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EZ Mark預染蛋白質分子量標準說明書
本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編
2018-09-29 10:02 788閱讀次數(shù)
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訂購信息:產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號規(guī)格保存價格(元)EZMark彩色預染蛋白質標準D1009L1250250μl-20℃280EZMark彩色預染蛋白質標準D1009L125150μl-20℃110產(chǎn)品描述:EZMark彩色預染蛋白分子量標準包含了從15k到130k共8種純化的預染蛋白質(15,20,25,35,50,70,100,130kD),其中70kD條帶為橙色,其余條帶為藍色,適合作為SDS-PAGE或Western的蛋白質分子量標準。本彩色預染蛋白質分子量標準已經(jīng)配制在1×SDS-PAGE上樣緩沖液中,可以直接使用,無需煮沸。根據(jù)上樣孔的大小,本彩色預染蛋白質分子量標準通常每次上樣5-10微升(5×1.5mm膠孔5ul足夠),即可在電泳時、電泳后或轉膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶。使用方法:1.室溫下解凍后輕輕混勻或者是用移液槍緩慢吹打均勻,不要煮沸。2.取本產(chǎn)品5ul與實驗樣品同時進行聚丙烯酰胺凝膠電泳;建議有條件的實驗室在初次使用本產(chǎn)品時可以根據(jù)自身的實驗條件和實驗習慣通過預實驗確定合適的上樣量,這樣可以節(jié)約成本,同時獲得效果更佳的實驗圖片。3.未使用的蛋白分子質量標準保存于儲存條件或短期在4℃放置。運輸與保存方法:冰袋運輸。-10℃到-30℃條件下儲存。注意事項:通常電泳至藍色的溴酚藍基本上到達凝膠底部或預染分子量標準充分展開時停止電泳。購置凍干Marker產(chǎn)品的客戶,如果需要自己配制凍存液,可參考配方:【儲存液】67mMTris-HCl,pH7.5,20mMDTT,5mMEDTA,2%(W/V)SDS,33%(W/V)Glycerol,0.02%(W/V)proclin300.Marker上樣多或者某些特定情況下,35和50k之間會顯示的弱帶為40k。
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EZ Mark預染蛋白質分子量標準說明書
訂購信息:產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號規(guī)格保存價格(元)EZMark彩色預染蛋白質標準D1009L1250250μl-20℃280EZMark彩色預染蛋白質標準D1009L125150μl-20℃110產(chǎn)品描述:EZMark彩色預染蛋白分子量標準包含了從15k到130k共8種純化的預染蛋白質(15,20,25,35,50,70,100,130kD),其中70kD條帶為橙色,其余條帶為藍色,適合作為SDS-PAGE或Western的蛋白質分子量標準。本彩色預染蛋白質分子量標準已經(jīng)配制在1×SDS-PAGE上樣緩沖液中,可以直接使用,無需煮沸。根據(jù)上樣孔的大小,本彩色預染蛋白質分子量標準通常每次上樣5-10微升(5×1.5mm膠孔5ul足夠),即可在電泳時、電泳后或轉膜后觀察到非常清楚的蛋白條帶。使用方法:1.室溫下解凍后輕輕混勻或者是用移液槍緩慢吹打均勻,不要煮沸。2.取本產(chǎn)品5ul與實驗樣品同時進行聚丙烯酰胺凝膠電泳;建議有條件的實驗室在初次使用本產(chǎn)品時可以根據(jù)自身的實驗條件和實驗習慣通過預實驗確定合適的上樣量,這樣可以節(jié)約成本,同時獲得效果更佳的實驗圖片。3.未使用的蛋白分子質量標準保存于儲存條件或短期在4℃放置。運輸與保存方法:冰袋運輸。-10℃到-30℃條件下儲存。注意事項:通常電泳至藍色的溴酚藍基本上到達凝膠底部或預染分子量標準充分展開時停止電泳。購置凍干Marker產(chǎn)品的客戶,如果需要自己配制凍存液,可參考配方:【儲存液】67mMTris-HCl,pH7.5,20mMDTT,5mMEDTA,2%(W/V)SDS,33%(W/V)Glycerol,0.02%(W/V)proclin300.Marker上樣多或者某些特定情況下,35和50k之間會顯示的弱帶為40k。[詳細]
2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊
預染蛋白質Marker
