資料庫
96T人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA 檢測試劑盒使用的實驗方案
-
本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2018-09-27 10:00 647閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。試驗原理: NF-κB試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NF-κB濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將NF-κB和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NF-κB的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的NF-κB標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的NF-κB含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-8.0umol/L4、敏感度:0.01umol/LHSL/LIPE(hormone-sensitivelipase)荷爾蒙敏感脂肪酶抗體0.2mlHrasls3/HREV107(HRASlikesuppressor3)HRAS樣YZ因子3抗體0.2mlHSP-20(HeatShockProtein20)熱休克蛋白-20抗體0.1mlGoatanti-RabbitIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗兔IgG0.3mlGoatanti-mouseIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗小鼠IgG0.3mlHSP-20(HeatShockProtein20)熱休克蛋白-20抗體0.2mlHSP-27(HeatShockProtein27)熱休克蛋白-27抗體0.1mlHSP-27(HeatShockProtein27)熱休克蛋白-27抗體0.2mlHSP-60(Heatshockprotein-60)熱休克蛋白-60抗體0.1mlHSP-60(Heatshockprotein-60)熱休克蛋白-60抗體0.2mlHSP47(Heatshockprotein-47)熱休克蛋白-47抗體0.2mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)0.5mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)1mlRabbitanti-chickenIgM/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgM(10nm/15nm)2mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.1mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.2mlHSP75/TRAP-1(HeatShockProtein75)熱休克蛋白-75抗體0.2mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.1mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.1mlRabbitanti-dogIgG/Gold金標(biāo)記兔抗狗IgG(10nm/15nm)2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.2ml若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯(lián)動
更多資料
-
96T人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA 檢測試劑盒使用的實驗方案
- 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。試驗原理: NF-κB試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NF-κB濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將NF-κB和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NF-κB的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人核轉(zhuǎn)錄因子ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的NF-κB標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的NF-κB含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-8.0umol/L4、敏感度:0.01umol/LHSL/LIPE(hormone-sensitivelipase)荷爾蒙敏感脂肪酶抗體0.2mlHrasls3/HREV107(HRASlikesuppressor3)HRAS樣YZ因子3抗體0.2mlHSP-20(HeatShockProtein20)熱休克蛋白-20抗體0.1mlGoatanti-RabbitIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗兔IgG0.3mlGoatanti-mouseIgG/RBITC羅丹明標(biāo)記羊抗小鼠IgG0.3mlHSP-20(HeatShockProtein20)熱休克蛋白-20抗體0.2mlHSP-27(HeatShockProtein27)熱休克蛋白-27抗體0.1mlHSP-27(HeatShockProtein27)熱休克蛋白-27抗體0.2mlHSP-60(Heatshockprotein-60)熱休克蛋白-60抗體0.1mlHSP-60(Heatshockprotein-60)熱休克蛋白-60抗體0.2mlHSP47(Heatshockprotein-47)熱休克蛋白-47抗體0.2mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)0.5mlRabbitanti-chickenIgG/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgG(10nm/15nm)1mlRabbitanti-chickenIgM/Gold金標(biāo)記兔抗雞IgM(10nm/15nm)2mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.1mlHSP-70(Heatshockprotein-70)熱休克蛋白-70抗體0.2mlHSP75/TRAP-1(HeatShockProtein75)熱休克蛋白-75抗體0.2mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.1mlHSP-90α(HeatShockProtein90α)熱休克蛋白90α抗體0.2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.1mlRabbitanti-dogIgG/Gold金標(biāo)記兔抗狗IgG(10nm/15nm)2mlHSP-90β(heatsockprotein-90β)熱休克蛋白-90β抗體0.2ml若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人NF-kB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NF-kB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人NF-kB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NF-kB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NF-kB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本NF-kB的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NF-kB含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NF-kB檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人NF-kB。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
96T人白細(xì)胞介素-6ELISA 檢測試劑盒使用的實驗方案
