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大鼠白細胞介素 4(IL-4)操作說明

本文由 上海研生實業(yè)有限公司 整理匯編

2018-09-28 10:00 388閱讀次數(shù)

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大鼠白細胞介素4(IL-4)試劑盒操作說明實驗材料與試劑配制:1.儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。2.洗液的配制:按1:30的比例配制洗液備用。大鼠白細胞介素4(IL-4)試劑盒樣品收集、處理及保存1.細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。2.細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。3.血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。4.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。5.體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。6.組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000rmp離心20分鐘,收集上清進行檢測。7.樣品中不能含有NaN3,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。8.大鼠白細胞介素4(IL-4)試劑盒保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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