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使用單細胞 -ICP-MS 法定量癌癥細胞對金納米粒子的攝取率
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本文由 珀金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司 整理匯編
2019-03-19 16:11 1564閱讀次數(shù)
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癌癥指的是異常細胞不受控制地生長和擴散的一種疾病。根據(jù)美國癌癥協(xié)會的數(shù)據(jù),癌癥在美國Z常見的死亡原因中排名第二。目前ZL癌癥的方法包括手術、放射療法、免疫療法、化學療法等。盡管這些傳統(tǒng)ZL方法可能會提高患者的總體存活率和生活質量,但其還存在一些局限性。例如,在傳統(tǒng)癌癥化療中,小分子癌癥療法以非特異性的方式將小分子藥物分散至整個人體內。結果是,這些藥物不僅殺死了癌細胞,還破壞了機體的健康細胞,給癌癥患者帶來嚴重的副作用,因此迫切需要能夠針對病變細胞的新療法。
納米粒子(NP)在過去的20年里引起了極大的關注,原因在于,其為藥物遞送提供了具有吸引力的優(yōu)勢,從而解決了傳統(tǒng)化療的局限性??蓪⒓{米粒子設計為同時攜帶藥物和成像探針的模式,以便同時檢測和ZL癌癥。還可將其設計為專門針對機體病變組織和細胞的模式。很多基于納米粒子的癌癥療法已獲準在臨床上使用和 / 或目前正在開發(fā)中。與傳統(tǒng)小分子藥物相比,合理設計的納米粒子具備以下優(yōu)勢的可行性:(i)延長體內循環(huán)時間;(ii)減少非特異性細胞攝取、意外偏離目標和副作用;以及(iii)通過特定癌細胞靶向部分來提高細胞相互作用。
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使用單細胞 -ICP-MS 法定量癌癥細胞對金納米粒子的攝取率
- 癌癥指的是異常細胞不受控制地生長和擴散的一種疾病。根據(jù)美國癌癥協(xié)會的數(shù)據(jù),癌癥在美國Z常見的死亡原因中排名第二。目前ZL癌癥的方法包括手術、放射療法、免疫療法、化學療法等。盡管這些傳統(tǒng)ZL方法可能會提高患者的總體存活率和生活質量,但其還存在一些局限性。例如,在傳統(tǒng)癌癥化療中,小分子癌癥療法以非特異性的方式將小分子藥物分散至整個人體內。結果是,這些藥物不僅殺死了癌細胞,還破壞了機體的健康細胞,給癌癥患者帶來嚴重的副作用,因此迫切需要能夠針對病變細胞的新療法。
納米粒子(NP)在過去的20年里引起了極大的關注,原因在于,其為藥物遞送提供了具有吸引力的優(yōu)勢,從而解決了傳統(tǒng)化療的局限性。可將納米粒子設計為同時攜帶藥物和成像探針的模式,以便同時檢測和ZL癌癥。還可將其設計為專門針對機體病變組織和細胞的模式。很多基于納米粒子的癌癥療法已獲準在臨床上使用和 / 或目前正在開發(fā)中。與傳統(tǒng)小分子藥物相比,合理設計的納米粒子具備以下優(yōu)勢的可行性:(i)延長體內循環(huán)時間;(ii)減少非特異性細胞攝取、意外偏離目標和副作用;以及(iii)通過特定癌細胞靶向部分來提高細胞相互作用。[詳細]
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2019-03-19 16:11
應用文章
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單細胞ICP-MS 監(jiān)測淡水藻類對金納米顆粒的攝入行為
- 對于人類健康和環(huán)境安全來說,監(jiān)測單細胞對于金屬離子和納米顆粒(NPs)的攝入都是非常重要的。目前,利用ICP-MS對于細胞內金屬含量的常規(guī)測定方法為:通過離心或過濾將細胞從其天然培養(yǎng)介質中分離出來,再用新鮮介質進行清洗,然后用酸消解后上機檢測。采用這種方法可以得到一定數(shù)量細胞中金屬的總量,而無法獲得單個細胞的相關數(shù)據(jù),單個細胞內金屬的含量只能通過假定所有細胞內含有的金屬顆粒或離子濃度相同,通過計算獲得。而通過透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)或熒光示蹤法的輔助表征,證明利用這種方法獲得的單細胞數(shù)據(jù)并不準確。如果利用上述顯微方法對細胞攝入納米顆粒進行表征,又存在耗時長、人為誤差大的缺點。而且,TEM和SEM法只能定性,也容易由于納米顆粒標示物化學性質不穩(wěn)定而導致假陽性結果。相比于這些常規(guī)方法,全新的基于單顆粒ICP-MS(SP-ICP-MS)的單細胞ICP-MS(SC-ICP-MS)具有可以極ng確地對單個細胞中金屬離子或納米顆粒進行定量的優(yōu)勢,一次性檢測的細胞數(shù)量也大于顯微鏡方法。