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黃曲霉毒素(AF)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
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2018-09-19 10:01 433閱讀次數(shù)
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黃曲霉毒素(AF)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。1使用目的:本試劑盒用于檢測(cè)飼料和谷物中黃曲霉毒素(AF)含量。2實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉毒素(AF)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉毒素(AF)與微孔條上預(yù)包被的黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗黃曲霉毒素(AF)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中黃曲霉毒素(AF)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中黃曲霉毒素(AF)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。3.2黃曲霉毒素(AF)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ng/ml,0.1ng/ml,0.3ng/ml,0.9ng/ml,2.7ng/ml,8.1ng/ml。3.3抗黃曲霉毒素(AF)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。3.4顯色液A:1瓶(6ml)。3.5顯色液B:1瓶(6ml)。3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9說(shuō)明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長(zhǎng)450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機(jī)。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項(xiàng)6.1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。6.2不要使用過(guò)期試劑盒。26.3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有黃曲霉毒素(AF),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。6.7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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黃曲霉毒素(AF)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
- 黃曲霉毒素(AF)酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。1使用目的:本試劑盒用于檢測(cè)飼料和谷物中黃曲霉毒素(AF)含量。2實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉毒素(AF)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉毒素(AF)與微孔條上預(yù)包被的黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗黃曲霉毒素(AF)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中黃曲霉毒素(AF)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中黃曲霉毒素(AF)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的黃曲霉毒素(AF)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。3.2黃曲霉毒素(AF)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ng/ml,0.1ng/ml,0.3ng/ml,0.9ng/ml,2.7ng/ml,8.1ng/ml。3.3抗黃曲霉毒素(AF)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。3.4顯色液A:1瓶(6ml)。3.5顯色液B:1瓶(6ml)。3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9說(shuō)明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長(zhǎng)450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機(jī)。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項(xiàng)6.1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。6.2不要使用過(guò)期試劑盒。26.3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有黃曲霉毒素(AF),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。6.7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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黃曲霉毒素M1ELISA檢測(cè)試劑盒操作
- 黃曲霉毒素M1ELISA檢測(cè)試劑盒操作檢測(cè)步驟測(cè)定前須知:1.使用之前將所有試劑和所需板條回溫(20~25℃)。2.使用之后立即將所有試劑及剩余的板條放置2~8℃。3.ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA操作中的要點(diǎn)。4.在所有的恒溫孵育過(guò)程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。操作步驟:1.將所需試劑從微孔板中取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。2.取出所需數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封,保存于2~8℃。不要冷凍。3.洗滌工作液在使用前也需回溫。4.將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。5.加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入酶標(biāo)物50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)30min。6.小心揭開(kāi)蓋板膜,用洗滌工作液充分洗滌300ml/孔,洗板5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。7.加入顯色液100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)30min。8.加終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)酶標(biāo)儀于450nm處讀每孔OD值。注意事項(xiàng)1.室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有恢復(fù)到室溫(20~25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。2.在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。3.每種試劑使用前均需搖勻。4.反應(yīng)終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。5.不要使用過(guò)了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。6.儲(chǔ)存條件:試劑盒保存于2~8℃,不要冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的顯色劑對(duì)光敏感,因此要避光保存。7.試劑變質(zhì)的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。8.加入顯色液后,一般顯色時(shí)間為15~30min。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到35min(或更長(zhǎng)),但不得超過(guò)40min。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。9.該試劑盒**反應(yīng)溫度為25℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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黃曲霉毒素B1檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
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2018-11-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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嘔吐毒素(vomitoxin)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)說(shuō)明書
