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鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
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本文由 上海信然實(shí)業(yè)有限公司 整理匯編
2015-02-10 00:00 118閱讀次數(shù)
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鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
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鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
- 鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-02-10 00:00
期刊論文
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鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒
- 鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-02-10 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)酶聯(lián)免疫分析
- 鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1.0U/mL-24U/mL使用目的:本試劑盒用于測(cè)定鯽魚(yú)血清、血漿及相關(guān)液體樣本中阿黑皮素原(POMC)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)水平。用純化的鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入阿黑皮素原(POMC),再與HRP標(biāo)記的阿黑皮素原(POMC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的阿黑皮素原(POMC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中鯽魚(yú)阿黑皮素原(POMC)濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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鯽魚(yú)Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)試劑盒使用方法
- 鯽魚(yú)Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)試劑盒使用方法本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T2.0ng/L-50ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定鯽魚(yú)血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中鯽魚(yú)Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)水平。用純化的鯽魚(yú)Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Agouti相關(guān)蛋白(AGRP),再與HRP標(biāo)記的Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中鯽魚(yú)Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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鯽魚(yú)雌激素(E)說(shuō)明書(shū)
- 鯽魚(yú)雌激素(E)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定鯽魚(yú)血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中激素(E)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中鯽魚(yú)雌激素(E)水平。用純化的鯽魚(yú)雌激素(E)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌激素(E),再與HRP標(biāo)記的雌激素(E)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌激素(E)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中鯽魚(yú)雌激素(E)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為36ng/L,24ng/L,12ng/L,6ng/L,3ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍:1ng/L-45ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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中英文Elisa試劑盒,干擾素(IFN-α)Elisa試劑盒雞Elisa試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 雞α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定雞血清,血漿及相關(guān)液體樣本中α干擾素(IFN-α)的含量。代做ELISA試劑盒,代測(cè)elisa試劑盒,上海廣銳生物科技有限公司實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中雞α干擾素(IFN-α)水平。用純化的雞α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α),再與HRP標(biāo)記的羊抗雞抗體體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞α干擾素(IFN-α)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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測(cè)汞儀直接測(cè)定并評(píng)價(jià)鯽魚(yú)組織中汞含量
- 測(cè)汞儀直接測(cè)定并評(píng)價(jià)鯽魚(yú)組織中汞含量[詳細(xì)]
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2024-09-15 17:52
實(shí)驗(yàn)操作
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Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
- Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)人血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中D-乳酸鹽(D-lactate)的含量。Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)用純化的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D-乳酸鹽(D-lactate),再與HRP標(biāo)記的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存Elisa試劑盒:人D-乳酸鹽Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)人D-乳酸鹽(D-lactate)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中D-乳酸鹽(D-lactate)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人D-乳酸鹽(D-lactate)水平。用純化的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D-乳酸鹽(D-lactate),再與HRP標(biāo)記的D-乳酸鹽(D-lactate)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的D-乳酸鹽(D-lactate)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人D-乳酸鹽(D-lactate)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:450ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為300ng/ml,200ng/ml,100ng/ml,50ng/ml,25ng/ml)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍:8ng/ml-400ng/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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血栓素ELISA試劑盒