與SP-ICP-MS類似,SC-ICP-MS是基于利用等離子體將單個細胞完全離子化后對離子含量進行測定來獲得結果的。SC-ICP-MS的優(yōu)勢在于可以在更短的時間內分析更多的細胞數(shù)量;具有快速的數(shù)據(jù)采集速率,低于100μs的駐留時間保證數(shù)據(jù)具有更高的精密度。NexIONICP-MS獨特的單細胞檢測能力可用于研究細胞內部在其自然環(huán)境中固有的金屬含量和對于金屬的攝入行為,從而對生物曝露風險進行研究和評估。本文介紹了利用SC-ICP-MS技術監(jiān)測單個淡水藻類(Cyptomonasovata)對金離子和納米顆粒的攝入行為。[詳細]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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單細胞ICP-MS技術對細胞水平的金屬元素定量分析
- 單細胞ICP-MS技術對細胞水平的金屬元素定量分析[詳細]
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2024-09-17 01:53
應用文章
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金的納米粒子粒度分析
- 金的納米粒子粒度分析[詳細]
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2024-09-18 06:45
安裝說明
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ICP-MS單細胞分析方法介紹
- ICP-MS單顆粒分析技術(SP-ICP-MS)的出現(xiàn)和發(fā)展使得不同基體和應用中的金屬顆粒的快速檢測和分析成為可能,并因此開創(chuàng)了一個全新的研究領域。SP-ICP-MS的特點是可以檢測到帶正電荷的離子產(chǎn)生的不連續(xù)的脈沖,并以微秒記的數(shù)據(jù)采集速率獲得時間分辨信號。這種先進的數(shù)據(jù)采集能力使得開辟一系列新的研究領域成為可能。本文將SP-ICP-MS應用于SC-ICP-MS,介紹了ICP-MS單細胞分析技術(SC-ICP-MS),該技術可快速分析單個細胞中的金屬含量。通過在細胞水平上監(jiān)測細胞吸收順鉑的能力,我們探究了藥物的有效性,加強了對細胞與含金屬的物質之間交互作用的了解。SC-ICP-MS可以讓用戶檢測單個細胞中本身含有的金屬量以及離子或者納米顆粒污染物,此方法可以減少實驗中使用的細胞數(shù)量,并且無需復雜的樣品前處理過程。[詳細]
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2024-09-29 09:32
產(chǎn)品樣冊
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AN # 140使用MP-SPR測量自組裝金納米粒子
- AN # 140使用MP-SPR測量自組裝金納米粒子[詳細]
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2016-09-06 00:00
期刊論文
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使用SPR顯微鏡定量抗體與單細胞膜蛋白的結合
- 單克隆抗體(mAb)療法已成為治療癌癥、自身免疫性疾病、哮喘和許多其他疾病的既定方法。單克隆抗體藥物約占所有生物制藥產(chǎn)品總銷售額的一半,其中超過60%靶向細胞表面的膜蛋白。然而,定量單細胞上的mAb-膜蛋白結合親和力一直是一項艱巨的任務。傳統(tǒng)的SPR通過將純化的蛋白質固定在傳感器表面上來測量蛋白質結合動力學。這種方法對于膜蛋白來說是有問題的,因為它們很難從細胞膜環(huán)境中提取,并且很難在脂質環(huán)境之外保持其天然構象完好無損。而SPRm 200是一種新的無標記技術,可以測量抗體與細胞膜蛋白的結合,無需從細胞膜中提取蛋白質。它還將SPR與高分辨率光學顯微鏡相結合,以分離和研究單個細胞。
[詳細]
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2024-09-21 14:06
應用文章
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QCM-D對納米粒子的研究
- QCM-D對納米粒子的研究[詳細]
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2024-09-24 01:48
其它
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采用ICP-MS對營養(yǎng)補充劑中銀納米粒子單粒子的特性研究