- 此說(shuō)明書為PDF格式,請(qǐng)下載參閱!嘔吐毒素(vomitoxin)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用1使用目的:本試劑盒用于各種谷物、飼料、麥芽啤酒和麥芽汁中嘔吐毒素(vomitoxin)殘留的定量檢測(cè)。2實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有嘔吐毒素(vomitoxin)偶聯(lián)抗原,加入嘔吐毒素(vomitoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離嘔吐毒素(vomitoxin)與微孔條上預(yù)包被的嘔吐毒素(vomitoxin)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗嘔吐毒素(vomitoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中嘔吐毒素(vomitoxin)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中嘔吐毒素(vomitoxin)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的嘔吐毒素(vomitoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。3.2嘔吐毒素(vomitoxin)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb。3.3抗嘔吐毒素(vomitoxin)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。3.4顯色液A:1瓶(6ml)。3.5顯色液B:1瓶(6ml)。3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9說(shuō)明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長(zhǎng)450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機(jī)。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項(xiàng)6.1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。6.2不要使用過(guò)期試劑盒。6.3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有嘔吐毒素(vomitoxin),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。6.7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6.8稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果6.9混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。7工作液準(zhǔn)備7.1嘔吐毒素(vomitoxin)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1ppb7.2濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用7.3樣本稀釋液:用蒸餾水按1:10(1+9)稀釋備用7.3顯色劑:已備用,避免光線直照7.4反應(yīng)終止液:已備用8樣品處理:(樣品在提取過(guò)程中,要嚴(yán)格按說(shuō)明書操作,提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)一般樣品處理8.1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液8.2QL振蕩3分鐘8.3用WhatmanNo1濾紙過(guò)濾8.4取100l處理后的樣品,加入400l樣本稀釋液8.5取100μl稀釋液進(jìn)行分析動(dòng)物組織前處理8.6準(zhǔn)確稱取1±0.05g勻漿后的組織樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入3ml乙腈--丙酮提取溶液,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮?dú)饬飨麓蹈?.8加入3.2mL樣品稀釋液,750rpm渦旋20s8.9取100ml用于分析飼料前處理方法8.10準(zhǔn)確稱取1±0.05g粉碎飼料樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入4ml乙腈,1ml丙酮,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮?dú)饬飨麓蹈?.12加入2.8mL樣品稀釋液,渦旋20s,混勻后取100ml用于分析牛奶前處理方法8.13取1ml牛奶樣品到5ml聚苯乙烯離心管中;加入4ml樣品稀釋液,混勻后取100ml用于分析奶粉前處理方法8.14準(zhǔn)確稱取0.3g奶粉樣品到7ml的聚苯乙烯離心管中;加入2mlPBS溶液,2ml正己烷,震蕩混勻8.154000r/min以上離心5min,去除有機(jī)層和中間層,取下層溶液100ml到400ml樣品稀釋液8.16混勻后取100ml用于分析9酶免分析步驟9.1實(shí)驗(yàn)須知9.1.1實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測(cè)的極ng確度和準(zhǔn)確度。9.1.2使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存9.1.3請(qǐng)不要改變分析程序9.1.4請(qǐng)使用極ng確的微量移液器9.1.5操作一旦開(kāi)始,請(qǐng)不要中斷任何程序9.1.6ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作9.1.7為避免交叉污染,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9.1.8加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面9.2分析步驟9.2.1預(yù)先進(jìn)行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測(cè)9.2.2取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3樣品稀釋液、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ppb標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.5在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.6在各樣品孔中加入50l樣品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗嘔吐毒素(vomitoxin)抗體酶結(jié)合物9.2.8輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。9.337℃溫浴30min(溫浴過(guò)程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)9.3.1甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。9.4反應(yīng)9.4.1洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50l顯色液A,再加50l顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之徹底混勻9.4.237℃溫浴10min9.4.3每孔中加入50l終止液,混勻9.4.4在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。10結(jié)果計(jì)算10.1定量分析10.1.1所獲得的每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以**個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值10.1.2以嘔吐毒素(vomitoxin)濃度的對(duì)數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對(duì)應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo),即為嘔吐毒素(vomitoxin)濃度的對(duì)數(shù)值,求得反對(duì)數(shù)即為測(cè)定液中嘔吐毒素(vomitoxin)濃度C(ppb)10.1.3由于樣品經(jīng)過(guò)了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。10.2半定量測(cè)定10.1.1目測(cè)半定量測(cè)定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。10.1.2儀器半定量測(cè)定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。11特異性物質(zhì)交叉反應(yīng)嘔吐毒素(vomitoxin)1**%12試劑盒參數(shù)本試劑盒檢測(cè)下限為0.1ppbB0吸光度**值應(yīng)大于1.0試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8%,板間誤差小于15%。用本說(shuō)明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。13標(biāo)準(zhǔn)曲線模式(僅供參考)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0.1ppb~8.1ppb。14分析限制本試劑盒檢測(cè)為陽(yáng)性的樣品應(yīng)該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。[詳細(xì)]
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