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2024-09-28 07:01 1571閱讀次數(shù)

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• 巨細(xì)胞病毒的致病性與免疫性介紹

  巨細(xì)胞病毒（Cytomegaoviyns，CMV）是一種皰疹病毒組DNA病毒。分布廣泛，其他動(dòng)物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系統(tǒng)，神經(jīng)系統(tǒng)和肝臟疾患為主的各系統(tǒng)感染，從輕微無(wú)癥狀感染直到嚴(yán)重缺陷或死亡。巨細(xì)胞病毒（CytomegalovirusCMV）亦稱(chēng)細(xì)胞包涵體病毒，由于感染的細(xì)胞腫大，并具有巨大的核內(nèi)包涵體，故名。巨細(xì)胞病毒在人群中感染非常廣泛，我國(guó)成人感染率達(dá)95%以上，通常呈隱性感染，多數(shù)感染者無(wú)臨床癥狀，但在一定條件下侵襲多個(gè)器官和系統(tǒng)可產(chǎn)生嚴(yán)重疾病。病毒可侵入肺、肝、腎、唾液腺、乳腺其他腺體，以及多核白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，可長(zhǎng)期或間隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宮分泌物多處排出病毒。通?？谇?，生殖道，胎盤(pán)，輸血或器官移植等多途徑傳播。（一）先天性感染：妊娠母體CMV感染可通過(guò)胎盤(pán)侵襲胎兒引起先天性感染，少數(shù)造成早產(chǎn)、流產(chǎn)、死產(chǎn)或生后死亡?；純嚎砂l(fā)生黃疸，肝脾腫大，血小板減少性紫斑及溶血性貧血。存活兒童常遺留必性智力低下，神經(jīng)肌肉運(yùn)動(dòng)障礙，耳聾和脈絡(luò)視網(wǎng)膜炎等。（二）圍產(chǎn)期感染：產(chǎn)婦泌尿道和宮頸排出CMV，則分娩時(shí)嬰兒經(jīng)產(chǎn)道可被感染，多數(shù)和癥狀輕微或無(wú)臨床癥狀的亞臨床床感染，有的有輕微呼吸道障礙或肝功能損傷。（三）兒童及成人感染：通過(guò)吸乳、接吻、性接觸、輸血等感染、通常為亞臨床型，有的也能導(dǎo)致嗜異性抗體陰性單核細(xì)胞增多癥。由于妊娠，接受免疫YZZL，器官移植，腫瘤等因素激活潛伏在單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞中病毒，引起單核細(xì)胞增多癥、肝炎、間質(zhì)性肺炎、視網(wǎng)膜炎、腦炎等。（四）細(xì)胞轉(zhuǎn)化和可能致癌作用：經(jīng)紫外線(xiàn)滅活的CMV可轉(zhuǎn)化嚙齒類(lèi)動(dòng)物胚胎纖椎母細(xì)胞。在某些腫瘤如宮頸癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、Kaposis肉瘤中CMVDNA檢出率高，CMV抗體滴度亦高于正常人，在上述腫瘤建立的細(xì)胞株中還發(fā)現(xiàn)病毒顆粒，提示CMV與其皰疹病毒一樣，具有潛在致癌的可能性。巨細(xì)胞病毒的免疫性：機(jī)體的細(xì)胞免疫功能對(duì)CMV感染的發(fā)生和發(fā)展起重要作用，細(xì)胞免疫缺陷者，可導(dǎo)致嚴(yán)重的和長(zhǎng)期的CMV感染，并使機(jī)體的細(xì)胞免疫進(jìn)一步受到Y(jié)Z，如殺傷性T細(xì)胞活力下降，NK細(xì)胞功能減低等。機(jī)體原發(fā)感染CMV后能產(chǎn)生特異性抗體和殺傷性T淋巴細(xì)胞，激活NM細(xì)胞?？贵w有限CMV復(fù)制能力，對(duì)相同毒株再感染有一定抵抗力，但不能抵抗內(nèi)源性潛伏病毒的活化，及CMV其他不同毒株的外源性感染。而通過(guò)特異性殺性T淋巴細(xì)胞和抗體依賴(lài)細(xì)胞毒性細(xì)胞能發(fā)揮Zda的抗病毒作用。[詳細(xì)]