有紫/黃/紅/橘/綠/藍色的預染色蛋白條帶可供選擇,
逗點生物預染蛋白質Marker,為您的實驗保駕護航。
產(chǎn)品支持常溫運輸,-20℃凍存效期長達2年以上。[詳細]
2021-12-27 17:09
產(chǎn)品樣冊
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標準蛋白質
上海金穗生物科技有限公司是一家專門從事生物技術相關產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生命科學公司,公司以超前的市場觀念、良好的產(chǎn)品形象以及雄厚的技術實力取得了多家國內外知名公司的代理權,目前擁有國內外各產(chǎn)品,坐擁上海,輻射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、衛(wèi)生檢驗檢疫部門、工農(nóng)業(yè)部門、環(huán)境保護部門相關實驗室和制藥、食品、飲料、化工、畜牧、水產(chǎn)等企業(yè)提供服務。市場業(yè)務遍布全國各地,公司始終堅持不懈地跟蹤Zxin科研方向,掌控Zxin國際前沿科學新技術,不斷進取,為廣大客戶提供**、Z快的服務和優(yōu)質產(chǎn)品而不懈努力。我們將繼續(xù)秉承“海納百川,有容乃大”的價值觀,密切關注生命科學研究的發(fā)展,鍥而不舍地追求更wan美的銷售服務和更高品質、更創(chuàng)新的產(chǎn)品,與您一起銳意開拓,共同發(fā)展。我們的服務理念:客戶至上、服務至真、質量**、誠信為本。[詳細]
2024-10-01 02:35
產(chǎn)品樣冊
低分子量蛋白質Marker
上海橋星現(xiàn)貨促銷,歡飲來電咨詢!貨號名稱規(guī)格210088道加樣槽進口1個/包2101212道加樣槽進口1個/包23050單道加樣槽V型進口5個/包300044孔細胞培養(yǎng)板進口4個/包30196白色細胞培養(yǎng)板96孔TC熒光板1個/包30296黑色細胞培養(yǎng)板96孔TC熒光板1個/包3139696孔白色酶標板進口1塊/包10塊/包3149696孔黑色酶標板進口1塊/包10塊/包52015離心管架子(?。?5ml耐高溫高壓52050離心管架子(大)50ml耐高溫高壓900011ul接種環(huán)耐高溫高壓10個/包9001010ul接種環(huán)耐高溫高壓10個/包900201.3cm細胞刮刀進口1個/包900302.0cm細胞刮刀進口1個/包90040雙頭細胞刮鏟進口1個/包90050L型涂布棒進口耐高溫高壓10個/包9304040um細胞篩網(wǎng)進口1個/包9307070um細胞篩網(wǎng)進口1個/包93100100um細胞篩網(wǎng)進口1個/包100350激光共聚焦皿35mm進口5個/包200350激光共聚焦皿35mmTC5個/包KG1100科進10ul槍頭盒進口KG1200科進200ul槍頭盒進口CB-1050透析袋夾子進口4.6cmCB-1070透析袋夾子進口6.6cmCB-10100透析袋夾子進口10.5cm132750進口透析袋夾子上浮夾23mm進口透析袋夾子下沉夾23mm132751夾子進口透析袋夾子上浮夾35mm進口透析袋夾子下沉夾35mm132752夾子進口透析袋夾子上浮夾55mm進口透析袋夾子下沉夾55mmWB388歐西亞三通道計時器TR112歐西亞單通道計時器YGH112國產(chǎn)計時器YGHII5國產(chǎn)單道計時器BK-725圓形計時器PCR-02-FCP-C0.2ml透明PCR八排管管蓋平蓋非熒光125排/包AP-MN-P-50G質粒小提試劑盒(有冷凍酶)50T/盒3030-7043mm色譜層析濾紙27*100cm/張pr1400-20T低分子量蛋白質Marker14.4kD-97.4kD363596孔紫外線檢測板144-02-5鈉25g/瓶57-33-0鈉merck5g/瓶科瑪嘉沙門氏顯色培養(yǎng)基1000ml/瓶AP-GX-50GDNA凝膠回收試劑盒50T/盒31800-0221640培養(yǎng)基Gibco10x1L/盒292391907Schott肖特蘭蓋蓋子GL3277-86-1Tris-base三羥甲基氨基甲烷100g/瓶57-44-325g/瓶AP-PCR-50GPCR清潔試劑盒50T/盒360396孔板黑色透明平底康寧1塊/包[詳細]
2019-01-01 10:01
產(chǎn)品樣冊
右旋糖酐分子量標準套(10 種)說明書
