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醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
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本文由 上海士鋒生物科技有限公司 整理匯編
2015-03-10 00:00 424閱讀次數(shù)
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醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白
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2010-06-01 00:00
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- Nicomp380Z3000激光粒度儀在牛血清白蛋白Zeta電位的應用案例一、摘要:20多年來,重組DNA技術使蛋白質(zhì)成為越來越重要的原料藥。蛋白質(zhì)與其他小分子有機原料不同,它們的物理性質(zhì)和化學性質(zhì)不穩(wěn)定,易于發(fā)生變化。蛋白質(zhì)藥物的生產(chǎn)、運輸、存儲以及施用過程中的任何環(huán)節(jié)都有可能導致蛋白的變性。蛋白質(zhì)物理性質(zhì)的不穩(wěn)定(如聚集或沉淀)會影響藥物的劑量、藥效以及藥物的安全性。關鍵詞:DLS動態(tài)光散射ELS電泳光散射蛋白質(zhì)聚集ZETA電位二、客戶遇到的問題:檢測蛋白質(zhì)的聚集或者沉淀,來確定蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。三、解決方案采用美國PSS激光粒度儀Nicomp380Z3000檢測蛋白質(zhì)的粒度分布和Zeta電位來判斷該蛋白的穩(wěn)定性。根據(jù)Zeta電位可以確定等電點(IEP)。等電點是顆粒、膠體或分子在剪切面的凈電荷為零時的pH值,在此pH值下,膠體顆粒在電場中保持靜止不動。要想測定等電點,首先對顆粒分散體系進行一系列pH值滴定,然后分別測量不同pH值下的Zeta電位,Zeta電位為零時的pH值即為等電點。在此pH值附近顆粒不再具有靜電穩(wěn)定性從而產(chǎn)生凝聚。圖1.牛血清白蛋白的體積粒度NiComp分布圖1為牛血清白蛋白(BSA,西格瑪奧德里奇公司)用去離子水按1:100比例稀釋的體積粒度NiComp分布,粒度呈雙峰分布,主峰為~5nm,次峰~25nm。粒度分布圖顯示此樣品很“潔凈”,僅有0.5%體積的顆粒聚集體。稀釋后的牛血清白蛋白溶液用0.01MHCl和0.01MKOH滴定,在不同的pH值分別測量溶液的Zeta電位,測試結果如圖2所示,等電點為pH5.07。圖2.牛血清白蛋白在不同pH值測得的Zeta電位四、結果:NiComp380Z3000不僅能檢測分析亞微米蛋白質(zhì)及其聚集體,而且還可以通過Zeta電位的測量預測蛋白質(zhì)分散體系的穩(wěn)定性。結論:動態(tài)光散射(DLS)和電泳光散射(ELS)技術可以用于監(jiān)測蛋白質(zhì)顆粒粒度分布和Zeta電位。蛋白質(zhì)顆粒的粒度分布較寬,從亞微米的可溶微粒到較大的不溶性沉淀大顆粒。此外,還可以根據(jù)Zeta電位和等電點預測蛋白質(zhì)的空間位阻穩(wěn)定性。[詳細]
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2018-08-24 10:00
產(chǎn)品樣冊
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開學促銷多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒
- 【規(guī)格】96T(孔)/48T(孔)【價格】電議有折扣?!颈4鏈囟取?-8℃,避光保存?!居行凇苛鶄€月?!緳z測目的】用于測定血清,血漿及相關液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。【適用范圍】僅供科研。多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒操作常見問題解析:1.加樣:在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。2.邊緣效應:使用96孔板的ELISA測定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應",即外周孔顯色較ZX孔深。經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體,在實驗室的常規(guī)ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與ZX孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應",并且可提高測定的重復性。ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒規(guī)范使用方法:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.本試劑不同批號組分不得混用。[詳細]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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纖維素測定儀YDL-FIWE6
- 纖維素測定儀粗纖維測定儀型號:YDL-FIWE6YDL-FIWE6/YDL-FIWE3采用國際通用的酸洗、堿洗的方法,用于檢測、分析食品、飼料、秸稈等的粗纖維、酸性和中性洗滌纖維、纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等。技術特點:1、可同時處理6個樣品2、樣品量:0.5-3g3、重現(xiàn)性:<±1%4、環(huán)氧涂層鋼結構,防化學腐蝕和機械損壞5、從Z初稱量到Z后烘干,樣品無需轉(zhuǎn)移,可有效降低實驗誤差6、采用氣泵反吹技術,可避免樣品粘連并使之與反應液充分反應,加速實驗7、可隨意控制沸騰量,采用2位獨立的試劑預熱裝置,可快速加熱酸堿8、內(nèi)置蠕動泵可進行殘留試劑排出9、帶有警報計時器10、所有浸提過程可通過自動旋轉(zhuǎn)閥操作11、單一或連續(xù)性浸提,包括沸騰、沖洗和過濾都在可控制調(diào)節(jié)下進行。12、試劑和冷卻水進、出口分離13、每個樣品可單獨操作14、重現(xiàn)性好、可靠性高15、符合AOAC、AACC、EPA、DIN、ISO、APHA等標準可選配件(COEX冷浸提裝置):適用于脂肪含量>1%的樣品前處理,可快速去除樣品中的脂肪,去脂后樣品無需轉(zhuǎn)移可直接在FIWE3或FIWE6主機上進行熱浸提操作。6位冷提取器COEX[詳細]
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2018-09-24 10:00
產(chǎn)品樣冊
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纖維素粉技術參數(shù)