- 使用珀金埃爾默NexION350ICP-MS上的Syngistix納米應用模塊以及超快速數(shù)據(jù)采集電子器件,對市售的3中營養(yǎng)補充劑中的納米銀顆粒進行了測定。單粒子的ICP-MS能實現(xiàn)分析物的溶解離子和顆粒形式之間的分離和定量。在一次分析中,顆粒成分,濃度,尺寸和尺寸分布,均可直接進行測定。SP-ICP-MS技術的使用已經(jīng)擴展到其它元素-以及未來的消費產(chǎn)品-再進入視頻分析,生物流體和環(huán)境中納米顆粒機遇的研究。[詳細]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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ICP-MS 系統(tǒng)專用Syngistix 單細胞應用軟件模塊
- 在評估細胞對藥物、環(huán)境污染物、營養(yǎng)物質和/或納米粒子的攝入行為時,檢測單細胞中的金屬元素可以為了解細胞機理提供一種全新有效的方法。傳統(tǒng)的做法是溶解大量的細胞,假定細胞群中的每一個細胞包含等量的金屬,從而量化細胞中的金屬含量,或者利用光學或電子顯微鏡為細胞中的金屬成分定性。這些方法不僅耗費時間,而且只能表征細胞群中的一小部分細胞。珀金埃爾默公司的技術人員將實際檢測數(shù)據(jù)和數(shù)學模擬相結合,開發(fā)出了一套ZL的單細胞進樣系統(tǒng)和專用軟件Syngistix細胞應用軟件模塊。該應用軟件模塊是實驗室分析細胞金屬含量的理想工具,包括分析細胞的金屬攝入行為(金屬離子或納米顆粒)以及測量細胞的內在金屬含量。這款獨特的應用模塊可以區(qū)分同一種待測元素在細胞外部和細胞內部的含量,并對其進行量化。我們無需進行后續(xù)數(shù)據(jù)處理就可以在單次分析中測定下列信息:每個細胞中金屬的含量、細胞群落中的金屬含量分布、含金屬或納米顆粒的細胞濃度和每個細胞的納米顆粒數(shù)量。配合NexION系列ICP-MS儀器,Syngistix單細胞應用軟件模塊是世界上**款單細胞ICP-MS專用分析軟件,在速度、功能、自動化和易用性等方面均首屈yi指。[詳細]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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使用 Agilent 7900 ICP-MS 在 scICP-MS 模式下進行單細胞分析
- 擴展對金屬在細胞生物學中的作用的了解是一個新興的研究領域。許多元素對細胞 健康至關重要,元素不平衡、缺乏或過量可能會破壞自然細胞過程。用于測量細胞 中金屬的傳統(tǒng)整體性分析方法依賴于樣品溶解、提取或消解,然后利用原子光譜進 行分析。這些樣品前處理步驟破壞了細胞結構,因此報告的金屬濃度結果為數(shù)千個 細胞的平均值。 在單細胞 ICP-MS (scICP-MS) 中,樣品溶液中包含的完整細胞被霧化,各個細胞懸 浮在氣溶膠液滴中。使用與通過 ICP-MS (spICP-MS) 進行單納米顆粒分析的成熟方 法類似的方法將各個細胞引入等離子體中。[詳細]
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2020-05-08 14:19
應用文章
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單顆粒ICP-MS評價地表水中銀納米粒子的歸宿
- 過去二十年中,隨著工程納米材料(ENMs)產(chǎn)量和使用量迅速增加,它們向環(huán)境中釋放帶來了潛在危害。因此,研究他們對環(huán)境影響至關重要。對環(huán)境中工程納米材料進行合適的生態(tài)危害評價和管理,需要對工程納米材料準確定量暴露和影響1,Z理想方式通過原位分析并給出物理化學特性。然而,由于環(huán)境介質中納米粒子濃度非常低,大多數(shù)分析技術并非適合2。Z近出版了關于自然新鮮水和合成復雜水樣中金屬納米粒子的持久性、聚合和溶解性的研究3-7。一直以來,顆粒尺寸采用色散光散射(DLS)和透射電子顯微鏡(TEM)測量顆粒尺寸,而溶解量采用超濾測定。這些常規(guī)技術對測定復雜水體中存在低濃度的膠體形態(tài)非常有限。另外,單顆粒ICP-MS(SP-ICP-MS)被公認為一種定量和定性低濃度的金屬納米粒子Z有前途的方法8-10。相對目前方法,SP-ICP-MS可快速有效并提供更多信息的技術。它能夠測定顆粒尺寸分布、顆粒數(shù)量濃度、溶解金屬比例等。而且,它能夠區(qū)分不同元素粒子。SP-ICP-MS原理基于測量一個單粒子產(chǎn)生的信號強度。懸浮納米粒子必須有效稀釋,以確保一次只有一個單顆粒到達等離子體中,然后被原子化和離子化,產(chǎn)生相對高信號強度,在一個脈沖中被檢測出。如果在顆粒懸浮物包含相同可溶性的元素,該元素將產(chǎn)生一個連續(xù)不變信號,形成均一分布的結果。Duegeldre11-15S次采用理論方法處理了自然金屬膠體的信號強度與時間關系記錄圖,隨后Laborda等16,17支持了該方法。本工作使用珀金埃爾默NexION350XICP-MS和納米應用SyngistixTM模塊軟件測定和定性環(huán)境水體中金屬納米粒子。[詳細]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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流動合成系統(tǒng)成功用于金納米粒子的合成
