本文由 美國PSS粒度儀公司 整理匯編

2018-08-24 10:00 2060閱讀次數(shù)

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• Nicomp激光粒度儀檢測牛血清蛋白zeta電位

  Nicomp380Z3000激光粒度儀在牛血清白蛋白Zeta電位的應用案例一、摘要：20多年來，重組DNA技術使蛋白質成為越來越重要的原料藥。蛋白質與其他小分子有機原料不同，它們的物理性質和化學性質不穩(wěn)定，易于發(fā)生變化。蛋白質藥物的生產(chǎn)、運輸、存儲以及施用過程中的任何環(huán)節(jié)都有可能導致蛋白的變性。蛋白質物理性質的不穩(wěn)定（如聚集或沉淀）會影響藥物的劑量、藥效以及藥物的安全性。關鍵詞：DLS動態(tài)光散射ELS電泳光散射蛋白質聚集ZETA電位二、客戶遇到的問題：檢測蛋白質的聚集或者沉淀，來確定蛋白質的穩(wěn)定性。三、解決方案采用美國PSS激光粒度儀Nicomp380Z3000檢測蛋白質的粒度分布和Zeta電位來判斷該蛋白的穩(wěn)定性。根據(jù)Zeta電位可以確定等電點（IEP）。等電點是顆粒、膠體或分子在剪切面的凈電荷為零時的pH值，在此pH值下，膠體顆粒在電場中保持靜止不動。要想測定等電點，首先對顆粒分散體系進行一系列pH值滴定，然后分別測量不同pH值下的Zeta電位，Zeta電位為零時的pH值即為等電點。在此pH值附近顆粒不再具有靜電穩(wěn)定性從而產(chǎn)生凝聚。圖1.牛血清白蛋白的體積粒度NiComp分布圖1為牛血清白蛋白（BSA，西格瑪奧德里奇公司）用去離子水按1:100比例稀釋的體積粒度NiComp分布，粒度呈雙峰分布，主峰為~5nm，次峰~25nm。粒度分布圖顯示此樣品很“潔凈”，僅有0.5%體積的顆粒聚集體。稀釋后的牛血清白蛋白溶液用0.01MHCl和0.01MKOH滴定，在不同的pH值分別測量溶液的Zeta電位，測試結果如圖2所示，等電點為pH5.07。圖2.牛血清白蛋白在不同pH值測得的Zeta電位四、結果：NiComp380Z3000不僅能檢測分析亞微米蛋白質及其聚集體，而且還可以通過Zeta電位的測量預測蛋白質分散體系的穩(wěn)定性。結論：動態(tài)光散射（DLS）和電泳光散射（ELS）技術可以用于監(jiān)測蛋白質顆粒粒度分布和Zeta電位。蛋白質顆粒的粒度分布較寬，從亞微米的可溶微粒到較大的不溶性沉淀大顆粒。此外，還可以根據(jù)Zeta電位和等電點預測蛋白質的空間位阻穩(wěn)定性。[詳細]

  2018-08-24 10:00

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  2010-06-01 00:00

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