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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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本文由 研域生物技術(shù)(上海)有限公司 整理匯編
2018-11-05 10:00 297閱讀次數(shù)
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:1.56pg/ml-100pg/mlZdi檢測(cè)限:0.39pg/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的小鼠VEGF-C,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中VEGF-C含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗VEGF-C抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗VEGF-C抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的VEGF-C呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板(Assayplate):一塊(96孔)。2.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。3.樣品稀釋液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。4.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。5.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。6.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。9.濃洗滌液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10.終止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。需要而未提供的試劑和器材1.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀2.高速離心機(jī)3.電熱恒溫培養(yǎng)箱4.干凈的試管和Eppendof管5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),**用多通道移液器6.蒸餾水,容量瓶等標(biāo)本的采集及保存1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本的稀釋原則:首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。Z后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml,6.25pg/ml,3.12pg/ml,1.56pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制50pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。操作步驟實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。注:1.用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。3.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。5.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。3.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。5.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請(qǐng)避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:1.56pg/ml-100pg/mlZdi檢測(cè)限:0.39pg/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的小鼠VEGF-C,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中VEGF-C含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗VEGF-C抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗VEGF-C抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的VEGF-C呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板(Assayplate):一塊(96孔)。2.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。3.樣品稀釋液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。4.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。5.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。6.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。9.濃洗滌液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10.終止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。需要而未提供的試劑和器材1.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀2.高速離心機(jī)3.電熱恒溫培養(yǎng)箱4.干凈的試管和Eppendof管5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),**用多通道移液器6.蒸餾水,容量瓶等標(biāo)本的采集及保存1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本的稀釋原則:首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。Z后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml,6.25pg/ml,3.12pg/ml,1.56pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制50pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。操作步驟實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。注:1.用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。3.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。5.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。3.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。5.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請(qǐng)避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。[詳細(xì)]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)檢測(cè)試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-09 00:00
操作手冊(cè)
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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-17 01:55
安裝說明
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人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析
- ELATS試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(480pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)ELATS試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELATS試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。E-(Hu)(03)-04402人柯薩奇病毒(CoxV)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Coxsackievirus(CoxV)antibody(IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04403人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgG)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04404人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgA)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04405人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:Anti-centromereAntibody,ACAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04406人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04407人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04408人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)IgMelisa試劑盒,英文名:anti-neutrophilcytoplasmicantibody,cANCAIgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04409人抗中性粒/ZX體抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:anti-centrolandcentrosomeantibody,ACAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04410人抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)抗體elisa試劑盒,英文名:proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)antibodyELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04411人抗YZ素B抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:anti-InhibinBantibodyIgGElisakit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04412人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)elisa試劑盒,英文名:anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04413人抗胰島素受體抗體(AIRA)elisa試劑盒,英文名:anti-insulinreceptorantibody,AIRAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04414人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgM,PA-IgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04415人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgG(PA-IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04416人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgA,PA-IgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04417人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒(半定量),英文名:anti-PAAbELISAKit(Semi-quantitative),規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04418人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒,英文名:anti-plateletantibody,anti-PAAbELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04419人抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)elisa試劑盒,英文名:anti-thymocyteglobulin,ATGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04420人抗信號(hào)識(shí)別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體elisa試劑盒,英文名:antisignalrecognitionparticle54kDaprotein(SRP54)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04421人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體elisa試劑盒,英文名:myocardialβ1receptor(MB1R)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04422人抗小鼠抗體(HAMA)elisa試劑盒,英文名:anti-mouseantibody,HAMAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04423人抗小腦(CE)自身抗體elisa試劑盒,英文名:anticerebellum(CE)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04424人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體elisa試劑盒,英文名:smallnuclearribonucleoprotein(snRNP/Sm)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04425人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)elisa試劑盒,英文名:anti-mitochondrialantibodyM2subtype,AMA-M2ELISAkit,規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-10-13 00:00
其它
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-20 03:55
專利
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒
- 在小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒實(shí)驗(yàn)前的我們應(yīng)該要特別注意的有以下幾點(diǎn):一、請(qǐng)老師看清楚說明書內(nèi)容。二、廠家發(fā)貨的盒子都是Z近生產(chǎn)的,但在實(shí)驗(yàn)前還是要確定一下生產(chǎn)日期。三、另外要根據(jù)試劑盒組成查看小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒所包含的試劑是否齊全。四、酶標(biāo)板可以用多少拆卸多少,剩余部分做點(diǎn)處理低溫保存。五、實(shí)驗(yàn)所用到的酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
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血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒檢測(cè)說明書
- 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒檢測(cè)說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T5pg/ml-160pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)水平。用純化的大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF),再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(320pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。160pg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液80pg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40pg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20pg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10pg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測(cè)樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-10-10 03:42
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒
- 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 15:05
報(bào)價(jià)單
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小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
- 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-08 00:00
專利
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小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒
- 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-18 19:05
安裝說明
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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-05 00:00
其它
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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒
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2014-09-29 00:00
課件
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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒
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2024-09-18 18:09
操作手冊(cè)
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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
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2024-09-25 00:10
選購(gòu)指南
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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
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2024-09-28 18:08
產(chǎn)品樣冊(cè)
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雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
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2024-09-29 13:46
標(biāo)準(zhǔn)
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血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑檢測(cè)說明書
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
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人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)檢測(cè)試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-09 00:00
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