- 流動合成系統(tǒng)成功用于金納米粒子的合成[詳細]
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2024-09-21 00:31
標準
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采用單顆粒ICP-MS評價地表水中銀納米粒子的歸宿
- 采用Syngisitx納米應用模塊研究地表水中銀納米顆粒的行為,無需使用任何手工數(shù)據(jù)處理過程。該技術允許有效選擇性測定顆粒尺寸,團聚和一定時間內溶解低濃度范圍。SP-ICP-MS可提供環(huán)境水體中低濃度的金屬納米顆粒歸宿信息的**合適的技術。盡管這項研究只代表在特定情況下河水中納米銀顆粒測定技術的有效性,毫無疑問,也可應用于各種復雜基體中其它類型金屬和金屬氧化物納米粒子。[詳細]
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2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞NADPH氧化酶活性化學發(fā)光法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞NADPH氧化酶活性化學發(fā)光法定量檢測試劑是一種旨在使用化學發(fā)光分子光澤精受到NADPH氧化酶催化產(chǎn)生的超氧陰離子O2-的還原,然后在其還原過程中釋放能量,由此測定樣品中特異性氧化還原酶(oxidoreductase)的活性,即采用發(fā)光探測儀(Luminometer)測定其相對冷光單位(RLU)的變化,以此進行測算酶活性的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞樣品(動物或人體)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)的特異活性檢測。用于免疫、血液研究、蛋白組學、病理生理學等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應優(yōu)化,檢測敏感。技術背景NADPH氧化酶,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphateoxidase;NADPHoxidase;EC1.6.3.1)或還原型輔酶II氧化酶,是機體防御機制中的重要元素。NADPH氧化酶由6個亞體構成:RhoGTP酶(Rhoguanosinetriphosphatase)和5個phox(吞噬細胞氧化酶;phagocyticoxidase)。其中主要包含細胞膜嵌合蛋白質分子(gp91phox、p22phox、flavocytochromeb558等),以及位在細胞質內的蛋白質分子(p47phox、p67phox、p40phox、Rac1、Rac2等)。其Z特征性的酶活性是超氧化物歧化酶敏感的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶。細胞膜上的NADPH氧化酶被激活,將還原型輔酶Ⅱ(NADPH)轉變?yōu)檠趸洼o酶Ⅱ(NADP),氧分子則獲得電子形成超氧陰離子O2-,由O2-又可生成H2O2和OH-。其超氧陰離子產(chǎn)物具有殺死微生物的功能。NADPH氧化酶異常將導致慢性肉芽腫病(ChronicGranulomatousDisease;CGD)?;诘孜颪ADPH,受到NADPH氧化酶的催化作用,產(chǎn)生超氧陰離子O2-,進而超氧陰離子將化學發(fā)光分子光澤精(lucigenin)還原,并釋放能量,通過發(fā)光探測儀(Luminometer;470nm波長)檢測,來測定NADPH氧化酶的活性。其反應方式為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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使用定量發(fā)光試驗檢測病毒誘導的細胞病變效應
- 使用定量發(fā)光試驗檢測病毒誘導的細胞病變效應[詳細]
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2024-09-16 12:23
應用文章
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使用MM301對酵母細胞的低溫破碎
- 使用MM301對酵母細胞的低溫破碎[詳細]
