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12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)試劑盒使用方法

本文由 上海滬宇生物科技有限公司 整理匯編

2018-10-08 10:01 543閱讀次數(shù)

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實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)水平。用純化的12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)抗原,再與HRP標記的12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中12-氧-植物二烯酸還原酶(OPR)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:225ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存標本要求:1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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