- 血栓素ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2016-03-07 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑盒植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)ELISA試劑盒僅供體外研究使用預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定植物組織、細(xì)胞或其它相關(guān)樣本中防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF)含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗PDF抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗PDF抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PDF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板:一塊(96孔)1.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為20ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別稀釋成20ng/ml,10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制10ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)20ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。2.樣品稀釋液:1×20ml/瓶。3.檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。4.檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。5.檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100ul),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測(cè)溶液A加99ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。6.檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。7.底物溶液:1×10ml/瓶。8.濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。9.終止液:1×10ml/瓶(2NH2SO4)。10.覆膜:1×5張操作步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲坪盟性噭?;試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),均應(yīng)用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。建議各實(shí)驗(yàn)室在操作前先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)以建立**稀釋倍數(shù)。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液100ul(取1ul檢測(cè)溶液A加99ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。4.每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液)100ul,37℃,60分鐘。5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。7.依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。注:1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔(不同于空白孔),該孔不加任何試劑,只是Z后加底物溶液及2NH2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。2.嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫。使用后立即冷藏保存試劑。3.洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入檢測(cè)溶液B或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,洗板拍干后請(qǐng)立即加入后步試劑,應(yīng)避免微孔干燥掉。4.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。5.在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。6.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。7.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。特異性本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的植物防衛(wèi)素/植物抗毒素(PDF),且與其它相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,如curveexpert1.3),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.洗滌過(guò)程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。2.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。4.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以稀釋倍數(shù)。5.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。6.底物請(qǐng)避光保存。說(shuō)明1.在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。2.小心吸取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),**個(gè)孔與Z后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育”時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。而且,洗滌不充分將影響試驗(yàn)結(jié)果。3.試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。4.濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。5.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。6.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。7.所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。8.有效期:6個(gè)月ELISA試劑盒聯(lián)系人:馬先生(先生)部門(mén)(職位):銷售(經(jīng)理)手機(jī)號(hào)碼:15021200052電話:86-021-54100800/64855665傳真:86-021-54261506所在地:上海公司地址:徐匯區(qū)欽江路15號(hào)1405郵政編碼:200233郵件:solarbio@126.com公司網(wǎng)址:http://www.shsolarbio.com[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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牛ELISA試劑盒
