本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編

2018-09-29 10:02 457閱讀次數(shù)

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• Fluoro AChE檢測試劑盒

  貨號品名規(guī)格2017年價格AChE100-2FluoroAChE-100tests100Tests7225產(chǎn)品描述：保存溫度：2-8度主要優(yōu)點：無需放射性物質(zhì)。應(yīng)用-流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡。檢測細(xì)胞水平的細(xì)胞溶解活性。適用于多種類型的哺乳動物細(xì)胞系。技術(shù)測量CMC/ADCCZ常用的方法是放射性鉻-51（51Cr）釋放試驗（2）。該測定有幾個缺點：昂貴的，難以加載某些細(xì)胞類型，由于嚴(yán)格的環(huán)境規(guī)定而處置昂貴，并且具有51Cr自發(fā)釋放的高背景。使用流式細(xì)胞儀，現(xiàn)在可以消除對放射性物質(zhì)的需要，并增加在單個細(xì)胞基底上定量細(xì)胞溶解活性的能力。各組已經(jīng)證明通過流式細(xì)胞術(shù)測量CMC/ADCC活性與傳統(tǒng)的51Cr釋放測定（3,4,5,6）具有強烈（95％）的相關(guān)性。測定原理細(xì)胞跟蹤染料CFSE（7,8,9）用于標(biāo)記靶細(xì)胞群體。在測定完成實驗方案后，加入7AAD（活/死）（10,11）以測量細(xì)胞死亡。7AAD僅進(jìn)入膜受損細(xì)胞并與DNA結(jié)合。流式細(xì)胞術(shù)用于門靶細(xì)胞并測量7AAD陰性對7AAD后細(xì)胞。％細(xì)胞毒性通過以下等式計算（參見下面的實驗例）：7AAD正（右上象限）=R1/7AADPostitve（右上象限）=R1+7AAD負(fù)（右下象限）=R2×100ACT1為了測試豬gd淋巴細(xì)胞的自然殺傷能力，將K562細(xì)胞染色并調(diào)整至含有10％FBS的1×104個細(xì)胞/100μlPRMI的終濃度。以25:1,50:1和100:1的E/T比加入gd淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)至400μlRPMI的總體積，然后在37℃，無菌封蓋的面管中孵育4小時。孵育后，將活/死染色劑直接加入每個管中，在冰上孵育15分鐘并通過流式細(xì)胞術(shù)分析。引用文獻(xiàn)a.Perussia,B.,(1998).CurrentTopicsinMicrobiologyandImmunology230,p63.b.Whiteside,T.L.,Rinaldo,C.R.andHerberman,R.B.(1992)CytolyticCellfunctions.In:N.R.Rose,E.C.deMacario(Eds.),ManualofClinicalLaboratoryImmunology.AmericanSocietyforMicrobiology.Washington,DC,p.220.Brunner,K.T.,Manuel,J.,Cerotini,J.C.,Chapuis,B.,(1968).QuantitativeAssayoftheLyticActionofImmuneLymphoidCellsonCr-labelledAllogenicTargetCellsin-vitro;InhibitionbyIso-antibodyandbyDrugs,Immunology14,181.Lee-MacAry,A.E.,Ross,E.L,Davies,D.,andWilkinson,R.W.,(2001).DevelopmentofaNovelFlowCytometricCell-mediatedCytotoxcityAssayUsingtheFluorophoresPKH-26andTO-PRO-3Iodide.J.Immunology.Met252,83-92.Gogoy-Ramirez,K.,Franck,K.,andGains,H.,(2000).ANovelMethodfortheSimultaneousAssessmentofNaturalKillerCellConjugateFormationandCytotoxicityattheSingle-cellLevelbyMulti-parameterFlowCytometry.JournalofImmunology.Met239,35-44.Goldberg,J.E.,Sherwood,S.W.,Clayberger,C.,(1999).ANovelMethodforMeasuringCTLandNKCell-mediatedCytotoxicityUsingAnnexinVandTwo-colorFlowCytometry.JournalofImmunology.Methods224,1.Hatam,L,.Schuval,S.,Bonagura,V.R.,(1994).FlowCytometricAnalysisofNaturalKillerCellFunctionasaClinicalAssay.Cytometry16,59.L.SDeClercketal.,J.Immunol.Meth.172,115(1994).M.Bronner-Fraser,J.CellBiol.101,610(1985).Rabinovitch,P.S.,etal.,J.Immunol.136,2769(1986).Su,X.,J.Immunol.156,156,4198(1996).Olin,MR.Lee,J.Choi,K,andMolitor,Tw.gdT-lymphocyteCytotoxicActivityagainstMycobateriumbovisAnalysedbyFlowCytometry:JournalofImmunologicalMethods;Publicationinprocess.Olin,MR.Thesis,K.Cho,J.andMolitor,T.W.MorphineSuppressesMicroglialDirectedCytolyticActivitybygdLymphocytes.JournalofNeuroimmunology;Publicationinprocess.[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• Cell Technology Fluoro ACHE 說明書