右旋糖酐分子量標準套(10種)【類別】化學對照品【批號】140637~646-201203【分子量】右旋糖酐D0Mp180;右旋糖酐D1Mp2700;右旋糖酐D2Mp5250;右旋糖酐D3Mp9750;右旋糖酐D4Mp13050;右旋糖酐D5Mp36800;右旋糖酐D6Mp64650;右旋糖酐D7Mp135350;右旋糖酐D8Mp300600;右旋糖酐D2000Mp2000000;【用途】本品為右旋糖酐分子量標準配套(DextranStandardsKit)化學對照品,供右旋糖酐系列與右旋糖酐鐵分子量與分子量分布檢查用,右旋糖酐D0與D2000為系統(tǒng)適應性試驗用。[詳細]
2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
小角X-射線散射測試蛋白質分子量
小角X-射線散射測試蛋白質分子量[詳細]
2024-09-28 23:24
操作手冊
產(chǎn)品應用(14)應用ScanLater免疫印跡蛋白質梯估計蛋白質的分子量
ScanLater免疫印跡蛋白質梯是ScanLater免疫印跡蛋白質檢測系統(tǒng)必不可少的一項組成。蛋白質梯Z初始是應用于蛋白質分子定量,凝膠電泳的可視化,已經(jīng)評估轉膜的過程。[詳細]
2021-02-23 16:22
應用文章
蛋白質分子量的測定:SEC-MALS 與傳統(tǒng)校正法
蛋白質分子量的測定:SEC-MALS 與傳統(tǒng)校正法[詳細]
2015-07-13 00:00
報價單
EZ Trans細胞轉染液-說明書
訂購信息產(chǎn)品名稱貨號規(guī)格保存價格(元)EZTrans細胞轉染液C4058L10801mL4℃200EZTrans細胞轉染液C4058L108250mL4℃1800EZTrans細胞轉染液C4058L1084500mL4℃3500產(chǎn)品描述:細胞轉染液(核心成分為線性聚乙烯亞胺,也稱作LPEI),是新一代的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。除了具有陽離子脂質體(如:Lipo2000,3000)的轉染效率高,操作簡單,適用范圍廣,重復性好等特點外,還具有在體內,轉染效率高,細胞毒性低等特點。EZTrans是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體。其轉染性能好于樹枝狀聚合物,而且它的細胞毒性低。使用方法:瞬時轉染方法1.接種細胞:轉染前一天,用膠原酶消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、EZTrans試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)下表所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋EZTrans試劑。每1μgDNA需用2-5μLEZTrans轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的EZTrans轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后,添加1/2體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后Z快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定Z適合檢測時間。?穩(wěn)定轉染方法1.接種細胞:轉染前一天,用胰酶消化細胞并計數(shù)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μLEZTrans轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的EZTrans轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后,添加體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后Z快7h即可檢測到轉入基因的表達。5.轉染24h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中(將細胞稀釋10倍以上),在CO2培養(yǎng)箱中37℃孵育隔天。第二天加入與轉染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。運輸與保存方法:常溫運輸,4℃保存,保質期12個月。使用注意事項:質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內毒素質粒。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者李記生物的胎牛血清培養(yǎng)細胞。?