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2024-09-29 00:11
產(chǎn)品樣冊
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細胞CDK2/CYCLIN A激酶活性熒光共振能量轉移法定量
- 主要用途細胞CDK2/CYCLINA激酶活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量檢測試劑是一種旨在通過熒光探針EDANS供體和DABCYL受體雙重標記的多肽底物,在CDK2/CYCLINEYZ劑的存在下,受到CDK2/CYCLINA的磷酸化后,不能被位點特異性氨基肽酶切離,而發(fā)生熒光峰值的降低,即采用熒光共振能量轉移法來測定樣品中酶活性的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或完全純化酶樣品中CDK2/CYCLINA激酶的特異活性定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,安全可靠。技術背景細胞周期素依賴性激酶2(cyclindependentkinase2;CDK2;EC2.7.11.22),又稱為細胞分裂周期蛋白1(celldivisioncycle1;CDC1)或p33,屬于絲氨酸/蘇氨酸激酶(serine/threonineproteinkinase)家屬成員之一。其與酵母細胞的cdc28和cdc2高度進化保留。細胞周期素依賴性激酶2的催化亞體,與細胞周期素E然后A結合,允許細胞由G1期進入DNA合成期,達到調節(jié)細胞生長、DNA復制、細胞分裂等。p21Cip1(CDKN1A)andp27Kip1(CDKN1B)是CDK2激酶的YZ劑。CDK2/CYCLINA激酶的磷酸化目標序列為HHASPRK。基于磷酸化多肽具有抗氨基肽酶切離的功能,通過熒光共振能量轉移法(Fluorescenceresonanceenergytransfer;FRET),即傳遞激發(fā)狀態(tài)的能量由處于較短波長的供體(donor)到覆蓋供體波長的受體(acceptor),使得距離依賴性反應的供體的散發(fā)光子淬滅(quench),使用2個熒光探針EDANS供體和DABCYL受體作為FRET對,來標記的CDK2多肽底物的兩端,在氨基肽酶(aminopeptidase)的作用下,釋放出強烈熒光的EDANS;一旦在CDK2/CYCLINEYZ劑二氨基吡唑-1氫4-基偶氮酚【4-(3,5-diamino-1H-pyrazol-4-ylazo)-phenol】的存在下,底物受到CDK2/CYCLINA的磷酸化(由ATP的γ-磷酸根到多肽上單一絲氨酸殘基分子上),底物將不能被位點特異性氨基肽酶切離,而無法釋放出EDANS,由此根據(jù)產(chǎn)物熒光強度(激發(fā)波長340nm,散發(fā)波長490nm)的降低,來定量測定細胞周期素依賴性激酶2/細胞周期素A的特異活性。CDK2/CYCLINA反應系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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火試金法的基本原理
- 火試金法的基本原理[詳細]
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2024-09-19 23:59
課件
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使用 Agilent 7800 ICP-MS 對強化食品進行常規(guī)分析
- 利用 Agilent 7800 ICP-MS 對通過微波消解制得的九種強化食品樣品中的 28 種元素進行分析。使用儀器的標準化氦氣碰撞模式和自動調諧功能,可簡化方法開發(fā)。7800 系統(tǒng)的高靈敏度和高達 10 個數(shù)量級的分析動態(tài)范圍使常量礦物元素(如Na、K、Ca、Mg)和痕量元素(包括 Cr、As、Cd、Pb、Hg)能夠在同一次分析運行中得到測定。通過分析營養(yǎng)配方食品 SRM 中的 13 種營養(yǎng)元素,并對三種嬰兒配方食品樣品中的 7 種污染物元素進行加標回收率測試,對該方法的準確度進行評估。在所有情況下均獲得了優(yōu)異的回收率。7800 ICP-MS 在六小時運行過程中表現(xiàn)出優(yōu)異的穩(wěn)定性,并超出了ZG標準方法中規(guī)定的檢測限要求。7800 ICP-MS 方法適用于對食品中的痕量元素和高濃度礦物元素進行常規(guī)的多元素篩查,確保實現(xiàn)對營養(yǎng)元素以及污染物的質量控制。
[詳細]
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2024-09-27 07:39
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