- 人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然原裝生物試劑有限公司專業(yè)供應(yīng)葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細(xì)胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。試驗原理: IL-6試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-6濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將IL-6和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-6的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人白細(xì)胞介素-6ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-6標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-6含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人核轉(zhuǎn)錄因子p65(NF-p65)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人核轉(zhuǎn)錄因子p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人NF-kBp65單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NF-kBp65與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人NF-kBp65,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NF-kBp65濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NF-kBp65濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本NF-kBp65的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NF-kBp65含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NF-kBp65檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人NF-kBp65。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠核轉(zhuǎn)錄因子(NF-)ELISA試劑盒
- 大鼠核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠NF-kB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NF-kB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠NF-kB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NF-kB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NF-kB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本NF-kB的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NF-kB含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NF-kB檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠NF-kB。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽elisa試劑盒實驗原理
- 實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)水平。用純化的人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65),再與HRP標(biāo)記的核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和(NF-κBp65)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(4800ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細(xì)]
-
2024-10-02 03:28
產(chǎn)品樣冊
-
人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)試劑盒產(chǎn)品供應(yīng)
- 人核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)試劑盒產(chǎn)品供應(yīng)[詳細(xì)]
-
2015-04-23 00:00
報價單
-
大鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(NF-p65)ELISA試劑盒
- 大鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠NF-kBp65單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NF-kBp65與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠NF-kBp65,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NF-kBp65濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NF-kBp65濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本NF-kBp65的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NF-kBp65含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NF-kBp65檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠NF-kBp65。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)ELISA試劑盒使用說明書
- 南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量保證,價格優(yōu)惠,試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)水平。用純化的大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB),再與HRP標(biāo)記的核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)的含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:1350ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍濃縮洗滌液20ml×1瓶20ml×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為900ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L,75ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:50ng/L-1000ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
-
2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
-
96T人巨噬細(xì)胞移動YZ因子ELISA檢測試劑盒
- 人巨噬細(xì)胞移動YZ因子ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗原理: MIF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知MIF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將MIF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MIF的濃度呈比例關(guān)系?!∽詡洳牧险麴s水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人巨噬細(xì)胞移動YZ因子ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人巨噬細(xì)胞移動YZ因子ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人巨噬細(xì)胞移動YZ因子ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的MIF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的MIF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlPhospho-p56Dok2(Tyr351)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1mlPhospho-p56Dok2(Tyr299)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1mlPhospho-EEF2(Thr56)磷酸化真核翻譯延長因子2抗體0.1mlPhospho-EEF2k(Ser366)磷酸化真核延伸因子激酶2抗體0.1mlEpCAM/CD326(Epithelialcelladhesionmolecule)molecule)上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗體0.2mlE.coliO6(EscherichiacoliO6;EPECO6)抗大腸埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)0.2mlE.coliO6(EscherichiacoliO6;EPECO6)抗大腸埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)1.0mlE.coliDH-5α(EscherichiacoliDH-5α)抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體0.2mlE.coliDH-5α(EscherichiacoliDH-5α)抗DH6α大腸桿菌菌體蛋白抗體1.0mlE.coliO157;H7(EscherichiacoliO157:H7)抗大腸埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸埃希氏菌0.2mlE.coliO157;H7(EscherichiacoliO157:H7)抗大腸埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸埃希氏菌1.0mlEPEC/E.coli(enteropathogenicE.coli,EPEC)抗腸致病性大腸桿菌抗體0.2mlPhospho-EGFR(Thr669)磷酸化表皮生長因子受體抗體0.1mlE.coli/EPEC(enteropathogenicE.coli)抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體0.2mlE.coli/EPEC(enteropathogenicE.coli)抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體1.0mlE.coliO139(EscherichiacoliO139)抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)0.2mlE.coliO139(EscherichiacoliO139)抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)1.0mlEP3(ProstaglandinEreceptor3)前列腺素E受體3抗體0.2mlEphA1R(EphrinA1Receptor)抗EphA1-R受體抗體0.2mlEphA2R(EphrinA2Receptor)兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體0.1mlPhospho-EGFR(Tyr1086)磷酸化表皮生長因子受體抗體0.1mlEphA4(Eph-relatedreceptortyrosinekinaseligand7)抗酪氨酸蛋白激酶A5抗體0.2mlEphA2R(EphrinA2Receptor)兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體0.2ml[詳細(xì)]
-
2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人PPARα轉(zhuǎn)錄因子 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T7ng/L-250ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PPARα轉(zhuǎn)錄因子含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人PPARα轉(zhuǎn)錄因子水平。用純化的人PPARα轉(zhuǎn)錄因子抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入PPARα轉(zhuǎn)錄因子,再與HRP標(biāo)記的PPARα轉(zhuǎn)錄因子抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PPARα轉(zhuǎn)錄因子呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人PPARα轉(zhuǎn)錄因子濃度。[詳細(xì)]
-
2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
96T人D-二聚體ELISA 檢測試劑盒實驗原理
- 人D-二聚體ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:D-Dimer試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知D-Dimer濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將D-Dimer和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中D-Dimer的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。人D-二聚體ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人D-二聚體ELISA檢測試劑盒局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的D-Dimer標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的D-Dimer含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400ug/L4、敏感度:1.0ug/L人D-二聚體ELISA檢測試劑盒DA1036-0.2mlACEI(AngiotensinIConvertingEnzymeInhibitor)血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶YZ劑抗體0.2mlDA1037-0.2mlACD/PTOP(Adrenocorticaldysplasiaprotein)腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體0.2mlDA1038-0.2mlAchE(Acetylcholinesterase)乙酰膽堿酶抗體0.2mlDA1039-0.2mlAcinus(ApoptoticchromatincondensationInducerinthenucleus)腺泡Acinus抗體0.2mlDAP1021-1mlphospho-p38(pThr180/pTyr182)antibody1mlDAP1023-1mlphospho-p53(pSer392)antibody抗磷酸化腫瘤YZ基因P53抗體1mlDAP1027-1mlphospho-STAT6(pTyr641)antibody抗磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體1mlDA1040-0.1mlCK19/CYFRa21-1(Cytokeratin19)細(xì)胞角蛋白19抗體0.1mlDA061-0.5mlhumanβ-actinpolyclonalantibody/HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人β-actin多抗0.5mlDA1040-0.2mlCK19/CYFRa21-1(Cytokeratin19)細(xì)胞角蛋白19抗體0.2mlDA1041-0.2mlAck1抗體0.2mlDA1041-1mlAck1抗體1ml[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 ELISA檢測試劑盒
- 豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 ELISA檢測試劑盒[詳細(xì)]
-
2015-05-07 00:00
課件
-
豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 ELISA檢測試劑盒
- 豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 ELISA檢測試劑盒[詳細(xì)]
-
2015-04-22 00:00
實驗操作
-
96T人NA+/H+交換體3ELISA 檢測試劑盒的實驗方案
- 人NA+/H+交換體3ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗原理:NHE3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NHE3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將NHE3和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NHE3的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。人NA+/H+交換體3ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人NA+/H+交換體3ELISA檢測試劑盒局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的NHE3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的NHE3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400pmol/L4、敏感度:1.0pmol/L人NA+/H+交換體3ELISA檢測試劑盒DAP1024-1mlphospho-PAK1/2/3(pSer141)antibody抗磷酸化p21激活激酶1/2/3(pSer141)抗體1mlDAP1025-1mlphospho-PAK1/2/3(pThr423)antibody抗磷酸化p21激活激酶1/2/3(pThr423)抗體1mlDAP1026-1mlphospho-PKB(pSer473)antibody抗磷酸化蛋白激酶B抗體1mlDA1156-0.2mlphospho-AR(pSer580)(androgenreceptorphospho-Ser580)磷酸化雄激素受體抗體0.2mlDA1157-0.2mlAKR1B1/ADR(aldosereductase)醛糖還原酶抗體0.2mlDA1158-0.2mlARC(ARG3.1Activity-regulatedcytoskeleton-associatedprotein)ARC抗體0.2mlDA048-100Thumanβ-actinpolyclonalantibody/FITC熒光素FITC標(biāo)記的抗人β-actin多抗100TDA030-100ThumanCD3Monoclonalantibody/FITC熒光素FITC標(biāo)記的抗人CD3單抗100TDA1159-0.2mlARF6(ADP-ribosylationfactor6)ADP核糖基化因子6抗體0.2mlDA1160-0.2mlArfaptin1(ADP-ribosylationfactorinteractingprotein1)ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗體0.2ml[詳細(xì)]
-
2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒操作步驟