特別提醒:1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸YZ敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。附:幾種細胞轉染方法比較幾種細胞轉染方法(試劑)特點比較表轉染方法原理主要應用特點陽離子聚合物(EZTrans)帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。穩(wěn)定轉染瞬時轉染所有細胞除了具有陽離子脂質體的轉染效率高,操作簡單,適用范圍廣,重復性好等特點外,還具有在體內,轉染效率高,細胞毒性低等特點,是新一代的轉染試劑。陽離子脂質體法帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物,然后脂質體上剩余的電核與細胞膜上的唾液酸殘基的負電核結合;另一種解釋是通過細胞是內吞作用而被進入細胞。(若DNA濃度過高,中和脂質體表面電核,而降低了與細胞的結合能力)穩(wěn)定轉染瞬時轉染所有細胞使用方法簡單,可攜帶大片段DNA,通用于各種類型的裸露DNA或RNA,能轉染各種類型的細胞,沒有免疫原性。雖在體外基因轉染中有很高的效率,但在體內,能被血清清除,并在肺組織內累積,誘發(fā)強烈的KY反應,導致高水平的毒性,這在很大程度上限制了其應用DEAE-葡聚糖法帶正電的DEAE-葡聚糖與核酸帶負電的磷酸骨架相互作用形成的復合物被細胞內吞瞬時轉染相對簡便、重復比磷酸鈣好,但對細胞有一定的毒副作用,轉染時需除血清且一般只用于BSC-1,CV-1,COS細胞系磷酸鈣法磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內吞穩(wěn)定轉染染瞬轉染不適用于原代細胞(所需的DNA濃度較高),操作簡便但重復性差,有些細胞不適用細胞建議用CSCL梯度離心,轉染是拷貝數(shù)較多逆轉錄病毒(RNA)通過病毒中膜糖蛋白和宿主細胞表面的受體相互作用而進入宿主細胞,之后反轉入酶啟動合成DNA并隨機整合到宿主基因組中穩(wěn)定轉染特定宿主細胞可用于難轉染的細胞、原代細胞,體內細胞等,但攜帶基因不能太大(<8kb),細胞需處分裂期,需考慮安全因素腺病毒(雙鏈DNA)先和細胞表面的受體結合,繼而在αv整合素介導下被細胞內吞瞬時轉染特定宿主細胞可用于難轉染的細胞,需考慮安全因素Biolistic顆粒傳遞法(基因槍粒子轟擊法)將DNA用顯微重金屬顆粒沉淀,再將包被好的顆粒用彈道裝置投射入細胞,DNA在胞內逐步釋放,表達瞬時性轉染穩(wěn)定轉染可用于:人的表皮細胞,纖維原細胞,淋巴細胞系以及原代細胞顯微注射法用顯微操作將DNA直接注入靶細胞核穩(wěn)定轉染瞬時轉染轉染細胞數(shù)有限,多用于工程改造或轉基因動物的胚胎細胞電穿孔法高脈沖電壓破壞細胞膜電位,DNA通過膜上形成的小孔導入穩(wěn)定轉染瞬時轉染所有細胞適用性廣,除了質粒外,還可轉染大的基因組(>65kb)但細胞致死率高,DNA和細胞用量大,需根據(jù)不同細胞類型優(yōu)化電穿孔實驗條件,拷貝數(shù)較少1-20[詳細]
2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊
EZ系列用戶手冊
EZ 5000系列-多參數(shù)在線滴定分析儀,用于常規(guī)水分析(化學參數(shù))
EZ 6000系列-在線伏安法分析儀,用于重金屬/微量金屬分析(如:銀、砷、鉻、汞、鉛、硒)
EZ 7x00系列一在線分析儀,用于工業(yè)應用(如: COD、 TOC、總氮、總磷、揮發(fā)性.脂肪酸FOS/TAC、進水毒性、國際苦味指數(shù)、三磷酸腺苷)
[詳細]
2021-04-30 13:31
標準
Sepax Nanofilm 體積排阻在各種分子量段蛋白質分離中的
Sepax Nanofilm 體積排阻在各種分子量段蛋白質分離中的[詳細]
2024-09-16 05:38
標準
羥乙基淀粉分子量及分子量分布表征
羥乙基淀粉分子量及分子量分布表征[詳細]
2010-02-08 00:00
安裝說明
Flow EZ壓力泵宣傳冊
Flow EZ壓力泵宣傳冊[詳細]
2022-04-29 10:01
標準
EZ系列分析儀中文樣本
工業(yè)和環(huán)保行業(yè)用單參數(shù)及多參數(shù)水質分析儀
[詳細]
2024-09-29 00:28
標準
均衡染料中的各組分
均衡染料中的各組分[詳細]
2024-09-15 17:53
課件
雙鏈高分子量激肽原 2HK 1301說明書