- 【兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒技術(shù)與自動(dòng)化過(guò)程】在一般的概念里,牛ELISA試劑盒技術(shù)的可操作性強(qiáng),不需復(fù)雜設(shè)備,甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng),盡可能做到Zdi限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度等觀念的不斷改進(jìn),解決ELISA技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的系統(tǒng)誤差問(wèn)題及GX率運(yùn)作問(wèn)題導(dǎo)致了自動(dòng)化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的科學(xué)地、有機(jī)地、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動(dòng)化ELISA技術(shù)的理論基礎(chǔ)。在自動(dòng)化ELISA技術(shù)中,可以將整個(gè)體系分成加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)及判讀系統(tǒng)、機(jī)械臂系統(tǒng)、液路動(dòng)力系統(tǒng)及軟件控制系統(tǒng)等幾種結(jié)構(gòu),這些系統(tǒng)既獨(dú)立又緊密聯(lián)系。加樣系統(tǒng)包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤(pán)、試劑架及加樣臺(tái)等構(gòu)件。加樣針有兩手中,一為有TEFLON涂層的金屬針,另一為可更換的一次性加樣頭(Tip)0有些儀器的加樣針只配金屬針,無(wú)一次性加樣頭,有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑,它是靠液路動(dòng)力系統(tǒng)提供動(dòng)力,通過(guò)注射器樣的分配器進(jìn)行極ng確加樣的。加樣針的數(shù)量在各型號(hào)儀器上是不同的,有一根的、兩根的或多根的O條碼閱讀器是幫助識(shí)別標(biāo)本的重要工作,目前的儀器均配有此裝置。樣品盤(pán)除了放置標(biāo)本外,還能放置稀釋標(biāo)本用的稀釋管,供不同檢測(cè)目的使用。試劑架是供放置酶標(biāo)記試劑、顯色液、終止液等試劑用的,有些型號(hào)的儀器這一部分是獨(dú)立的,有些是并在樣品盤(pán)上O加樣臺(tái)是酶標(biāo)板放置的平臺(tái),有些儀器在臺(tái)上設(shè)置溫育裝置,讓溫育在臺(tái)上進(jìn)行O整個(gè)加樣系統(tǒng)由控制軟件進(jìn)行協(xié)調(diào)操作。溫育系統(tǒng)主要由加溫器及易導(dǎo)熱的金屬材料板架構(gòu)成O有些是盒式的,有些是臺(tái)式的O一般控制的溫度可在室溫-50°C之間。溫育時(shí)間及溫度設(shè)置是由控制軟件需確調(diào)控的。洗板系統(tǒng)是整個(gè)體系的重要組成部分,主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項(xiàng)洗板的洗板殘留量一般控制在5L以內(nèi)。**設(shè)備可控制在2L內(nèi)。洗板次數(shù)可通過(guò)軟件控制實(shí)現(xiàn)并可更改次數(shù)。讀板系統(tǒng)由光源、激光片、光導(dǎo)纖維、鏡片和光電倍增管組成,是酶促反應(yīng)Z突結(jié)果客觀判讀的設(shè)備。各型號(hào)儀器的比色探頭配置不一樣,有單頭的3也有8頭的。控制軟件通過(guò)機(jī)械臂和輸送軌道將酶標(biāo)板送入讀板器進(jìn)行自動(dòng)比色,再將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù)信號(hào)又回送到軟件系統(tǒng)進(jìn)行分析,Z終得出結(jié)果。酶標(biāo)板的移動(dòng)靠機(jī)械臂或軌道運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)完成。牛ELISA試劑盒機(jī)械臂的另一重要功能是移動(dòng)抽樣針O機(jī)械系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)受控子控制軟件,其運(yùn)動(dòng)非常地極ng確和到位。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Elisa試劑盒性能
- 人組胺(Histamine)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中組胺(Histamine)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人組胺(Histamine)水平。用純化的人組胺(Histamine)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組胺(Histamine),再與HRP標(biāo)記的組胺(Histamine)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(Histamine)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人組胺(Histamine)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:18μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為12μg/L,8μg/L,4μg/L,2μg/L,1μg/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:0.75μg/L-15μg/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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胡蘿卜素Elisa試劑盒
- 本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中胡蘿卜素(Carotene)的含量。胡蘿卜素(Carotene)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中胡蘿卜素(Carotene)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中胡蘿卜素(Carotene)水平。用純化的胡蘿卜素(Carotene)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胡蘿卜素(Carotene),再與HRP標(biāo)記的胡蘿卜素(Carotene)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胡蘿卜素(Carotene)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人胡蘿卜素(Carotene)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:90pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本要求:1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為60pg/mL,40pg/mL,20pg/mL,10pg/mL,5.0pg/mL)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:3.0pg/mL-70pg/mL保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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胰島素ELISA試劑盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰島素ELISA試劑盒(德國(guó)DRG:EIA2935)1、前言說(shuō)明DRG公司的胰島素酶免試劑盒可用于人血清和血漿中(加入了肝素或檸檬酸的血漿)胰島素的定量檢測(cè)。