  2024-09-28 07:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 肺炎支原體致病性與免疫性

  肺炎支原體致病性與免疫性（一）致病性1、感染途徑肺炎支原體主要引起呼吸道外源性感染，由口、鼻分泌物經(jīng)空氣傳播。傳染源為病人或帶菌者。兒童和青少年為易感人群，但現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)在成人中亦非少見(jiàn)，一年四季均可發(fā)病，但多發(fā)牛在夏末秋初。2、致病物質(zhì)有以下幾種：①黏附因子PI蛋白：能吸附于宿主呼吸道黏膜細(xì)胞受體神經(jīng)氨酸酶上，繼而在局部增殖，獲取宿主細(xì)胞膜固醇等脂類(lèi)，導(dǎo)致宿主細(xì)胞的損傷；②莢膜：具有抗吞噬作用，亦有毒性；③毒性代謝產(chǎn)物：如神經(jīng)毒素、核酸酶、過(guò)氧化氫和超氧陰離子等引起宿主黏膜上皮細(xì)胞的病理性損害，出現(xiàn)腫脹、壞死和脫落，微纖毛運(yùn)動(dòng)減弱或停止。3、所致疾病為支原體肺炎，此病的病理變化以間質(zhì)性肺炎為特征，故又稱(chēng)原發(fā)性非典型肺炎。潛伏期23周，起病緩慢，約1/3病例無(wú)癥狀。呼吸道感染有咽炎和支氣管炎，少數(shù)累及肺。發(fā)病初有乏力、頭痛、咽痛、發(fā)冷、發(fā)熱、肌肉酸痛、食欲減退、惡心、嘔吐等，頭痛顯著。發(fā)熱高低不一，可高達(dá)39℃。23d后出現(xiàn)明顯的呼吸道癥狀，如陣發(fā)性刺激性咳嗽，咳少量黏痰或黏液膿性痰，有時(shí)痰中帶血。發(fā)熱可持續(xù)23周。熱度恢復(fù)正常后尚可遺有咳嗽，伴胸骨下疼痛。支原體肺炎臨床癥狀輕重不一，嬰幼兒病情較重，發(fā)病急，病程長(zhǎng)，以呼吸困難為主，主要癥狀一般在10d后減輕。但由于局部炎癥導(dǎo)致的咳嗽持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，常引起支氣管壁肥厚。有些兒童合并其他系統(tǒng)病變，如循環(huán)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等。X線(xiàn)改變可有：①肺門(mén)陰影增濃；②支氣管肺炎改變；③間質(zhì)性肺炎改變；④均一的實(shí)變影像。支原體肺炎以115歲人群發(fā)病率較高，其中嬰幼兒發(fā)病率占25%69%，病情嚴(yán)重。肺炎支原體引起的呼吸道感染每隔46年將有一次較大規(guī)模的流行，嚴(yán)重患者可死亡。（二）免疫性機(jī)體感染肺炎支原體后，血清中可檢出多種抗支原體抗體，只有呼吸道slgA對(duì)再感染有一定防御作用，但仍可再感染。病人血清中還可誘發(fā)一種非特異冷凝集素，它可能是支原體作用于紅細(xì)胞I型血型抗原，使其變性后產(chǎn)生的自身抗體，是某些病人由支原體感染引起的一種自身免疫現(xiàn)象。肺炎支原體感染者冷凝集素的陽(yáng)性率為50%以上，常用于輔助診斷。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 巨細(xì)胞病毒（CMV）ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

  巨細(xì)胞病毒（CMV）ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2014-08-05 00:00

  安裝說(shuō)明

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• 小鼠巨細(xì)胞病毒抗體（CMV-Ab）試劑盒使用方法