EnzymeResearch,EnzymeResearch介紹,EnzymeResearch代理,EnzymeResearch總代,EnzymeResearch**代理,EnzymeResearchZG代理EnzymeResearch是一家擁有超過25年的酶研究的實驗室,生產(chǎn)和開發(fā)多種用于基本凝血研究的多種酶和輔因子。在過去的十年EnzymeResearchLaboratories為科學家參與止血和血栓形成的研究提供了寶貴支持。EnzymeResearch通過不斷追求產(chǎn)品的Z高品質,贏得了世界各地凝血研究實驗室的信任。TwoChainHighMolecularWt.Kininogen2HK1301TwoChainHighMolecularWeightKininogenERLoffersthetwochainKinin-freeformofKininogen.ThisispreparedbyKallikreindigestionofKininogenwhichisthenrepurifiedtoremovetracesofKallikrein.Buffercomposition=4mMSodiumAcetate-HCl/0.15MNaCl/pH5.3*ExtinctionCoefficient(1%)=7.01MolecularWeight=110,000daltons上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊
單鏈高分子量激肽原 HK 1300 說明書
EnzymeResearch通過不斷追求產(chǎn)品的Z高品質,贏得了世界各地凝血研究實驗室的信任。EnzymeResearchLaboratories為生物技術公司,制藥行業(yè)、醫(yī)院和大學的研究實驗室提供用于全方位的純化抗凝因子。除了其制造能力,EnzymeResearchLaboratories也創(chuàng)新研發(fā)領域中的血液凝固技術。SingleChainHighMolecularWt.KininogenHK1300SingleChainHighMolecularWt.Kininogen(FitzgeraldFactor)HighMolecularWeightKininogen(HK)isanonenzymaticcofactorofthecontactactivationsystem.HKisthoughttohavetwofunctionsinthecontactactivationsystem.First,HKlinksprekallikreintoanegativelychargedsurfacetherebyallowingactivationtokallikreinbysurfaceboundFactorα-Xlla.HKalsoformsacomplexwithFactorXIandacceleratesitsactivationtoXIabyα-Xlla.AlsoHKservesasasourceofBradykinin,apotentVasoactivepeptideimportantinhypotensionstudies.TheproteinpurityisdeterminedbySDS-PAGEBuffercomposition=4mMSodiumAcetate-HCl/0.15MNaCl/pH5.3*ExtinctionCoefficient(1%)=7.01MolecularWeight=120,000daltons上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊
預充式注射器中硅油滴對蛋白質注射液中粒子數(shù)目的影響
摘要:USP787和USP788描述了ZL用蛋白質和醫(yī)用注射液中怎樣測量肉眼不可見的顆粒物。大部分這類藥物是通過預充式注射器進行包裝。這些注射器里都有硅油,因為硅油可以降低注射藥物時注射器的阻力。這些硅油形成的乳滴在用顯微鏡方法進行計數(shù)統(tǒng)計的時候會造成一定的誤差。本文主要通過使用AccuSizer780SIS研究這些硅油滴在蛋白質注射液計數(shù)方面的影響。簡介:注射藥物顆粒物的檢測主要包括肉眼可見和不可見兩個方面。對于肉眼不可見的檢測主要是通過液體顆粒計數(shù)或者顯微鏡兩種方法來完成。后文中提到的檢測過濾前后的粒子數(shù)量,主要是為了排除由于注射器中螺帽,機筒和活塞本身帶來的額外的粒子影響。盡管和纖維,金屬碎片等外來污染物相比,注射器中這些硅油粒所造成的安全危害較小,但是他們也可以通過液體顆粒計數(shù)來監(jiān)測。并且預充式注射器內部的硅油乳粒會帶來大量不同大小的顆粒。材料介紹:注射器:實驗中用到的注射器是來自BDPosiFlushNormalSalineSyringe,10mL,Refno.306546如圖1.硅潤滑油:醫(yī)用的硅潤滑油應用到注射器的螺帽,機筒和內壁,使得注射器可以更好的推動。