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人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)檢測試劑盒
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本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2015-03-09 00:00 175閱讀次數(shù)
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)檢測試劑盒
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-09 00:00
操作手冊
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大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-17 01:55
安裝說明
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小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
- 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:1.56pg/ml-100pg/mlZdi檢測限:0.39pg/ml特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的小鼠VEGF-C,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應。有效期:6個月預期應用:ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中VEGF-C含量。說明1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。實驗原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗VEGF-C抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗VEGF-C抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的VEGF-C呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板(Assayplate):一塊(96孔)。2.標準品(Standard):2瓶(凍干品)。3.樣品稀釋液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。6.生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。9.濃洗滌液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10.終止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。需要而未提供的試劑和器材1.標準規(guī)格酶標儀2.高速離心機3.電熱恒溫培養(yǎng)箱4.干凈的試管和Eppendof管5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,**用多通道移液器6.蒸餾水,容量瓶等標本的采集及保存1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本的稀釋原則:首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。Z后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋100pg/ml,50pg/ml,25pg/ml,12.5pg/ml,6.25pg/ml,3.12pg/ml,1.56pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制50pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。生物素標記抗體的稀釋原則:臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。操作步驟實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。注:1.用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。2.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。3.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。4.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。5.建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此過程數(shù)次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。計算以標準物的濃度為橫坐標(對數(shù)坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。5.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請Z后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。[詳細]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-10-13 00:00
其它
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人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)酶聯(lián)免疫分析
- ELATS試劑盒實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)水平。用純化的人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C),再與HRP標記的血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(480pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個ELATS試劑盒標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELATS試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。E-(Hu)(03)-04402人柯薩奇病毒(CoxV)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Coxsackievirus(CoxV)antibody(IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04403人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgG)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04404人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶(tTG)抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Anti-tissuetransglutaminase(tTG)antibody(IgA)ELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04405人抗著絲點抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:Anti-centromereAntibody,ACAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04406人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04407人抗轉(zhuǎn)谷氨酰銨酶抗體(IgA)elisa試劑盒,英文名:Transglutaminase6antibodyIgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04408人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)IgMelisa試劑盒,英文名:anti-neutrophilcytoplasmicantibody,cANCAIgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04409人抗中性粒/ZX體抗體(ACA)elisa試劑盒,英文名:anti-centrolandcentrosomeantibody,ACAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04410人抗增殖細胞核抗原(PCNA)抗體elisa試劑盒,英文名:proliferatingcellnuclearantigen(PCNA)antibodyELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04411人抗YZ素B抗體(IgG)elisa試劑盒,英文名:anti-InhibinBantibodyIgGElisakit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04412人抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)elisa試劑盒,英文名:anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04413人抗胰島素受體抗體(AIRA)elisa試劑盒,英文名:anti-insulinreceptorantibody,AIRAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04414人抗血小板抗體IgM(PA-IgM)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgM,PA-IgMELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04415人抗血小板抗體IgG(PA-IgG)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgG(PA-IgG)ELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04416人抗血小板抗體IgA(PA-IgA)elisa試劑盒,英文名:plateletantibodiesIgA,PA-IgAELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04417人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒(半定量),英文名:anti-PAAbELISAKit(Semi-quantitative),規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04418人抗血小板抗體(anti-PAAb)elisa試劑盒,英文名:anti-plateletantibody,anti-PAAbELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04419人抗胸腺細胞球蛋白(ATG)elisa試劑盒,英文名:anti-thymocyteglobulin,ATGELISAKit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04420人抗信號識別顆粒54kDa蛋白(SRP54)抗體elisa試劑盒,英文名:antisignalrecognitionparticle54kDaprotein(SRP54)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04421人抗心肌β1受體(MB1R)自身抗體elisa試劑盒,英文名:myocardialβ1receptor(MB1R)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04422人抗小鼠抗體(HAMA)elisa試劑盒,英文名:anti-mouseantibody,HAMAELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04423人抗小腦(CE)自身抗體elisa試劑盒,英文名:anticerebellum(CE)autoantibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04424人抗小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗體elisa試劑盒,英文名:smallnuclearribonucleoprotein(snRNP/Sm)antibodyELISAkit,規(guī)格:48T/96TE-(Hu)(03)-04425人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)elisa試劑盒,英文名:anti-mitochondrialantibodyM2subtype,AMA-M2ELISAkit,規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-18 18:09
操作手冊
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-09 00:00
安裝說明
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-18 18:06
選購指南
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血管內(nèi)皮細胞生長因子試劑盒檢測說明書
- 血管內(nèi)皮細胞生長因子試劑盒檢測說明書試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T5pg/ml-160pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)水平。用純化的大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF),再與HRP標記的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(320pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。160pg/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液80pg/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液40pg/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液20pg/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液10pg/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-10-10 03:42
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-05 00:00
其它
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-25 00:10
選購指南
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人(Human)血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒
- 人(Human)血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理:VEGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知VEGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將VEGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中VEGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制:試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)塑料膜板蓋1塊半塊標準品:480ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)標準品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素標記的抗VEGF抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自備材料:1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法:1、血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作注意事項:●試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。●實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)?!癫挥玫钠渌噭b好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用?!袷褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。●使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品?!竦孜顰應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值?!窦尤朐噭┑捻樞驊恢拢员WC所有反應板孔溫育的時間一樣?!癜凑照f明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。安全性:1.避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準備:1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:480ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul240ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液120ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液60ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液30ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液15ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。試劑盒性能:1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷與分析:1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的VEGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的VEGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。3、檢測值范圍:0-480ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml上海恒遠生物科技有限公司主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,酶免試劑盒,試劑盒,進口抗體,血清,標準品,培養(yǎng)基,生物試劑、ATCC細胞,實驗耗材等。電話:021-60517348QQ:2675483613[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR1)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR1)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-21 00:29
產(chǎn)品樣冊
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大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒[詳細]
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2014-09-29 00:00
課件
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-19 23:59
選購指南
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)檢測試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-29 09:13
標準
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-10-13 00:00
報價單
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-15 17:55
專利
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人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒說明書
- 人血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒說明書特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的人VEGF-B,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應。詳細說明:1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。注意事項1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。5.如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請Z后乘以稀釋倍數(shù)。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、細胞因子檢測試劑盒、金標試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、毒素、移液器等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海科興商貿(mào)擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務,能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的長期合作關(guān)系,在市場上樹立了公司的良好信譽和形象。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
- 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 18:08
產(chǎn)品樣冊
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