本文由 上海科興商貿(mào)有限公司 整理匯編

2018-10-03 10:00 667閱讀次數(shù)

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• 黃曲霉毒素M1ELISA檢測試劑盒操作

  黃曲霉毒素M1ELISA檢測試劑盒操作檢測步驟測定前須知：1.使用之前將所有試劑和所需板條回溫（20～25℃）。2.使用之后立即將所有試劑及剩余的板條放置2～8℃。3.ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是ELISA操作中的要點。4.在所有的恒溫孵育過程中，避免光線照射，用蓋板膜封住微孔板。操作步驟：1.將所需試劑從微孔板中取出，放置室溫（20～25℃）30min以上，液體試劑使用前均須搖勻。2.取出所需數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封，保存于2～8℃。不要冷凍。3.洗滌工作液在使用前也需回溫。4.將樣本和標準品對應(yīng)微孔編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。5.加標準品/樣本50ml到對應(yīng)的微孔中，加入酶標物50ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)30min。6.小心揭開蓋板膜，用洗滌工作液充分洗滌300ml/孔，洗板5次，每次間隔30s，用吸水紙拍干。7.加入顯色液100ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)30min。8.加終止液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)酶標儀于450nm處讀每孔OD值。注意事項1.室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復(fù)到室溫（20～25℃）會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。2.在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。3.每種試劑使用前均需搖勻。4.反應(yīng)終止液為2M鹽酸，避免接觸皮膚。5.不要使用過了有效期的試劑盒；也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。6.儲存條件：試劑盒保存于2～8℃，不要冷凍，將不用的微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感，因此要避光保存。7.試劑變質(zhì)的跡象：顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì)，應(yīng)當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。8.加入顯色液后，一般顯色時間為15～30min。若顏色較淺，可延長反應(yīng)時間到35min（或更長），但不得超過40min。反之，則減短反應(yīng)時間。9.該試劑盒**反應(yīng)溫度為25℃，溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。[詳細]

  2018-10-03 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 黃曲霉毒素M1檢測試劑盒

  黃曲霉毒素M1檢測試劑盒[詳細]

  2012-08-24 00:00

  期刊論文

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• 黃曲霉毒素B1檢測試劑盒

  黃曲霉毒素B1檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-28 01:07

  標準

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• 黃曲霉毒素B1檢測試劑盒說明書

  深圳市芬析儀器制造有限公司黃曲霉毒素B1檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測谷物、飼料等樣品中的黃曲霉毒素B1（AflatoxinB1，AFB1），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的黃曲霉毒素B1和酶標板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗黃曲霉毒素B1抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含黃曲霉毒素B1含量成負相關(guān)，與標準曲線比較即可得出樣本中黃曲霉毒素B1的殘留量。[詳細]

  2018-11-03 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 營養(yǎng)奶粉黃曲霉毒素檢測

  營養(yǎng)奶粉黃曲霉毒素檢測[詳細]

  2012-11-12 00:00

  課件

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• 黃曲霉毒素M1檢測卡

  黃曲霉毒素M1檢測卡[詳細]

  2012-08-24 00:00

  標準

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• 黃曲霉毒素檢測整體解決方案書

  恒信儀器 黃曲霉毒素檢測整體解決方案書[詳細]

  2024-09-22 20:59

  應(yīng)用文章

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• HELICA黃曲霉毒素M1競爭性ELISA檢測試劑盒

  HELICA黃曲霉毒素M1競爭性ELISA檢測試劑盒[詳細]

  2011-11-24 00:00

  安裝說明

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• Aflatoxins 黃曲霉毒素

  Aflatoxins 黃曲霉毒素[詳細]

  2016-07-21 00:00

  課件

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• 黃曲霉毒素解決方案

  黃曲霉毒素解決方案[詳細]

  2024-09-15 17:50

  選購指南

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• 黃曲霉毒素B1

  黃曲霉毒素B1[詳細]

  2024-09-11 17:48

  實驗操作

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• 黃曲霉毒素檢測方案HPLC法

  黃曲霉毒素檢測方案HPLC法[詳細]

  2013-07-17 00:00

  應(yīng)用文章

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• 高效液相色譜法檢測黃曲霉毒素殘留

  GX液相色譜法檢測黃曲霉毒素殘留[詳細]

  2013-03-07 00:00

  應(yīng)用文章

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• 黃曲霉毒素HPLC檢測的解決方案

  黃曲霉毒素HPLC檢測的解決方案[詳細]

  2011-12-29 00:00

  安裝說明

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• 黃曲霉毒素B1檢測試紙說明書

  【簡介】黃曲霉毒素B1（AflatoxinB1簡寫為AFB1）是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性Z強的一種。黃曲霉毒素B1對人和若干動物具有強烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉毒素B1是大部分食品的必檢項目之一。本品的檢測靈敏度為5ng/ml?！緶y定原理】本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過單克隆抗體競爭結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標記的抗AFB1單克隆抗體。[詳細]

  2018-08-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人（Human） 黃曲霉毒素（Aflatoxin）ELISA 檢測試劑盒說明書

  人（Human）黃曲霉毒素（Aflatoxin）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：Aflatoxin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Aflatoxin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Aflatoxin和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Aflatoxin的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：40ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗Aflatoxin抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：40ng/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液10ng/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0ng/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5ng/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液1.25ng/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（ng/ml）A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應(yīng)的Aflatoxin標準品濃度為橫坐標（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的Aflatoxin含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-40ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml[詳細]

  2018-09-14 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 強致癌物質(zhì)黃曲霉毒素M1檢測方案

  強致癌物質(zhì)黃曲霉毒素M1檢測方案[詳細]

  2011-12-30 00:00

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• HPLC法檢測黃曲霉毒素M1方案

  HPLC法檢測黃曲霉毒素M1方案[詳細]

  2024-09-28 21:04

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• 黃曲霉毒素B1快速檢測試紙卡

  黃曲霉毒素B1快速檢測試紙卡[詳細]

  2024-09-11 18:03

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• 黃曲霉毒素B1&M1整體解決方案

  黃曲霉毒素B1&M1整體解決方案[詳細]

  2013-05-24 00:00

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