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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽進行電泳分析
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Extractionofproteinsfromextensivelycalcifiedosseoustissue,suchascorticalbonehasbeenparticularlychallengingfortraditionalmethodsofsamplepreparation.However,acomprehensiveproteomicanalysisofboneisonlypossiblewhenthetotalproteinconstituencyiseffectivelyisolated.Theefficiencyofsamplepreparationisthereforeacriticalcomponentoftheanalyticalprocess.Historically,extractionofproteinfrombonerequiredprolongedaciddemineralizationoverseveraldaystoenablecompletepenetrationofhistochemicalreagentstocellularcomponents.Herewedescribeamethodfortheextractionofproteinfromostrichtibia,whichwasusedasamodelsampletodevelopanextractionprocessthatusespressurecyc領(lǐng)technology(PCT)andalsowhichobviatestheneedforaciddemineralizationpriortoextraction.Theabilitytoextractproteinsfrombonewithoutpriordemineralizationoffersimportantadvantagesinefficientrepresentativeextractionofproteinandsignificanttimesavingsduringsamplepreparation.利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽進行電泳分析從皮質(zhì)骨等充分鈣化的骨質(zhì)組織中提取蛋白的方法極大地挑戰(zhàn)了傳統(tǒng)的樣品制備方法。然而這種方法只有在總的目標(biāo)蛋白有效分離的時候,廣泛的蛋白質(zhì)組學(xué)分析才能成為可能。因此,樣品制備的有效性成為分析過程中的關(guān)鍵因素。歷史上,從骨頭中提取蛋白需要幾天的去除礦物質(zhì)的過程使得組織化學(xué)試劑完全滲透到細(xì)胞組分中。本文描述了一種從鴕鳥脛骨中提取蛋白的方法,該方法利用了壓力循環(huán)技術(shù)(PCT),而且省去了以往的在提取蛋白之前先對樣品進行去除礦物質(zhì)的過程。這種方法使得提取蛋白非常有效而且節(jié)約了大量的時間成本。Liberty研究級微波多肽合成儀詳情請瀏覽http://www.pynnco.com,或咨詢:電話:010-65528800,傳真:010-65519722,郵件sales@pynnco.com
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽進行電泳分析
- Extractionofproteinsfromextensivelycalcifiedosseoustissue,suchascorticalbonehasbeenparticularlychallengingfortraditionalmethodsofsamplepreparation.However,acomprehensiveproteomicanalysisofboneisonlypossiblewhenthetotalproteinconstituencyiseffectivelyisolated.Theefficiencyofsamplepreparationisthereforeacriticalcomponentoftheanalyticalprocess.Historically,extractionofproteinfrombonerequiredprolongedaciddemineralizationoverseveraldaystoenablecompletepenetrationofhistochemicalreagentstocellularcomponents.Herewedescribeamethodfortheextractionofproteinfromostrichtibia,whichwasusedasamodelsampletodevelopanextractionprocessthatusespressurecyc領(lǐng)technology(PCT)andalsowhichobviatestheneedforaciddemineralizationpriortoextraction.Theabilitytoextractproteinsfrombonewithoutpriordemineralizationoffersimportantadvantagesinefficientrepresentativeextractionofproteinandsignificanttimesavingsduringsamplepreparation.利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽進行電泳分析從皮質(zhì)骨等充分鈣化的骨質(zhì)組織中提取蛋白的方法極大地挑戰(zhàn)了傳統(tǒng)的樣品制備方法。然而這種方法只有在總的目標(biāo)蛋白有效分離的時候,廣泛的蛋白質(zhì)組學(xué)分析才能成為可能。因此,樣品制備的有效性成為分析過程中的關(guān)鍵因素。歷史上,從骨頭中提取蛋白需要幾天的去除礦物質(zhì)的過程使得組織化學(xué)試劑完全滲透到細(xì)胞組分中。本文描述了一種從鴕鳥脛骨中提取蛋白的方法,該方法利用了壓力循環(huán)技術(shù)(PCT),而且省去了以往的在提取蛋白之前先對樣品進行去除礦物質(zhì)的過程。這種方法使得提取蛋白非常有效而且節(jié)約了大量的時間成本。Liberty研究級微波多肽合成儀詳情請瀏覽http://www.pynnco.com,或咨詢:電話:010-65528800,傳真:010-65519722,郵件sales@pynnco.com[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)對皮質(zhì)骨中分離出來的蛋白和多肽[詳細(xì)]