  檢測(cè)范圍：96T使用目的：本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)表達(dá)。用純化的小鼠巨細(xì)胞病毒抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的巨細(xì)胞病毒抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中小鼠巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)的存在與否。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8陽(yáng)性對(duì)照0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9陰性對(duì)照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 應(yīng)用SPR-測(cè)量系統(tǒng)檢測(cè)植物致病性病毒

  應(yīng)用SPR-測(cè)量系統(tǒng)檢測(cè)植物致病性病毒[詳細(xì)]

  2011-05-22 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 人巨細(xì)胞病毒IgM（CMV-IgM）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人巨細(xì)胞病毒IgM(CMV-IgM)的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人巨細(xì)胞病毒IgM(CMV-IgM)水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入巨細(xì)胞病毒IgM(CMV-IgM)，再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨細(xì)胞病毒IgM(CMV-IgM)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人巨細(xì)胞病毒IgM(CMV-IgM)含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：135pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為90pg/mL，60pg/mL，30pg/mL，15pg/mL，7.5pg/mL）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍：5pg/mL-100pg/mL保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 豬巨細(xì)胞病毒抗體（CMV-Ab）ELISA試劑盒操作說(shuō)明書(shū)

  南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量保證，價(jià)格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定豬血清，血漿及相關(guān)液體樣本中豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定標(biāo)本中豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)。用純化的豬腺病毒(ADV)抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)的存在與否。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存陰性對(duì)照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽(yáng)性對(duì)照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）加樣：分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。結(jié)果判定：試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00;陰性對(duì)照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)陰性陽(yáng)性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為豬巨細(xì)胞病毒抗體(CMV-Ab)陽(yáng)性注意事項(xiàng)1．操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，本試劑不同批號(hào)組分不得混用。2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請(qǐng)避光保存。6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)，參考波長(zhǎng)為630nm7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時(shí)必須注意安全。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• SPR測(cè)量系統(tǒng)完成對(duì)特殊免疫球蛋白的巨細(xì)胞病毒檢測(cè)

  SPR測(cè)量系統(tǒng)完成對(duì)特殊免疫球蛋白的巨細(xì)胞病毒檢測(cè)[詳細(xì)]

  2024-09-28 23:18

  標(biāo)準(zhǔn)

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• Agilent xCELLigence 實(shí)時(shí)細(xì)胞分析：檢測(cè)病毒介導(dǎo)的細(xì)胞致病性的新方法

  Agilent xCELLigence 實(shí)時(shí)細(xì)胞分析：檢測(cè)病毒介導(dǎo)的細(xì)胞致病性的新方法[詳細(xì)]

  2024-09-21 13:21

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• 流變儀的分類(lèi)與介紹

  流變儀的分類(lèi)與介紹[詳細(xì)]

  2010-11-04 00:00

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• 應(yīng)用SPR 技術(shù)測(cè)量自身免疫性神經(jīng)病的抗體水平

  應(yīng)用SPR 技術(shù)測(cè)量自身免疫性神經(jīng)病的抗體水平[詳細(xì)]

  2005-04-05 00:00

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• FH1267-人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株；Mo7e

  FH1267-人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株；Mo7e[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

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• 食物中毒多由致病性微生物污染食品引起

  食物中毒多由致病性微生物污染食品引起[詳細(xì)]

  2013-11-18 00:00

  課件

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• 適用于進(jìn)出境禽鳥(niǎo)及其產(chǎn)品高致病性

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  2020-04-26 17:54

  標(biāo)準(zhǔn)

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• EB病毒潛伏膜蛋白1與腫瘤轉(zhuǎn)移研究的進(jìn)展

  EB病毒潛伏膜蛋白1與腫瘤轉(zhuǎn)移研究的進(jìn)展[詳細(xì)]

  2012-05-03 00:00

  操作手冊(cè)

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• 移液器的選購(gòu)、使用方法與維護(hù)介紹

  移液器的選購(gòu)、使用方法與維護(hù)介紹[詳細(xì)]

  2013-05-08 00:00

  專(zhuān)利

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• 熱電偶的四大定律與種類(lèi)介紹

  熱電偶的四大定律與種類(lèi)介紹[詳細(xì)]