  世界ding級實驗材料供應(yīng)商CellTechnology正式授權(quán)上海起發(fā)為其ZG代理，CellTechnology在一直是行業(yè)的標(biāo)桿,一直為廣大科研客戶提供Z為優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為ZG科研客戶帶來**的產(chǎn)品，**的服務(wù)，簽約CellTechnology就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們Zda的收獲CellTechnologyZG代理,CellTechnology上海代理，CellTechnology北京代理，CellTechnology廣東代理，CellTechnology江蘇代理CellTechnology湖北代理,CellTechnology天津,CellTechnology黑龍江代理,CellTechnology內(nèi)蒙古代理,CellTechnology吉林代理,CellTechnology福建代理,CellTechnology江蘇代理,CellTechnology浙江代理,CellTechnology四川代理,CellTechnology公司是一家私有公司，公司致力為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)的生物檢測產(chǎn)品和服務(wù)。CellTechnology的員工是公司Z重要的競爭優(yōu)勢。CellTechnology有助于我們產(chǎn)品的公司的不妥協(xié)的質(zhì)量承諾以確保每個產(chǎn)品的搞品質(zhì)。CellTechnology員工和技術(shù)的的多樣性使得我們能以獨特的工藝解決當(dāng)今復(fù)雜的商業(yè)挑戰(zhàn)。CellTechnology主要產(chǎn)品包括抗體和試劑，同時提供代謝試驗，雙傳感器的檢測，熒光酶檢測，氧化應(yīng)激檢測的產(chǎn)品及服務(wù)。FluoroAChEFluorescentActeylcholinesterase(AChE)DetectionKit-DetectionofAChEinRBC,Saliva,andTissueLysates熒光乙酰膽堿酯酶（AChE）檢測試劑盒-檢測紅細(xì)胞，唾液和組織裂解液中的乙酰膽堿酯酶產(chǎn)品代碼：ACHE100產(chǎn)品描述介紹接觸化學(xué)神經(jīng)制劑，農(nóng)藥和某些藥物（麻醉劑，KKY和ZL藥物）會降低紅細(xì)胞（RBC）乙酰膽堿酯酶（AChE）的活性。RBC-AChE可以作為一種生物標(biāo)記物來監(jiān)測外周和神經(jīng)系統(tǒng)中AChE功能的YZ和增加（9）。乙酰膽堿酯酶（AChE）是參與神經(jīng)傳遞的Z重要的酶之一。該酶結(jié)合可興奮組織（突觸連接，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等）的細(xì)胞膜1-3。由于神經(jīng)毒氣和一類重要的農(nóng)藥對AChE的YZ，對人類和動物的急性毒性一直是一個深入的科學(xué)研究領(lǐng)域4,5。AChEYZ劑在臨床上也被用作阿爾茨海默病的ZL藥物（如他克林（四氫氨基吖啶））6，并且是各種疾病過程和ZL策略越來越受關(guān)注的對象7,8。然而，AChEYZ劑的環(huán)境檢測和作為藥物的AChE酶活性調(diào)節(jié)劑的開發(fā)已經(jīng)由于當(dāng)前測定方法的困難和復(fù)雜性而受到阻礙。主要優(yōu)點非放射性測定可以監(jiān)測多個時間點以遵循動力學(xué)。一步，沒有洗滌檢測。多功能：可檢測紅細(xì)胞，唾液和組織裂解液中的AChE活性。讀數(shù)-96孔熒光讀板器。測定原理我們開發(fā)了一種高度敏感，非?？焖?，非常簡單的測定方法，以測定紅細(xì)胞中的乙酰膽堿酯酶活性，使用天然底物乙酰膽堿。另外，通過使用特異性YZ劑，該試劑盒可用于檢測各種樣品中的AChE活性。一系列偶聯(lián)的酶反應(yīng)迅速將活性AChE的存在轉(zhuǎn)化為淬滅檢測試劑的熒光變化。AChE+ATP+H20+偶聯(lián)酶反應(yīng)+淬滅染料→熒光染料（例如：530-570nmEM：590-600nm時間=10分鐘稀釋使用的卷ug蛋白/孔RFU*RBC1：100010uL五3450RBC沒有Ach1：100010uL五152大鼠腦1：50010uL205864大腦沒有Ach1：50010uL20296唾液整齊10uLND925唾液沒有整齊10uLND772RBC-AChEmU/mLRFUSDRFU167.00099990.0041.7506375121.7010.43816599.002.6095909.810.6522567.230.1632228.7201868.08我們公司Zda優(yōu)勢是強大的采購，1：基本什么都能進(jìn)口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進(jìn)口的，2：貨品全，現(xiàn)經(jīng)營過700多個品牌，基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口，特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢，3：提供加急服務(wù)，一般1-2周到貨，超過時限加急費全免4：價格公道，絕大部分價格有優(yōu)勢，當(dāng)然不能保證1**%產(chǎn)品都是價格Zdi,因為價格Zdi意味著沒有服務(wù).5：良好的信譽，大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù)，客戶包括清華，北大交大復(fù)旦，中山等100多所大學(xué)，ROCHE，阿斯利康，國藥，fisher等500多家公司6：我們du家代理的品牌有：AntibodyResearchCorporation，arcticzymes，Biorelevant，AmberGen,Inc.，clemente-associates，clodronateliposomes，ColumbiaBiosciences，enzymeresearch，GeneBridgesGmbH，Genovis，AmberGen,Inc.BiotechnologyGmbH，HaematologicTechnologiesHTIHaemtech，hookelabs，Immudex，InnovativeResearchofAmerica，inspiralis，ListBiologicalLaboratories,Inc.，lumafluor，Microsurfaces，multiplicom，nanotools，Pel-FreezBiologicals，pentapharm，progen，ProteinArk，QA-Bio,Inc，QA-Bio,IncQuickZymeBiosciences，Teknova，TriLinkBioTechnologies,Inc.，ZyagenLaboratories等7：我們還是invitrogen,qiagen,MidlandBioProductsCorporationam,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名批發(fā)，歡迎合作。[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒

  大鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-09 00:00

  期刊論文

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• 人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒

  人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  課件

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• 裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法

  裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法[詳細(xì)]

  2015-06-10 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法

  裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法[詳細(xì)]

  2015-04-20 00:00

  選購指南

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• 裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法

  裸鼠乙酰膽堿酯酶（AChE） ELISA試劑盒操作方法[詳細(xì)]

  2015-03-23 00:00

  操作手冊

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• 人乙酰膽堿酯酶（AchE）ELISA試劑盒使用說明書

  人乙酰膽堿酯酶（AchE）ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中乙酰膽堿酯酶（AchE）含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人乙酰膽堿酯酶（AchE）水平。用純化的人乙酰膽堿酯酶（AchE）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入乙酰膽堿酯酶（AchE），再與HRP標(biāo)記的乙酰膽堿酯酶（AchE）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰膽堿酯酶（AchE）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人乙酰膽堿酯酶（AchE）含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：2250nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1500nmol/L，1000nmol/L，500nmol/L，250nmol/L，125nmol/L）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：100nmol/L-2000nmol/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊

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• β內(nèi)酰胺酶檢測試劑盒

  β內(nèi)酰胺酶檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2011-02-09 00:00

  期刊論文

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• 三聚氰胺檢測試劑盒

  三聚氰胺檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2012-08-24 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 四環(huán)素檢測試劑盒

  四環(huán)素檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2012-08-24 00:00

  期刊論文

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• 呋喃西林檢測試劑盒

  呋喃西林檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2012-08-24 00:00

  安裝說明

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• 淀粉檢測試劑盒

  訂貨號：10207748035產(chǎn)品名稱：淀粉（Starch）產(chǎn)品英文名稱：Starch包裝：Ca.27tests產(chǎn)品介紹：請下載產(chǎn)品說明：Starch（用于檢測食品中的淀粉）[詳細(xì)]

  2018-09-15 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 膽固醇檢測試劑盒

  訂貨號：10139050035產(chǎn)品名稱：膽固醇（Cholesterol）產(chǎn)品英文名稱：Cholesterol包裝：Ca.31tests產(chǎn)品介紹：請下載詳細(xì)資料產(chǎn)品說明：Cholesterol（用于檢測食品中的膽固醇）[詳細(xì)]

  2018-09-15 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• （Digoxin） 檢測試劑盒