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2024-09-28 05:15
期刊論文
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從動物微粒體中提取蛋白
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從動物微粒體中提取蛋白[詳細(xì)]
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2008-07-31 00:00
專利
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)提高從大腸桿菌提取蛋白的產(chǎn)量
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)提高從大腸桿菌提取蛋白的產(chǎn)量[詳細(xì)]
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2024-09-28 12:53
期刊論文
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從植物組織中提取RNA
- Extractionofnucleicacidsfromplantsisatimeconsumingandlaborintensiveprocess.Twocommonmethodsofextractionare(i)grindingindividualsampleswithmortarandpestle,and(ii)mechanicalmincing.Unfortunately,thesemethodsarepronetocontamination,asthesametoolsareoftenreusedsequentiallyformultiplepreparations.Thisriskofcontaminationisoftenunacceptable,especiallyinstudiesusingrareorvaluablespecimens,suchaswhenbreedingselectioniscritical(particularlywiththeadventofgeneticallyengineeredcrops),orwhenintellectualpropertydiscoveryorprotectionisinvolved.HerewecomparecellisruptionbyQiagenRNeasywithmortarandpestletopressurecyc領(lǐng)technologyPCT)fortheextractionofRNAfromcornsprouts,grapeseeds,andgrapeskin.利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從植物組織中提取RNA從植物中提取核酸是一件非常耗時耗力的工作。目前常見的提取方法有人工研磨和機械破碎兩種方法。因為研磨工具和破碎刀頭經(jīng)常反復(fù)使用,所以這兩種方法非常容易造成污染。在對非常稀少或者非常有價值的樣品進行研究時,污染常常不能被接受。本文介紹了利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和傳統(tǒng)研磨技術(shù)兩種不同的方法從玉米芽、葡萄種子和葡萄皮中提取RNA,并對這兩種方法進行了比較。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從植物組織中提取RNA
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從植物組織中提取RNA[詳細(xì)]
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2024-09-17 01:55
產(chǎn)品樣冊
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)處理植物相關(guān)細(xì)菌和孢子
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)處理植物相關(guān)細(xì)菌和孢子[詳細(xì)]
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2008-08-01 00:00
期刊論文
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)處理植物相關(guān)細(xì)菌和孢子
- 生物恐怖對人類的威脅經(jīng)常存在??焖僭\斷系統(tǒng)對于人類安全和降低戰(zhàn)場上的人員傷亡非常重要。許多針對反生物恐怖的研究活動都集中在擴增、鑒定和診斷系統(tǒng)中。然而,樣品制備已經(jīng)成為快速診斷生物恐怖物質(zhì)中的一個重要方面。樣品制備技術(shù)的發(fā)展目前遠遠落后于擴增、鑒定和診斷系統(tǒng)的發(fā)展。炭疽桿菌已經(jīng)成為人類的一種特殊威脅,它來自于動物毛發(fā)或者生物武器中的含有炭疽的氣溶膠。但是,炭疽桿菌僅僅是潛在生物恐怖中的一種。本文描述了無傳染性的枯草芽孢桿菌作為模式生物對于發(fā)展從植物相關(guān)細(xì)菌和孢子中提取DNA的意義。細(xì)菌孢子具有彈性而且在物理和化學(xué)處理之后仍然存活。從孢子中提取DNA用于檢測變得非常具有挑戰(zhàn)性。目前從細(xì)菌孢子中提取DNA包含化學(xué)和物理兩種方法,然而這兩種方法具有重要的局限性和缺點。為了增加從孢子等生物樣品中提取DNA的安全性、簡便性和有效性,PBI公司研究出幾種利用化學(xué)物質(zhì)和壓力循環(huán)相結(jié)合的方法從上述富有挑戰(zhàn)性的生物中提取DNA。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和ProteoSOLVE溶解劑破壞秀麗廣桿