  2013-11-01 00:00

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• 制備洗滌液的方法與注意事項(xiàng)介紹

  [導(dǎo)讀]在實(shí)驗(yàn)室分析工作中，洗滌玻璃儀器不僅是一項(xiàng)必須做的實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作，也是一項(xiàng)技術(shù)性的工作。儀器洗滌是否符合要求，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和精密度均有影響。在今天的資料下載內(nèi)容中，上海恒遠(yuǎn)生物公司來(lái)為大家介紹制備洗滌液的方法與注意事項(xiàng)。一、純酸純堿洗液根據(jù)器皿污垢的性質(zhì)，直接用濃硫酸(HCL)或濃硫酸(H2SO4)、濃硝酸(HNO3)浸泡或浸煮器皿(溫度不宜太高，否者濃酸揮發(fā)刺激人)。純堿洗液多采用10%以上的濃燒堿(NaOH)、氫氧化鉀(KOH)或碳酸鈉(Na2CO3)液浸泡或浸煮器皿(可以煮沸)。二、有機(jī)溶劑帶有脂肪性污物的器皿，可以用汽油、甲苯、二甲苯、丙酮、酒精、、等有機(jī)溶劑擦洗或浸泡。但用有機(jī)溶劑作為洗液浪費(fèi)較大，能用刷子洗刷的大件儀器盡量采用堿性洗液。只有無(wú)法使用刷子的小件或特殊形狀的儀器才使用有機(jī)溶劑洗滌，如活塞內(nèi)孔、移液管尖頭、滴定管尖頭、滴定管活塞孔、滴管、小瓶等。三、強(qiáng)酸氧化劑洗液是用重鉻酸甲(K2Cr2O7)和濃硫酸(H2SO4)配成。K2Cr2O7在酸性溶液中，有很強(qiáng)的氧化能力，對(duì)玻璃儀器又及少有侵蝕作用。所以這種洗液在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用Z廣泛?！　∨渲茲舛雀饔胁煌瑥?~12%的各種濃度都有。配制方法大致相同：取一定量的K2Cr2O7(工業(yè)品即可)，先用約1~2倍的水加熱溶解，稍冷后，將工業(yè)品濃H2SO4所需體積數(shù)徐徐加入K2Cr2O7不溶液中(千萬(wàn)不能將水或溶液加入H2SO4中)，邊倒邊用玻璃棒攪拌，并注意不要濺出，混合均勻，俟冷卻后，裝入洗液瓶備用。新配制的洗液為紅褐色，氧化能力很強(qiáng)。當(dāng)洗液用久后變?yōu)楹诰G色，即說(shuō)明洗液無(wú)氧化洗滌力。例如，配制12%的洗液500mL。取60克工業(yè)品K2Cr2O7置于100mL水中(加水量不是固定不變的，以能溶解為度)，加熱溶解，冷卻，徐徐加入濃H2SO4340mL，邊加邊攪拌，冷后裝瓶備用。