  www.biokanu.com(Digoxin)酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。1使用目的：本試劑盒用于血液、血清、尿液等樣本中(Digoxin)殘留的定量檢測。2實驗原理本試劑盒采用競爭ELISA方法，在微孔板包被有(Digoxin)偶聯(lián)抗原，加入(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離(Digoxin)與微孔條上預(yù)包被的(Digoxin)偶聯(lián)抗原互相競爭(Digoxin)抗體酶標(biāo)記物，用TMB底物顯色，加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測，吸光值與樣品中(Digoxin)含量成反比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中(Digoxin)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的(Digoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板：1塊（12孔×8條）。3.2(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品：6瓶（1ml/瓶），含量分別是：0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L3.3抗(Digoxin)抗體酶結(jié)合物：1瓶（6ml）。3.4顯色液A：1瓶（6ml）。3.5顯色液B：1瓶（6ml）。3.6終止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7樣本稀釋液：1瓶（10×,6ml），用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9說明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機(jī)。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃，切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項6.1使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。6.2不要使用過期試劑盒。6.3試劑盒使用前，將試劑恢復(fù)至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有(Digoxin)，使用時應(yīng)特別注意，操作時應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗結(jié)果。6.7不同批號試劑盒中的試劑不得混用；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響實驗結(jié)果。6.8稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液，否則會影響實驗結(jié)果6.9混合試劑時應(yīng)避免起泡。7工作液準(zhǔn)備7.1(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品溶液：0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L7.2濃縮洗滌液：用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用7.3樣本稀釋液：備用7.3顯色劑：已備用，避免光線直照7.4反應(yīng)終止液：已備用8樣品處理程序（樣品在提取過程中，要嚴(yán)格按說明書操作，提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋，否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）8.1取10g粉碎的樣品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振蕩3分鐘8.3用WhatmanNo1濾紙過濾8.4取100l處理后的樣品，加入400l樣本稀釋液8.5取50μl稀釋液進(jìn)行分析（稀釋倍數(shù)10）動物組織前處理8.6準(zhǔn)確稱取1±0.05g勻漿后的組織樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮氣流下吹干8.8加入2mL1×樣品稀釋液Ⅰ,750rpm渦旋20s8.9取100ml用于分析飼料前處理方法8.10準(zhǔn)確稱取1±0.05g粉碎飼料樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮氣流下吹干8.12加入1mL1×樣品稀釋液Ⅰ,渦旋20s，取出100ml加到900ml1×樣品稀釋液Ⅰ，混勻后取100ml用于分析牛奶前處理方法8.13取1ml牛奶樣品到2ml離心管中；用1×樣品稀釋液Ⅱ稀釋30倍，混勻后取100ml用于分析奶粉前處理方法8.14準(zhǔn)確稱取0.3g奶粉樣品到7ml的聚苯乙烯離心管中；加入2ml1×樣品稀釋液Ⅲ，2ml正己烷，震蕩混勻8.154000r/min以上離心5min，去除有機(jī)層和中間層，取下層溶液100ml到300ml1×樣品稀釋液Ⅲ8.16混勻后取100ml用于分析9酶免分析步驟9.1實驗須知9.1.1實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫（25±2℃），時間約2小時?；販刂潦覝兀?5±2℃）后再取出微孔條，多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保證回溫充分，否則影響檢測的極ng確度和準(zhǔn)確度。9.1.2使用后請立即將試劑放回2~8℃保存9.1.3請不要改變分析程序9.1.4請使用極ng確的微量移液器9.1.5操作一旦開始，請不要中斷任何程序9.1.6ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序，請嚴(yán)格按照要求操作9.1.7為避免交叉污染，每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9.1.8加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面9.2分析步驟9.2.1預(yù)先進(jìn)行編號，標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置，推薦進(jìn)行雙孔檢測9.2.2取所需數(shù)量的微孔（微孔條可拆），將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3樣品稀釋液（10×）、濃縮洗滌液（20×）稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ug/L標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.5在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.6在各樣品孔中加入50l樣品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗(Digoxin)抗體酶結(jié)合物9.2.8輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。9.337℃溫浴30min（溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板，可以減少雙孔誤差）9.3.1甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔板5次，Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。9.4反應(yīng)9.4.1洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個微孔中先加入50l顯色液A，再加50l顯色液B；輕微晃動反應(yīng)板使之徹底混勻9.4.237℃溫浴10min9.4.3每孔中加入50l終止液，混勻9.4.4在450nm下檢測吸光度，結(jié)果在5min內(nèi)讀取。10結(jié)果計算10.1定量分析10.1.1所獲得的每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以**個標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00ug/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值10.1.2以(Digoxin)濃度的對數(shù)值為X軸，百分吸光度值為Y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值，可從曲線上得到對應(yīng)點的橫坐標(biāo)，即為(Digoxin)濃度的對數(shù)值，求得反對數(shù)即為測定液中(Digoxin)濃度C（ug/L）10.1.3由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋，因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。10.2半定量測定10.1.1目測半定量測定：首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行，根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。10.1.2儀器半定量測定：首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行，根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。11特異性物質(zhì)交叉反應(yīng)(Digoxin)1**%12試劑盒參數(shù)本試劑盒檢測下限為0.01ug/LB0吸光度**值應(yīng)大于1.0試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8％，板間誤差小于15％。用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80％。13標(biāo)準(zhǔn)曲線模式（僅供參考）試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0.01ug/L~1.35ug/L。14分析限制本試劑盒檢測為陽性的樣品應(yīng)該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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  2024-10-02 18:27

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