本文測量了鹽水和鹽水與蛋白質混合后在注射器中顆粒的變化。蛋白質:AthensResearch&Technology,ImmunoglobinG,HumanPlasma,Lotno.IG2014-02,Catno.16-16-090707,lyophilized(凍干)from22.4mL20mMphosphatebuffer(磷酸鹽緩沖液),pH7.4,w/150mMNaCal&0.05%sodiumazide(疊氮化鈉).蛋白質在PBS(聚丁二酸丁二醇酯)中進行分散;磷酸鹽緩沖藥品,SigmaAldrichP4417-50TAB。方法學:首先通過對注射器的粒子進行測量,沒有進行過任何以下激活處理包括沒有插入AccuSizer的樣品管或者沒有移除機筒并將其倒入一個干凈的燒杯或者推動活塞進入一個干凈的燒杯。lgG蛋白用過濾的PBS溶液配成0.1mg/ml的溶液。用移液槍取0.5ml的溶液加入到包含過濾后的PBS溶液和食鹽水中的10ml注射器中。使用AccuSizer儀器取1ml的樣品不稀釋直接測量,重復測三次檢查重復性。檢測儀器:AccuSizerFXNanoSIS儀器擁有兩個傳感器LE-400;0.5μm-100μm和FXNano;0.15μm-10μm,如圖2所示。AccuSizerSIS取樣器可將進樣量準確的下調至100μl。AccuSizerFXNanoSIS是僅有一個注射進樣器和兩個傳感器,并沒有增加檢測器或者電腦的數(shù)量。結果討論:從24個注射器中隨機的選擇了8個注射器。其中4個用只有LE400的傳感器進行分析同時沒有推動活塞,具體結果如圖3所示,另外四個則將通過活塞將樣品推到一個干凈的燒杯中,如圖4所示。橫坐標X用來表示粒子的大小,縱坐標表示粒子的濃度粒子數(shù)量/ml。討論:實驗設計的目的是期望通過推動活塞進入到燒杯中會因為硅油乳粒的存在而使得顆粒濃度有一定的增加。兩個沒有激活的樣品在圖標3可以看出大于0.5μm的粒子濃度約為10,000個/ml,另外的兩個大于0.5μm的粒子濃度在20,000個/ml。激活的四個樣品大于0.5μm的粒子濃度大約在16,000個/ml和28,000個/ml。說明注射器中硅油的存在會增加。蛋白質的測量結果:USP787是用來描述ZL用蛋白質,同時USP788對于理想結果的判定通過標準是10μm和25μm,但是FDA建議檢測更小的蛋白質粒子,這樣才能給出更好的標準關于檢測蛋白質聚集的標準。三個激活的鹽水的樣品和分散在PBS里的lgG蛋白樣品通過包含兩個傳感器的AccuSizerFXNanoSIS進行測量,結果如圖5和圖6。之后這蛋白質被過濾后額PBS(blue):鹽水=2:1的混合液進行稀釋,具體結果如圖7。討論:可以從圖5看出,注射器和注射器中由于硅油滴的存在引起的粒子數(shù)量的變化在更小的范圍被發(fā)現(xiàn)。同時說明不同的注射器里硅油所造成的粒子數(shù)目也有區(qū)別。AccuSizer780FXNanoSIS儀器可以對0.2μm-0.5μm的粒子進行計數(shù),因為它的檢測下限可以降到0.15μm。這種新的對于小粒子的敏感性的技術正在尋找其他領域的應用,它可以很好的應用到蛋白質的檢測中了,如圖6所示的蛋白質分散在過濾后的PBS溶液和圖7所示的蛋白質和鹽水混合的溶液??梢悦黠@的區(qū)分出在鹽水和蛋白質溶液中的粒子大小和數(shù)目。結論:AccuSizer780FXNanoSIS符合所有關于USP787和788的檢測要求。同時對于分析不可見的粒子是**的選擇,因為它的檢測下線可以極ng確到0.15μm,Z小的檢測樣品量可以低到100μl。這種低量程的計數(shù)工具為實驗提供更多有趣的結果,特別是可以幫助研發(fā)人員更好的在研究ZL和注射用的蛋白質聚集的問題。這種獨特的技術為AccuSizer780FXNanoSIS提供了其他顆粒檢測儀器所不具備的能力。它不僅是一個液體顆粒計數(shù)器還是一個粒度儀。參考文獻:1.USP787,Subvisibleparticulatematterintherapeuticproteininjections;2.USP788,Particulatematterininjections;3.PSSApplication:ProteinAggregation,availableatwww.pssnicomp。。cn.[詳細]
2024-09-29 00:10
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TSK-GEL SWXL系列色譜柱(尺寸排阻色譜法)對高分子量標準
TSK-GEL SWXL系列色譜柱(尺寸排阻色譜法)對高分子量標準[詳細]
2011-04-21 00:00
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