這種洗液在使用時(shí)要切實(shí)注意不能濺到身上，以防“燒"破衣服和損傷皮膚。洗液倒入要洗的儀器中，應(yīng)使儀器周壁全浸洗后稍停一會(huì)再倒回洗液瓶。**次用少量水沖洗剛浸洗過(guò)的儀器后，廢水不要倒在水池里和下水道里，長(zhǎng)久會(huì)腐蝕水池和下水道，應(yīng)倒在廢液缸中，缸滿(mǎn)后倒在垃圾里，如果無(wú)廢液缸，倒年紀(jì)素養(yǎng)人生觀不朽啊激素談話(huà)法入水池時(shí)，要邊倒邊用大量的水沖洗。四、堿性高錳酸鉀洗液用堿性高錳酸鉀作洗液，作用緩慢，適合用于洗滌有油污的器皿。配法：取高錳酸鉀(KMnO4)4克加少量水溶解后，再加入10%氫氧化鈉(NaOH)100mL。五、洗消液檢驗(yàn)致癌性化學(xué)物質(zhì)的器皿，為了防止對(duì)人體的侵害，在洗刷之前應(yīng)使用對(duì)這些致癌性物質(zhì)有破壞分解作用的洗消液進(jìn)行浸泡，然后再進(jìn)行洗滌。在食品檢驗(yàn)中經(jīng)常使用的洗消液有：1%或5%次氯酸鈉(NaOCL)溶液、20%HNO3和2%KMnO4溶液。1%或5%NaOCL溶液對(duì)在破壞作用。用1%NaOCL溶液對(duì)污染的玻璃儀器浸泡半天或用5%NaOCL溶液浸泡片刻后，即可達(dá)到破壞黃曲霉毒素的作用。配法：取漂100克，加水500mL，攪拌均勻，另將工業(yè)用Na2CO380克溶于溫水500mL中，再將兩液混合，攪拌，澄清后過(guò)濾，此濾液含NaOCL為2.5%；若用漂粉精配制，則NaCO3的重量應(yīng)加倍，所得溶液濃度約為5%。如需要1%NaOCL溶液，可將上述溶液按比例進(jìn)行稀釋。20%HNO3溶液和2%KMnO4溶液對(duì)苯并(a)芘有破壞作用，被苯并(a)芘污染的玻璃儀器可用20%HNO3浸泡24小時(shí)，取出后用自來(lái)水沖去殘存酸液，再進(jìn)行洗滌。被苯并(a)芘污染的乳膠手套及微量注射器等可用2%KMnO4溶液浸泡2小時(shí)后，再進(jìn)行洗滌。五、堿性洗液堿性洗液用于洗滌有油污物的儀器，用此洗液是采用長(zhǎng)時(shí)間(24小時(shí)以上)浸泡法，或者浸煮法。從堿洗液中撈取儀器時(shí)，要戴乳膠手套，以免燒傷皮膚。常用的堿洗液有：碳酸鈉液（Na2CO3,即純堿)，碳酸氫鈉(Na2HCO3,小蘇打)，磷酸鈉(Na3PO4,磷酸三鈉)液，磷酸氫二鈉(Na2HPO4)液等。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 病毒的超低溫保存法

