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Lumina熒光分光光度計(jì)測(cè)量生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移

本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-09-12 10:00 933閱讀次數(shù)

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使用ThermoFisherLumina熒光分光光度計(jì)測(cè)量生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移分子之間的能量轉(zhuǎn)移大多是由輻射導(dǎo)致的。然而當(dāng)不同熒光物質(zhì)非??拷鼤r(shí)(<10nm),會(huì)發(fā)生共振能量轉(zhuǎn)移(RET)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)是一種典型的RET現(xiàn)象。在FRET中,使用強(qiáng)光照射以激發(fā)供體能量,處于激發(fā)態(tài)的供體將一部分或全部能量轉(zhuǎn)移給受體,受體被激發(fā)。如果受體熒光量子產(chǎn)率為零,則發(fā)生能量轉(zhuǎn)移熒光熄滅;如果受體也是一種熒光發(fā)射體則呈現(xiàn)出受體的熒光。光照下很多熒光物質(zhì)會(huì)逐漸失去其熒光特性,這種現(xiàn)象被稱為光漂白。為了提高靈敏度,近期生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)得到了廣泛應(yīng)用1。BRET使用生物發(fā)光物質(zhì)代替了熒光供體。由于BRET不在需要直射光線以激發(fā)供體,不存在放射性的能量轉(zhuǎn)移,所以避免了對(duì)樣品的害。熒光素酶是一種螢火蟲體內(nèi)的生物發(fā)光酶,被廣泛用于BRET研究2。本實(shí)驗(yàn)中,選擇Luc8(海腎熒光素酶)作為供體,該物質(zhì)由海腎(Renillareinformis)基因突變而來。Luc8的生物熒光峰值接近480nm。

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