- 利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和ProteoSOLVE溶解劑破壞秀麗廣桿[詳細(xì)]
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2008-08-05 00:00
課件
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壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)為弗蘭克氏菌蛋白的研究提供方便
- Frankiaaregram-positive,filamentous,nitrogen-fixingactinobacteriathataresymbioticwithover200differentspeciesofplants.Frankiaproducethreecelltypes:vegetativehyphae,sporeslocatedinsporangia,andtheuniquelipid-envelopedcellularstructures,termedvesicles.Vesiclesareformedinsideplantcellnodules,orincultureundernitrogenlimitingconditions,andactasspecializedstructuresforthenitrogenfixationprocess.Thematurevesicleissurroundedbyanenvelopethatextendsdownthestalkofthevesiclepastthebasalseptum,whichseparatesthevesiclefromthehyphae.TechniqueshavebeendevelopedfortheisolationandurificationofintactvesiclesfromFrankiagrowninculture[1,2,3].Initialinvestigationsonthepropertiesofpurifiedvesicleshavefocusedonnitrogenmetabolism[3,4].Proteinextractionfromvesicleshashistoricallybeendifficultandasignificantbottlenecktoproteomicstudiesbecausevesiclesareresilientstructuresthataredifficulttodisrupt.ReliableandcomprehensiveproteomicmapsofFrankiahyphaeandvesiclescanonlybeassuredwhenproteinsareisolatedreproduciblyandinamannerinwhichtheyareaccuratelyrepresentedinthedownstreamanalysis.Forexample,2DGEcanbeanaccuraterepresentationofaproteomeonlyiftheentireproteinconstituencyofcellsisrecoveredduringthesamplepreparationprocess.WhileFrenchpresstreatmenteffectivelylyseshyphae,itfailstodisruptFrankiavesicles.PressureCyc領(lǐng)Technology(PCT)usedincombinationwithaspecializedlysisreagenteffectivelydisruptedpurifiedvesiclesenab領(lǐng)furtherinvestigationoftheproteomeofthevesicles.[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)為弗蘭克氏菌蛋白的研究提供方便
- 壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)為弗蘭克氏菌蛋白的研究提供方便[詳細(xì)]
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2024-09-28 21:29
產(chǎn)品樣冊
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通過壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和二維電泳技術(shù)研究沼澤紅假單胞菌蛋白
- 沼澤紅假單胞菌是一種革蘭氏陰性細(xì)菌,紫色,具有向光性。它在有氧和無氧條件下均能生長。為了適應(yīng)環(huán)境變化,它能選擇新陳代謝過程并能降解木質(zhì)素、天然聚合物等芳香化合物。由于它能去除環(huán)境污染物質(zhì)而得到研究。沼澤紅假單胞菌的基因組學(xué)特征已經(jīng)了解,它的蛋白質(zhì)組學(xué)分析已經(jīng)成為研究熱點。蛋白質(zhì)組學(xué)分析有賴于細(xì)胞溶解和蛋白釋放?,F(xiàn)在有效溶解革蘭氏陰性細(xì)菌的標(biāo)準(zhǔn)方法需要對細(xì)胞進行機械破壞,而且需要酶或者化學(xué)物質(zhì)對細(xì)胞壁進行破壞。在溶解細(xì)胞方面,壓力循環(huán)技術(shù)與超聲技術(shù)進行了對比。而且與對細(xì)胞壁進行酶水解的方法進行了對比。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和ProteoSOLVE溶解劑破壞秀麗廣桿線蟲(Cae