此檢測(cè)試劑盒僅供體外診斷用。胰島素是調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要激素,它由朗格漢氏小島的β細(xì)胞合成分泌,并以前胰島素的前體形式存在,前胰島素可加工形成C肽和胰島素。這兩種激素都以等量形式分泌到門(mén)脈循環(huán)中。成熟的胰島素分子由兩條多肽鏈組成,A鏈和B鏈(分別21個(gè)和30個(gè)氨基酸)。這兩條鏈通過(guò)鍵內(nèi)二硫鍵而連接到一起。胰島素的分泌主要受血漿葡萄糖濃度的影響,這種激素有一系列重要的代謝功能。它的主要功能是通過(guò)葡萄糖的運(yùn)送來(lái)控制外周組織中葡萄糖的攝取和利用。胰島素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的異生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,腎上腺素,生長(zhǎng)激素和皮質(zhì)醇)的作用中和掉。在胰島素依賴性的糖尿?。↖DDM)和其它疾病例如垂體機(jī)能減退疾病中,胰島素的濃度會(huì)明顯降低。在非胰島素依賴性的糖尿病患者、肥胖患者、胰島素瘤患者和一些內(nèi)分泌功能紊亂(如庫(kù)欣綜合癥和支端肥大癥)患者的體內(nèi),其胰島素的水平會(huì)上升。2、實(shí)驗(yàn)原理DRG公司的胰島素酶免實(shí)驗(yàn)是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),反應(yīng)板上的微檢測(cè)孔包被有能結(jié)合胰島素分子上獨(dú)特抗原位點(diǎn)的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性胰島素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行孵育,該酶聯(lián)物是一種生物素標(biāo)記的抗胰島素抗體。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。在第二次溫育時(shí),鏈親和素過(guò)氧酶復(fù)合物結(jié)合到生物素化抗胰島素抗體上,過(guò)氧酶復(fù)合物的結(jié)合量與樣品中胰島素的濃度成正比。加入底物液后,所顯示的顏色強(qiáng)度與病人樣品中胰島素的濃度成正比。3、試劑盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰島素的單克隆抗體。2)零標(biāo)準(zhǔn)品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)標(biāo)準(zhǔn)品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶聯(lián)物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠單克隆抗體。5)酶復(fù)合物:1支,7ml,即用,辣根過(guò)氧化物-鏈親和素復(fù)合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)終止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,請(qǐng)勿接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。8)洗滌液:1瓶,30ml,40倍濃縮,見(jiàn)試劑準(zhǔn)備。注意:用樣品稀釋的零標(biāo)準(zhǔn)品視需要而定。4、實(shí)驗(yàn)所需材料(但試劑盒不提供)1)酶標(biāo)儀2)標(biāo)準(zhǔn)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性所有的未開(kāi)啟的試劑在2-8℃下儲(chǔ)存至保質(zhì)期,不要使用過(guò)期的試劑。所有開(kāi)啟的試劑應(yīng)在2-8℃下儲(chǔ)存。一旦打開(kāi)微孔板的包裝,需將其重新密封。6、樣品的準(zhǔn)備將所有的試劑和所需要的板條在使用前平衡至室溫。洗滌液:用1170ml的蒸餾水稀釋30ml濃縮的洗滌液,Z終得到的容積為1200ml,稀釋好的洗滌液在室溫下可穩(wěn)定存放兩個(gè)星期。7、樣品的收集此ELISA試劑盒可使用血清也可使用(只有肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿)血漿作為樣品。不能使用明顯溶血黃疸和脂血的樣品。血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下離心分離血清。血漿:將全血采集到含有抗凝劑的離心管,采集后立即離心分離。8、樣品的儲(chǔ)存:樣品蓋好蓋子后,可在實(shí)驗(yàn)前2-8℃下儲(chǔ)存5天,要更長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,應(yīng)在-20℃下凍存。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品。9、樣品的稀釋:在**次實(shí)驗(yàn)中,要是樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品,則樣品應(yīng)用按實(shí)驗(yàn)步驟所描述的10倍或100倍稀釋。在計(jì)算濃度時(shí)需乘以此稀釋度。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)。b)按1:100釋?。?0μL按a)稀釋的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)10、實(shí)驗(yàn)步驟所有的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品都必須做雙份檢測(cè)以確保所有微孔的檢測(cè)條件都一樣。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。。2)用一次性吸嘴將標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和樣品分別25μL加入相應(yīng)的檢測(cè)孔中。3)每孔加入25μL的酶聯(lián)物。4)充分混合10秒,在此步驟中充分混合非常重要。5)室溫下溫育30分鐘。6)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確操作會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和極ng確度。7)每孔加入50μL的酶復(fù)合物。8)在室溫下溫育30分鐘。9)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室溫下溫育15分鐘。12)每孔加入50μL的終止液終止反應(yīng)。13)在加終止液后10分鐘內(nèi)于450±10nm處讀取OD值。11、計(jì)算結(jié)果:1)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和病人樣品的平均吸光度。2)以吸光率為Y軸,濃度為X軸,按照從標(biāo)準(zhǔn)品中獲得的平均吸光率和其相對(duì)應(yīng)的濃度值,繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。3)利用樣品的平均吸光率,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上得出其相應(yīng)的濃度值,4)自動(dòng)方法:使用計(jì)算機(jī)三次方模式四參數(shù)模式或雙對(duì)數(shù)函數(shù)的計(jì)算機(jī)程序可得到結(jié)果。5)樣品的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的濃度則需進(jìn)一步稀釋。