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-24 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人促黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒
- 人促黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-16 00:00
專(zhuān)利
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人促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 人促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-20 15:20
應(yīng)用文章
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大鼠促黃體激素(LH)說(shuō)明書(shū)AE90609Ra
- 大鼠促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)AE90609Ra使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術(shù)原理,來(lái)檢測(cè)大鼠促黃體激素(LH),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。用途:用于大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體激素(LH)測(cè)定。工作原理本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定樣品中大鼠促黃體激素(LH)水平。向預(yù)先包被了大鼠促黃體激素(LH)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入大鼠促黃體激素(LH),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗LH抗體。再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠促黃體激素(LH)的濃度呈正相關(guān)。試劑盒組成試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:3600ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存鏈霉親和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素標(biāo)記的抗LH抗體0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的試劑和器材1.37℃恒溫箱。2.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。3.精密移液器及一次性吸頭4.蒸餾水,5.一次性試管6.吸水紙注意事項(xiàng)1.從2-8℃取出的試劑盒,在開(kāi)啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差3.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).4.為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。5.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。6.底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中標(biāo)本要求1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。操作程序1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)海ū驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。)1800ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液900ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品120μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液450ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品120μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液225ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品120μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液112.5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品120μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.根據(jù)代測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加樣:1)空白孔,空白對(duì)照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗LH抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)代測(cè)樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗LH抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。8.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后10分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。操作程序總結(jié):檢測(cè)范圍:100ng/L→2000ng/L。保存:2-8℃。有效期:6個(gè)月(2-8℃)。[詳細(xì)]
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2018-09-21 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠碘[125I]胰島素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)
- 小鼠碘[125I]胰島素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-09-22 00:00
操作手冊(cè)
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牛促黃體激素(LH)說(shuō)明書(shū)間接法
- www.biokanu.com牛促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體激素(LH)的含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用間接法測(cè)定標(biāo)本中牛促黃體激素(LH)水平。用純化的牛促黃體激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的促黃體激素(LH)標(biāo)準(zhǔn)品和未知濃度的促黃體激素(LH)待檢樣品,溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中牛促黃體激素(LH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品S1(30ng/L)0.5ml×1瓶2鏈霉親和素-HRP6ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品S2(20ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條標(biāo)準(zhǔn)品S3(10ng/L)0.5ml×1瓶4生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體6ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品S4(5ng/L)0.5ml×1瓶5顯色劑A液6ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品S5(2.5ng/L)0.5ml×1瓶6顯色劑B液6ml×1/瓶9說(shuō)明書(shū)1份7終止液6ml×1瓶10封板膜2張標(biāo)本要求1.