- 沒有任何其他的多細(xì)胞生物像線蟲一樣在細(xì)胞和分子水平上研究的那么深入。然而,線蟲類堅硬的外表皮阻止了細(xì)胞溶解并且阻止蛋白質(zhì)學(xué)和糖蛋白質(zhì)學(xué)的研究步伐。表皮主要由殼質(zhì)和膠原質(zhì)組成,其中膠原質(zhì)富含N端和C端半胱氨酸,而且這兩種氨基酸常以二硫鍵相連。一些酶類比如幾丁質(zhì)酶和膠原酶能夠用于弱化表皮。但是,除非這些酶固定不變,否則這些酶會產(chǎn)生一些外生蛋白,這些蛋白會在下游分析中依然存在。另外,酶誘導(dǎo)的細(xì)胞溶解會給細(xì)胞質(zhì)、膜蛋白及其他非水溶性蛋白的提取帶來麻煩。ProteoSOLVE溶解劑可以Z*程度的破壞線蟲表皮并增加蛋白產(chǎn)量,該溶解劑若結(jié)合壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)可獲得與其他技術(shù)相比更多的蛋白量。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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通過壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和二維電泳技術(shù)研究沼澤紅假單胞
- 通過壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)和二維電泳技術(shù)研究沼澤紅假單胞[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:11
安裝說明
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壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)分離細(xì)胞線粒體在蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究中的應(yīng)用
- ntroductionProteomicprofi領(lǐng)ofmitochondriahasthepotentialtoprovideinsightsintomitochondrialfunctionsassociatedwithaging,variousmetabolicstatesanddiseasessuchascancer,diabetesandcardiovasculardisease[1].Rapidandreproducibleisolationofintactmitochondriaiscrucialforefficientenrichmentandsubsequentproteomicanalysisoflow-abundancemitochondrialproteins[2].HerewedescribeasystemfortheisolationofintactmitochondriafromratPC12cellsusingpressurecyc領(lǐng)technology(PCT).壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)分離細(xì)胞線粒體在蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究中的應(yīng)用近年來,線粒體蛋白組學(xué)的研究揭示了線粒體相關(guān)蛋白與人類的壽命、各種新陳代謝的狀態(tài)以及很多疾病比如癌癥、糖尿病、心血管病等存在一定的關(guān)聯(lián)。對于數(shù)量極其有限的線粒體蛋白進行收集并進行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,其中至關(guān)重要的工作就是從細(xì)胞中快速、持續(xù)的分離完整的線粒體。本文描述了如何利用壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)從鼠PC12細(xì)胞中快速分離完整的線粒體。[詳細(xì)]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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利用現(xiàn)代生物技術(shù)進行多肽類藥物的生產(chǎn)和改進
- 利用現(xiàn)代生物技術(shù)進行多肽類藥物的生產(chǎn)和改進[詳細(xì)]
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2009-06-04 00:00
實驗操作
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Isolation of Mitochondria from Cell Cultures by PCT for Proteomic Analysis 壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)分離細(xì)胞線粒體在蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究中的應(yīng)用
- Isolation of Mitochondria from Cell Cultures by PCT for Proteomic Analysis 壓力循環(huán)技術(shù)(PCT)分離細(xì)胞線粒體在蛋白質(zhì)組學(xué)分析研究中的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2009-10-15 00:00
應(yīng)用文章
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產(chǎn)品應(yīng)用(47)如何利用ScanLater免疫蛋白印跡技術(shù)對未知蛋白進行定性分析和定量檢測
- 今天在制藥和臨床研究領(lǐng)域中對某種蛋白進行檢測是整個流程中重要環(huán)節(jié),Western Blot(蛋白免疫印跡技術(shù))也是Z常見的蛋白檢測手段,多種技術(shù)方法都可以對膜上的蛋白質(zhì)進行定量檢測,包括熒光法和化學(xué)發(fā)光法。[詳細(xì)]
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2021-02-24 15:44
應(yīng)用文章
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多肽受體蛋白相互作用和機制
