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人β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒使用方法
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本文由 上海易利生物科技有限公司 整理匯編
2018-12-30 10:00 393閱讀次數(shù)
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檢測范圍:96T1μg/L-40μg/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中β干擾素(IFN-β)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β),再與HRP標記的β干擾素(IFN-β)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80μg/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2018-10-08 10:01
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人β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1μg/L-40μg/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中β干擾素(IFN-β)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β),再與HRP標記的β干擾素(IFN-β)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80μg/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細]
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2018-12-30 10:00
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人β干擾素(IFN-β)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1μg/L-40μg/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中β干擾素(IFN-β)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β),再與HRP標記的β干擾素(IFN-β)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。[詳細]
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2018-09-13 10:01
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人干擾素-(IFN-)ELISA試劑盒說明書
- 人干擾素-a(IFN-a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IFN-a單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IFN-a與單抗結合,加入生物素化的抗人IFN-a,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IFN-a濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IFN-a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62、31、0PG/mll為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應IFN-a含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IFN-a檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IFN-a。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。4.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產品樣冊
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人干擾素-(IFN-)ELISA試劑盒說明書
- 人干擾素-g(IFN-g)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IFN-g單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IFN-g與單抗結合,加入生物素化的抗人IFN-g,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IFN-g濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IFN-g濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62、31、0PG/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應IFN-g含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IFN-g檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IFN-g。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。4.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
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