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大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒
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2018-10-31 10:00 439閱讀次數(shù)
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大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存,公司全程提供技術(shù)指導(dǎo),價格優(yōu)惠,質(zhì)量可靠,歡迎前來選購!ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的GX催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒雙抗體夾心法及大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒間接法。產(chǎn)品范圍:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體,血栓與止血,骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒樣本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等應(yīng)用:科研檢測檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法檢測限:詳細(xì)請見說明書數(shù)量:10000規(guī)格:48T/96T大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:XY-EL-H0429c人胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒說明書HumanIDE(InsulinDegradingEnzyme)ELISAKitXY-EL-H0430c人抗存活素抗體(Anti-Surv)ELISA試劑盒說明書HumanAnti-Surv(Anti-SurvivinAntibody)ELISAKitXY-EL-H0431c人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒說明書HumanTA(Anti-TeichoicAcidAntibody)ELISAKitXY-EL-H0432c人抗凝血酶(AT)ELISA試劑盒說明書HumanAT(AntiThrombin)ELISAKitXY-EL-H0433c人脂肪酶H(LIPH)ELISA試劑盒說明書HumanLIPH(LipaseH)ELISAKitXY-EL-H0434c人淋巴毒素β受體(LTβR)ELISA試劑盒說明書HumanLTβR(LymphotoxinBetaReceptor)ELISAKitXY-EL-H0435c人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒說明書HumanIGF-2(InsulinLikeGrowthFactor2)ELISAKitXY-EL-H0436c人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒說明書HumanATGA/TGAB(Anti-Thyroid-GlobulinAntibody)ELISAKitXY-EL-H0437c人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒說明書HumanTPO-Ab(Anti-Thyroid-PeroxidaseAntibody)ELISAKitXY-EL-H0438c人胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)ELISA試劑盒說明書HumanIGF2BP3(InsulinLikeGrowthFactor2mRNABindingProtein3)ELISAKitXY-EL-H0439c人肌聯(lián)蛋白(TTN)ELISA試劑盒說明書HumanTTN(Titin)ELISAKitXY-EL-H0440c人胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)ELISA試劑盒說明書HumanIGF2R(InsulinLikeGrowthFactor2Receptor)ELISAKitXY-EL-H0441c人胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基(IGFALS)ELISA試劑盒說明書HumanIGFALS(InsulinLikeGrowthFactorBindingProtein,AcidLabileSubunit)ELISAKitXY-EL-H0442c人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒說明書HumanIGFBP-1(InsulinLikeGrowthFactorBindingProtein1)ELISAKit
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大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒
- 大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存,公司全程提供技術(shù)指導(dǎo),價格優(yōu)惠,質(zhì)量可靠,歡迎前來選購!ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的GX催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒雙抗體夾心法及大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒間接法。產(chǎn)品范圍:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體,血栓與止血,骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒樣本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等應(yīng)用:科研檢測檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法檢測限:詳細(xì)請見說明書數(shù)量:10000規(guī)格:48T/96T大鼠鹽皮質(zhì)激素受體(MR)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:XY-EL-H0429c人胰島素降解酶(IDE)ELISA試劑盒說明書HumanIDE(InsulinDegradingEnzyme)ELISAKitXY-EL-H0430c人抗存活素抗體(Anti-Surv)ELISA試劑盒說明書HumanAnti-Surv(Anti-SurvivinAntibody)ELISAKitXY-EL-H0431c人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒說明書HumanTA(Anti-TeichoicAcidAntibody)ELISAKitXY-EL-H0432c人抗凝血酶(AT)ELISA試劑盒說明書HumanAT(AntiThrombin)ELISAKitXY-EL-H0433c人脂肪酶H(LIPH)ELISA試劑盒說明書HumanLIPH(LipaseH)ELISAKitXY-EL-H0434c人淋巴毒素β受體(LTβR)ELISA試劑盒說明書HumanLTβR(LymphotoxinBetaReceptor)ELISAKitXY-EL-H0435c人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒說明書HumanIGF-2(InsulinLikeGrowthFactor2)ELISAKitXY-EL-H0436c人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒說明書HumanATGA/TGAB(Anti-Thyroid-GlobulinAntibody)ELISAKitXY-EL-H0437c人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒說明書HumanTPO-Ab(Anti-Thyroid-PeroxidaseAntibody)ELISAKitXY-EL-H0438c人胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)ELISA試劑盒說明書HumanIGF2BP3(InsulinLikeGrowthFactor2mRNABindingProtein3)ELISAKitXY-EL-H0439c人肌聯(lián)蛋白(TTN)ELISA試劑盒說明書HumanTTN(Titin)ELISAKitXY-EL-H0440c人胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)ELISA試劑盒說明書HumanIGF2R(InsulinLikeGrowthFactor2Receptor)ELISAKitXY-EL-H0441c人胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基(IGFALS)ELISA試劑盒說明書HumanIGFALS(InsulinLikeGrowthFactorBindingProtein,AcidLabileSubunit)ELISAKitXY-EL-H0442c人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒說明書HumanIGFBP-1(InsulinLikeGrowthFactorBindingProtein1)ELISAKit[詳細(xì)]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
- 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-13 01:13
課件
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皮質(zhì)激素受體說明書試劑盒檢測說明
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖皮質(zhì)激素受體(GR)含量。皮質(zhì)激素受體說明書試劑盒檢測說明實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人糖皮質(zhì)激素受體(GR)水平。用純化的人糖皮質(zhì)激素受體(GR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖皮質(zhì)激素受體(GR),再與HRP標(biāo)記的糖皮質(zhì)激素受體(GR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糖皮質(zhì)激素受體(GR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人糖皮質(zhì)激素受體(GR)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960nmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。皮質(zhì)激素受體說明書試劑盒檢測說明操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480nmol/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240nmol/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120nmol/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60nmol/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30nmol/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。皮質(zhì)激素受體說明書試劑盒檢測說明操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:02
產(chǎn)品樣冊
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大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素ELISA試劑盒
- 使用目的:大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素ELISA試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)皮素(ET)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠內(nèi)皮素(ET)水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素(ET)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素(ET),再與HRP標(biāo)記的內(nèi)皮素(ET)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素(ET)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠內(nèi)皮素(ET)濃度。大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素ELISA試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120μg/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60μg/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30μg/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15μg/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5μg/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒
- 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
選購指南
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- 大鼠胰島素受體(ISR-)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
安裝說明
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大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
- 大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
專利
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大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒
- 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒
- 大鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒
- 大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
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大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒
- 大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒
- 大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠雌激素受體(ER)ELISA試劑盒
- 大鼠雌激素受體(ER)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
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大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒
- 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2016-08-03 00:00
實驗操作
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大鼠糖皮質(zhì)激素受體(GR-)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠糖皮質(zhì)激素受體a(GR-a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠GR-a單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的GR-a與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠GR-a,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GR-a濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GR-a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)GR-a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GR-a檢測濃度小于1.5ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠GR-a。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
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2024-09-28 14:31
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2024-09-28 10:42
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2024-09-28 12:58
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2024-09-28 17:19
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