- 人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒操作步驟使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)水平。用純化的人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65),再與HRP標(biāo)記的核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人核轉(zhuǎn)錄因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)濃度。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
-
2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人轉(zhuǎn)錄因子TBX3(TBX3)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人轉(zhuǎn)錄因子TBX3(TBX3)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人TBX3單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的TBX3與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人TBX3,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,TBX3濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TBX3濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)TBX3含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的TBX3檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人TBX3。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
人轉(zhuǎn)錄因子E2F1(E2F1)ELISA試劑盒說明書
- 人轉(zhuǎn)錄因子E2F1(E2F1)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人E2F1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的E2F1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人E2F1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,E2F1濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中E2F1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本E2F1的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)E2F1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的E2F1檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人E2F1。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
人轉(zhuǎn)錄因子AP-1(AP-1)ELISA試劑盒說明書
- 人轉(zhuǎn)錄因子AP-1(AP-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人AP-1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的AP-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人AP-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,AP-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中AP-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)AP-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的AP-1檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人AP-1。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
-
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
-
48T人內(nèi)脂素ELISA 檢測試劑盒使用的實驗方案
- 人內(nèi)脂素ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿上海信然生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)elisa試劑,金標(biāo)試劑,放免試劑盒,科研抗體,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換試驗原理: Visfatin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Visfatin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將Visfatin和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Visfatin的濃度呈比例關(guān)系?!“踩员苊庵苯咏佑|終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人內(nèi)脂素ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人內(nèi)脂素ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人內(nèi)脂素ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Visfatin標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的Visfatin含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-40ng/ml4、敏感度:0.1ng/mlF1operonpositiveregulatoryprotein(NT)鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)0.2mlF1operonpositiveregulatoryprotein(CT)鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)0.2mlphospho-B-Raf(Ser365)磷酸化B-Raf抗體0.1mlphospho-B-Raf(Ser445)磷酸化B-Raf抗體0.1mlphospho-B-Raf(Ser601)磷酸化B-Raf抗體0.1mlPhospho-BAP1(Ser592)磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)0.1mlFabp2(fattyacidbindingprotein2,intestinal)脂肪酸結(jié)合蛋白2抗體0.2mlFABP(brain)(Fattyacid-bindingproteinbrain)CT腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端)0.2mlFABPB(Fattyacid-bindingproteinbrain)腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體0.2mlfactorV(Vcoagulationfactor)凝血因子5抗體0.2mlfactorVIII(FVIII)第八因子相關(guān)抗原抗體0.1mlPhospho-Btk(Ser180)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體0.1mlPhospho-Btk(Tyr223)磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體0.1mlPhospho-TroponinI(Ser23/24)磷酸化鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體0.1mlphospho-CaMK2alpha(Thr286)磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體0.1mlPhospho-Cas(Tyr165)磷酸化細(xì)胞凋亡敏感性基因0.1mlfactorVIII(FVIII)第八因子相關(guān)抗原抗體0.2mlfactorⅩⅢ(coagulationfactorⅩⅢ)凝血因子13抗體0.2mlFADD/DAXX(Fas-associatedproteinwithdeathdomain)Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白0.2mlphospho-FADD(pSer194)抗磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體0.2mlFAK(Focaladhesinkinase)粘著斑激酶抗體0.1ml若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來電咨詢:聯(lián)系人:張經(jīng)理電話:021-60514052,021-60514051,61845661傳真:021-61845661手機:18939846276,13482524164[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進行復(fù)制
參與評論
登錄后參與評論