- 多肽受體蛋白相互作用和機制高等植物多肽激素CLAVATA3(CLV3)對于植物莖端分生組織干細(xì)胞數(shù)目的維持起著極其重要的作用。過去幾十年來,CLAVATA1/CLAVATA2(CLV1/CLV2)復(fù)合體被認(rèn)為是CLV3多肽在細(xì)胞膜上的**受體。然而,新的假設(shè)僅僅停留在遺傳學(xué)上的預(yù)測,仍然缺乏進一步的生物化學(xué)和細(xì)胞學(xué)的證據(jù)。為了更好地理解這三個可能的受體蛋白之間的相互關(guān)系,林金星研究組利用新型的活體下檢測蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù)螢火蟲熒光素酶互補技術(shù)(Fireflyluciferasecomplementationimagingassay,LCI)在擬南芥葉肉原生質(zhì)體(Arabidopsismesophyllprotoplasts)和煙草葉片(Nicotianabenthamianaleaves)兩個體系中分析了CLV1,CLV2和CRN三個受體蛋白之間的相互作用?!∪欢鳽近的遺傳學(xué)分析篩選到了一個新的受體蛋白激酶成員CORYNE(CRN),并且發(fā)現(xiàn)它在CLV3信號途徑中起著非常重要的作用。在一系列遺傳學(xué)分析的基礎(chǔ)上,新的CLV3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路假設(shè)被提出:即CLV1同源二聚體與CLV2/CRN異源復(fù)合體可能平行獨立地介導(dǎo)CLV3信號?!嶒灲Y(jié)果表明:LCI技術(shù)和免疫共沉淀技術(shù)(Co-immunoprecipitationassay)都證實了CLV2在沒有CLV3多肽刺激的情況下可以直接地與CRN發(fā)生相互作用;外源的CLV3多肽處理,并不會明顯地影響CLV2-CRN之間的互作強度;進一步的LCI實驗發(fā)現(xiàn)CLV1不能夠與CLV2發(fā)生直接的相互作用,但能夠與CRN有微弱的相互作用;除此之外,實驗人員還發(fā)現(xiàn)CRN自身可以形成同源二聚體,而CLV1或CLV2自身不能形成同源二聚體。這些生化和細(xì)胞學(xué)結(jié)果對于新提出的CLV3平行雙通路假設(shè)提供了直接的證據(jù)。Anti-ATP2c1鈣離子ATP酶通道蛋白抗體規(guī)格:0.2mlAnti-phospho-ATM(Ser1981)磷酸化毛細(xì)血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATF6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATP4B氫鉀ATP酶通道蛋白抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATP5JATP5J抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATP7A銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)α鏈抗體規(guī)格:0.2mlAnti-ATRN吸引素抗體規(guī)格:0.2mlAnti-phospho-ATR/ACTR(Ser428)磷酸化ATR抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATP7B銅轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)β鏈抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATP1b2/Na+K+ATPase鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體規(guī)格:0.2mlAnti-Phospho-Na,K-ATPasealpha-1(Tyr10)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規(guī)格:0.1mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser16)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規(guī)格:0.2mlAnti-Phospho-ATP1A1(Ser23)磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體規(guī)格:0.1mlAnti-ATXN1失調(diào)癥蛋白1抗體規(guī)格:0.2mlAnti-phospho-ATPcitratelyase(Ser455)磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體規(guī)格:0.1mlAnti-phospho-Ataxin-1(Ser775)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體規(guī)格:0.1mlAnti-AVEN凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活YZ劑抗體規(guī)格:0.2mlAnti-Kir6.2ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體規(guī)格:0.2mlAnti-AVPR2精氨酸加壓素受體2抗體規(guī)格:0.2mlAnti-Bdkrb2/B2R緩激肽B2受體抗體規(guī)格:0.2mlAnti-Axin1軸蛋白1抗體規(guī)格:0.2mlAnei-ATX自分泌運動因子抗體規(guī)格:0.2mlAnti-AuroraA有絲分裂激酶A抗體規(guī)格:0.2mlAnti-AuroraB有絲分裂激酶B抗體規(guī)格:0.2mlAnti-AuroraC有絲分裂激酶B抗體規(guī)格:0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊
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GFC方法分析蛋白和多肽
- GFC方法分析蛋白和多肽[詳細(xì)]
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2024-09-29 07:56
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