  病毒的超低溫保存法[詳細(xì)]

  2013-04-03 00:00

  選購(gòu)指南

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• H7N9病毒的起源

  尋找H7N9病毒的起源H7N9帶來(lái)的疑惑至今為止，檢出了H7N9病毒的幾種禽類(lèi)可能并不是真正的元兇，因?yàn)樵诨钋菔袌?chǎng)中交叉感染可能大量發(fā)生。裴偉士說(shuō)調(diào)查員們現(xiàn)在必須追蹤那些檢出了病毒的禽類(lèi)來(lái)自于哪個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)，經(jīng)手了哪些經(jīng)銷(xiāo)商，一路沿著供應(yīng)鏈檢測(cè)病毒。研究者知道H7亞型病毒主要感染例如野鴨、灰雁、鸛和鷺等涉禽以及海鷗等野鳥(niǎo)，偶爾也會(huì)感染養(yǎng)殖禽類(lèi)。H7N9的人感染病例緊鄰長(zhǎng)江三角洲。而長(zhǎng)江三角洲是多種野生鳥(niǎo)類(lèi)的棲息地。但還沒(méi)有人從長(zhǎng)三角的野鳥(niǎo)中檢測(cè)出H7N9病毒。無(wú)論H7N9病毒起源于哪里，更重要的問(wèn)題是它是否會(huì)在養(yǎng)殖禽類(lèi)中廣泛傳播開(kāi)來(lái)，使養(yǎng)殖禽類(lèi)成為該病毒的持久宿主，從而帶來(lái)偶爾出現(xiàn)卻揮之不去的人感染案例。H7N9的擴(kuò)散防控ZG的衛(wèi)生官員正在努力研究H7N9在養(yǎng)殖禽類(lèi)中的擴(kuò)散程度。位于羅馬的聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織緊急預(yù)防系統(tǒng)（跨界動(dòng)植物病蟲(chóng)害緊急預(yù)防系統(tǒng)）的代理秘書(shū)長(zhǎng)文森特馬?。╒incentMartin）表示和它的近親殺死了上百萬(wàn)計(jì)的鳥(niǎo)類(lèi)、在亞洲和其他地區(qū)共造成了幾百人的死亡的H5N1禽流感病毒不同，H7N9禽流感病毒并不會(huì)使鳥(niǎo)類(lèi)出現(xiàn)嚴(yán)重的疾病，這使控制H7N9病毒的難度大大增加了。用平常的監(jiān)控病禽的手段，從ZG的600萬(wàn)養(yǎng)殖禽類(lèi)中發(fā)現(xiàn)所有的H7N9病毒幾乎是不可能的?！斑@也就意味著完全阻斷人和動(dòng)物之間的傳染是沒(méi)有希望的。”世界衛(wèi)生組織位于東京的流感病毒研究所的病毒學(xué)家田代真人（MasatoTashiro）說(shuō)。尋找H7N9可能人際傳播的蛛絲馬跡每一次病毒遇見(jiàn)了新的人類(lèi)宿主，它就有了變異獲得人與人之間感染能力的新機(jī)會(huì)，不過(guò)還沒(méi)有證據(jù)顯示H7N9病毒已經(jīng)變異出了人間感染的能力。但是專(zhuān)家表示，確認(rèn)并跟蹤新發(fā)的可疑嚴(yán)重肺炎病例，以及他們的密切接觸者至關(guān)重要，在必要的情況下對(duì)他們進(jìn)行隔離。研究H7N9病毒的分子生物學(xué)家表示，H7N9的基因序列看起來(lái)是來(lái)自于至少3種禽流感病毒亞型的基因序列的重配。（更多關(guān)于H7N9病毒基因序列的信息請(qǐng)看：從基因角度分析H7N9病毒的來(lái)源和潛力資料匯總貼）H7N9病毒感染人的關(guān)鍵編碼病毒蛋白質(zhì)外殼上的血凝素的基因序列已經(jīng)擁有了變異，使病毒從易感染鳥(niǎo)類(lèi)細(xì)胞變成了易感染哺乳動(dòng)物細(xì)胞?？茖W(xué)家現(xiàn)在在尋找任何能夠指證病毒向更容易在人間傳播方向變異的蛛絲馬跡。因?yàn)榱鞲胁《咀儺惡芸欤员容^每一個(gè)人類(lèi)患者所感染的病毒序列可以揭示是否出現(xiàn)了H7N9人感染人的情況，英國(guó)愛(ài)丁堡大學(xué)的研究人類(lèi)致病病毒演化的專(zhuān)家安德魯蘭堡（AndrewRambaut）說(shuō)。如果出現(xiàn)了很多擁有極其類(lèi)似病毒基因序列的病人，那么這就暗示著出現(xiàn)了人與人的傳播;而如果病人們擁有的病毒基因序列之間有更多的不同，就暗示著每一個(gè)病人都是獨(dú)自從鳥(niǎo)類(lèi)處感染的。至今為止只有4名病人的H7N9病毒序列公布了，但病毒學(xué)家們正在測(cè)序更多的病例并把它們公布到共享禽流感數(shù)據(jù)組織的數(shù)據(jù)庫(kù)中。H7N9的Z壞可能性如果開(kāi)始出現(xiàn)了人與人的傳播，那么更大規(guī)模的H7N9的疫情可能無(wú)法避免，田代真人表示。在此之前，人類(lèi)從沒(méi)有大規(guī)模的遭遇過(guò)H7或N9這兩個(gè)流感病毒亞型，所以也缺乏相應(yīng)的抵抗能力。如果出現(xiàn)了大規(guī)模的流行，那么很有可能造成相當(dāng)數(shù)量的死亡。但現(xiàn)在預(yù)測(cè)接下來(lái)會(huì)發(fā)生什么還太早了，新發(fā)傳染病學(xué)的專(zhuān)家們才剛剛開(kāi)始了解H7N9這個(gè)新出現(xiàn)的壞蛋。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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