- 纖維素粉技術參數(shù)人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)elisa檢測技術三葉肽因子2TFF2抗體.內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端)Visfatin-2抗體.人mIgDelisa試劑盒生產(chǎn)膜粘連蛋白IAnnexinI抗體.牛SAAelisa試劑盒生產(chǎn)腺苷三磷酸結合盒轉(zhuǎn)運體A1ABCA1抗體.小鼠ACA-IgAelisa試劑盒生產(chǎn)大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa檢測技術巨噬細胞移動YZ因子MIF抗體.纖維素粉技術參數(shù)CAS號:9004-34-6(C6H10O5)n=(162.06)n級別:TLC級含量:≥97.0%顆粒度試驗:合格干燥失重:3.0~5.0灼燒殘渣:≤0.05%重金屬:≤0.001%PH(50g/L,25℃):5.0~7.5乙可溶物:≤0.05%水可溶物:≤0.24%溶解試驗:合格性狀:白色或類白色微晶形非纖維狀粉末,顆粒呈堅硬棒狀。由木漿或棉漿粕經(jīng)酸解處理,除去非晶部分而得的結晶聚集體。幾乎不溶于水和稀酸,但可分散在水中。部分溶脹在稀堿中。pH7(10%水懸浮液)用途:生化研究。柱色譜和薄層色譜用,分離提純氨基酸、核酸和酶,也可用作粘合劑,助流劑,抗粘劑,吸附劑,膠囊稀釋劑等保存:RT纖維素粉技術參數(shù)[詳細]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
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DEAE纖維素DE-32
- DEAE纖維素DE-32[詳細]
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2024-09-28 01:15
產(chǎn)品樣冊
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DEAE纖維素DE-23
- DEAE纖維素DE-23[詳細]
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2024-09-28 01:06
實驗操作
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什么是纖維素?
- 纖維素定義:
纖維狀碳水化合物即纖維素,纖維素化學結構與直鏈淀粉相似,通常與木質(zhì)素及其它淀粉多糖共存形成混合物,是構成植物細胞壁的主要材料。[詳細]
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2024-09-17 21:46
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- 微晶纖維素[詳細]
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2024-09-14 20:43
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DEAE纖維素DE-52
- DEAE纖維素DE-52[詳細]
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2024-09-20 13:35
報價單
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乙酸纖維素簡介
- 乙酸纖維素簡介乙酸纖維素,也稱為醋酸纖維素、纖維素乙酸酯,是纖維素的醋酸酯,于1865年S次制備。醋酸纖維素在攝影中用于制造底片的片基,同時也是一些膠粘劑的成分。醋酸纖維prova素也用于人造纖維。乙酸酯纖維素產(chǎn)品有溫暖的觸感、抗汗,并能自體發(fā)光,它是擁有明亮色彩和糖漿般透明感的一種傳統(tǒng)聚合物。它從20世紀初開始發(fā)展,甚至比絕緣電木還要早。由于乙酸酯纖維素有大理石般的效果,人們可以經(jīng)常將之應用于工具手柄、眼鏡框和發(fā)夾等產(chǎn)品,因此它也是Z容易被認知的聚合物之一。把它作為手工用具的材料,就可將其的抗壓性和良好的手感結合起來。而其他材料,比如聚丙烯,則擁有更好的抗壓性,但卻感覺比較滑手。乙酸酯纖維素材料中的自體光亮成分來自于它的柔軟性,表面輕微的劃傷可以被磨掉。它含有棉花和木材(纖維素)成分,可以通過注鑄、轉(zhuǎn)鑄和擠壓成型。你也能買到它的薄片產(chǎn)品。上海易利生物科技有限公司主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,生物試劑,標準品,抗體,培養(yǎng)基,血清,細胞等科研產(chǎn)品。[詳細]
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2024-10-06 03:24
產(chǎn)品樣冊
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毛細管電泳分離莽草酸及其對映體
- 毛細管電泳分離莽草酸及其對映體[詳細]
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2008-05-27 00:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒使用說明書
- 小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10ng/L-420ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清樣本中糖化血清蛋白(GSP)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠糖化血清蛋白(GSP)水平。用純化的小鼠糖化血清蛋白(GSP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖化血清蛋白(GSP),再與HRP標記的糖化血清蛋白(GSP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糖化血清蛋白(GSP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠糖化血清蛋白(GSP)濃度。小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(640ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。320ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液160ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液80ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液40ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液20ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照小鼠糖化血清蛋白(GSP)ELISA試劑盒說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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