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融操作步驟1.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,在樣本反應(yīng)孔中加入50微升樣本,蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。3.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用4.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)4次,拍干。5.加生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體:每孔加入生物素標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl。37℃溫育30分鐘6.洗滌:操作同4。7.加鏈霉親和素-HRP:每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。8.洗滌:操作同4。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值待入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。線(xiàn)形范圍:1ng/L-37ng/L規(guī)格:96人份/盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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羊促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷羊(Sheep)促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被促黃體激素(LH)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-15 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔子促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 兔子促黃體激素(LH)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:14
標(biāo)準(zhǔn)
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促卵泡生成激素(FSH)放免試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 核準(zhǔn)和修改日期:2007年08月20日碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說(shuō)明書(shū)【藥品名稱(chēng)】通用名:碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒英文名:Iodine[125I]HumanFollicleStimulatingHormoneRadioimmunoassayKit漢語(yǔ)拼音:Dian[125I]Renculuanpaoshengcheng極suFangshemianyifenxiYaohe【成分】規(guī)格成分100管50管制品狀態(tài)1)FSH標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S6)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)7瓶(S0:5ml,其它各1ml)液體2)125I-FSH(紅色)1瓶1瓶?jī)龈善?)兔抗-FSH抗體(藍(lán)色)1瓶1瓶?jī)龈善?)驢抗兔免疫分離劑1瓶(50ml)1瓶(25ml)液體5)FSH質(zhì)控血清2瓶(每瓶1ml)2瓶(每瓶1ml)液體【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清,無(wú)沉淀或絮狀物;凍干組分應(yīng)呈疏松狀,復(fù)溶后應(yīng)無(wú)沉淀或絮狀物?!痉派湫院怂匕胨テ凇勘酒匪煤怂貫榈鈁125I],其物理半衰期(T1/2)為60天?!九R床意義】促卵泡生成激素(FollicleStimulatingHormone,FSH)是由垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素,其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基,α亞基與LH、TSH和HCG相同,只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu),兩者通過(guò)非共價(jià)鍵連接,分子量為32KD。FSH在卵泡發(fā)育過(guò)程中的作用包括:促進(jìn)內(nèi)膜細(xì)胞的分化;促進(jìn)顆粒細(xì)胞增生;促進(jìn)卵泡液分泌,使卵泡及其內(nèi)腔增大,同時(shí)伴有整個(gè)卵巢的增大。實(shí)驗(yàn)表明:卵泡發(fā)育的以上幾個(gè)階段都須有FSH的參與,而且只有當(dāng)FSH與LH共同作用時(shí),成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。對(duì)男性來(lái)說(shuō),F(xiàn)SH的作用是促進(jìn)生精上皮細(xì)胞的發(fā)育和精子的成熟。本藥盒用于血清中FSH含量的測(cè)定,對(duì)診斷男、女不孕癥、性功能減退、青春期延遲、性早熟、子宮內(nèi)膜異位等疾病有非常重要的意義。對(duì)作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的臨床藥理研究也有很大價(jià)值?!緶y(cè)定原理】應(yīng)用均相競(jìng)爭(zhēng)原理,標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的FSH和加入的125I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。125I-FSH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑(PR)將結(jié)合部分(B)與游離部分(F)分離后,測(cè)定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度,并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知FSH標(biāo)準(zhǔn)含量與對(duì)應(yīng)結(jié)合率作圖,即得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。從標(biāo)準(zhǔn)YZ曲線(xiàn)上查知對(duì)應(yīng)結(jié)合率的待測(cè)樣品中FSH的含量?!具m用儀器】適用于各類(lèi)γ-放射免疫分析儀?!緲颖疽蟆咳§o脈血分離血清,待測(cè);如不立即測(cè)量,可將樣本密封后,置于2~8℃或-20℃儲(chǔ)存?zhèn)錅y(cè),2~8℃保存不應(yīng)超過(guò)48小時(shí),-20℃保存不超過(guò)1個(gè)月?!居梅ㄓ昧俊?試劑配制、使用方法和保存FSH標(biāo)準(zhǔn)品:液體,直接使用,標(biāo)準(zhǔn)濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標(biāo)準(zhǔn)2~8℃保存,42天內(nèi)穩(wěn)定;未開(kāi)蓋的標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。125I-FSH:凍干品,用蒸餾水溶解,100管10ml溶解,50管5ml溶解。如一次加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi),2~8℃保存,標(biāo)識(shí)的有效期內(nèi)穩(wěn)定。兔抗-FSH抗體:凍干品,用蒸餾水溶解,溶解方法見(jiàn)封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過(guò)100管時(shí),兩瓶溶解后混合使用??贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天,凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。驢抗兔免疫分離劑:液體,直接使用,但加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。開(kāi)封后Z多穩(wěn)定45天。若加樣超過(guò)100管,兩瓶混合后搖勻。FSH質(zhì)控血清:使用方法,保存條件,有效期及附值,詳見(jiàn)質(zhì)控血清使用說(shuō)明書(shū)。2測(cè)定步驟取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號(hào)筆或特殊鉛筆編號(hào)NSB、S0-S6和待測(cè)樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑!)包括待測(cè)樣品要搖勻,并且**平衡到室溫。操作程序表單位:μl管別試劑NSB管S0~S6管待測(cè)樣品管質(zhì)控管FSH標(biāo)準(zhǔn)品300(S0)200待測(cè)樣品200FSH質(zhì)控血清200125I-FSH100100100100兔抗-FSH抗體100100100混勻,任取三管測(cè)總T,36-38℃溫育16~24小時(shí)驢抗兔免疫分離劑500500500500充分搖勻后,室溫放置15分鐘,3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,吸棄上清,測(cè)各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。3數(shù)據(jù)處理聯(lián)機(jī)處理:由電腦自動(dòng)處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶(hù)一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶(hù)使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。手工作圖或計(jì)算器處理:百分結(jié)合率計(jì)算:設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0,各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B,非特異管計(jì)數(shù)為NSB,則百分結(jié)合率計(jì)算公式為B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×1**%3.2.2logit計(jì)算:各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為logit=ln[(B/B0)/(1-B/B0)]3.2.3手工作圖:以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(理想化時(shí)是一條直線(xiàn))。根據(jù)待測(cè)樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標(biāo)紙,查出的數(shù)值應(yīng)取反對(duì)數(shù)才是Z后的濃度值。3.2.4計(jì)算器處理:使用有線(xiàn)性擬合功能的計(jì)算器,可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值,具體操作方法請(qǐng)查閱計(jì)算器的使用說(shuō)明書(shū)。3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)舉例(僅供參考,不得用于實(shí)際計(jì)算)。濃度單位mIU/ml項(xiàng)目NSB02.55102550100百分結(jié)合率(%)B/TB/B02.24584.877.762.536.421.911.4Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線(xiàn)參數(shù)A=2.82B=-2.41R=-0.9995ED75=5.21=14.8ED25=42.3【參考正常值】正常人血清參考值:男性:2.012mIU/ml(n=60)女性:2.515mIU/ml(n=98)濾泡早期:3.510.0mIU/ml黃體期:3.09.0mIU/ml絕經(jīng)期:14120mIU/ml(n=17)由于地區(qū)及使用儀器不同,所測(cè)的正常值會(huì)存在一定的差異,所以本說(shuō)明書(shū)提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室**能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍?!井a(chǎn)品性能指標(biāo)】標(biāo)準(zhǔn)范圍:2.5100mIU/ml靈敏度:<1.0mIU/ml精密度:批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<10%;批間變異系數(shù)(CV)<15%。使用期限:見(jiàn)產(chǎn)品外包裝?!窘伞勘酒穬H供體外診斷用!【注意事項(xiàng)】收到試劑盒后,盡快存放在2~8℃。實(shí)驗(yàn)前全部試劑應(yīng)放置室溫下平衡。吸棄上清液時(shí),注意不得損失沉淀物,否則將明顯影響測(cè)定結(jié)果。不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。藥盒請(qǐng)?jiān)谟行趦?nèi)使用。臨床標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性,請(qǐng)按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù),放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)技術(shù)培訓(xùn)?!举A藏】2~8℃保存?!居行凇?個(gè)月?!緢?zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》,國(guó)家藥典委員會(huì)編2005年5月,WS1-(R-64)-2004Z??贵w溶解方法:兔抗-FSH抗體:用蒸餾水溶解,100管產(chǎn)品每瓶抗體加ml,50管產(chǎn)品抗體每瓶加ml(如不填寫(xiě),50管藥盒用5ml溶解,100管藥盒用10ml溶解,若為液體抗體請(qǐng)直接使用)。[詳細(xì)]
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2018-11-24 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-13 00:00
專(zhuān)利
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小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠促黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠促黃體激素(LH)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2014-09-29 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠促黃體激素(LH)試劑盒使用
- 檢測(cè)范圍:48T1.5ng/L-40ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中促黃體激素(LH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠促黃體激素(LH)水平。用純化的大鼠促黃體激素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體激素(LH),再與HRP標(biāo)記的促黃體激素(LH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促黃體激素(LH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠促黃體激素(LH)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
- 大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-27 23:47
標(biāo)準(zhǔn)
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