在計(jì)算濃度的時(shí)候,要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。下面是胰島素ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線的典型例子。標(biāo)準(zhǔn)品吸光率(450nm)零標(biāo)準(zhǔn)品(0μIU/ml)0.03標(biāo)準(zhǔn)品1(6.25μIU/ml)0.07標(biāo)準(zhǔn)品2(12.5μIU/ml)0.14標(biāo)準(zhǔn)品3(25μIU/ml)0.35標(biāo)準(zhǔn)品4(50μIU/ml)0.88標(biāo)準(zhǔn)品5(100μIU/ml)2.05參考值:建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值與非正常值。在一明顯正常成年人的研究中,用DRG公司的胰島素ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)得到如下數(shù)值:2-25μIU/ml本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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ELISA(酶聯(lián)免疫)試劑盒
- 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司聯(lián)系方式:021-6051734813817140470ELISA(酶聯(lián)免疫)試劑盒簡(jiǎn)介實(shí)驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法操作步驟:具體請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)(詳細(xì)說(shuō)明書(shū)請(qǐng)聯(lián)系我司業(yè)務(wù)人員:021-60517348,13817140470。)注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃2.有效期:6個(gè)月上海恒遠(yuǎn)生物長(zhǎng)期供應(yīng)種類齊全的完整ELISA試劑盒,種屬有人(Human)、大鼠(Rat)、小鼠(Mouse)、猴(Monkey)、兔(Rabbit)、豬(Pig)、馬(Horse)、魚(yú)、雞、鴨、羊等等;標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等等,所有試劑盒經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證,保證有效且重復(fù)性佳。歡迎大家來(lái)電咨詢。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:27
操作手冊(cè)
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人ELISA試劑盒,TPA ELISA Kit
- 96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒IL-10,小鼠白介素-10Elisa試劑盒磺胺二甲基惡唑,標(biāo)準(zhǔn)品JLJL200712人Elisa試劑盒,人ProteinCElisa試劑盒,HumanProteinCELISA試劑盒CAS號(hào):108-69-0,3,5-二,98%人Elisa試劑盒,人CD30Elisa試劑盒,HumanClusterofdifferentiation30,CD30ELISA試劑盒CAS:893-36-7,鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺/L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽/L-白氨酰-β-萘胺鹽酸鹽/鹽酸-L-亮氨酰-2-萘胺/L(+)-亮氨酰-2-萘基鹽酸氨/L-Leucyl-2-naphthylamidehydrochloride,BR,98%,1克,避光,-20℃96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人(BV)kit說(shuō)明書(shū),細(xì)菌性陰道病Elisa試劑盒CXCR3ELISAKit,大鼠CXC趨化因子受體3Elisa檢測(cè)試劑盒蒙花苷,標(biāo)準(zhǔn)品,含量測(cè)定,20mg,常溫,避光PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISA試劑盒豬(apo-A1)kit說(shuō)明書(shū),載脂蛋白A1Elisa試劑盒大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒HumanhepatitisBvirusXinteractingprotein,HBXIPELISAKit人異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒HumanAbnormalprothrombin,APTELISA試劑盒草烏甲素,標(biāo)準(zhǔn)品,含量測(cè)定,50mg,常溫,避光96孔elisa,48孔elisa,HumanTissuePolypeptideAntigen,TPAELISAKit,人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒GRP1957,營(yíng)養(yǎng)肉湯,供一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種和增菌用,250g小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒HumanMotilin,MTLELISAKitCAS號(hào):4767-3-7,2,2-雙(羥甲基)丙酸,98%[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒
- 大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書(shū)ELISA試劑盒使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中酪氨酸(Tyrosine)含量。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠酪氨酸(Tyrosine)水平。用純化的大鼠酪氨酸(Tyrosine)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酪氨酸(Tyrosine),再與HRP標(biāo)記的酪氨酸(Tyrosine)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酪氨酸(Tyrosine)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠酪氨酸(Tyrosine)濃度。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒組成2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。大鼠酪氨酸(Tyrosine)ELISA試劑盒試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒-大鼠ELISA試劑盒
- 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒-大鼠ELISA試劑盒中文名稱:大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒ELISA試劑盒價(jià)格:歡迎來(lái)電咨詢報(bào)價(jià)及索取詳細(xì)說(shuō)明書(shū)規(guī)格:96T/48T庫(kù)存:現(xiàn)貨保質(zhì)期:6個(gè)月用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀?!驹噭┖袠颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马?xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為12.5-400ng/L,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(12.5-400ng/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠(Rat)超氧化物歧化酶(SOD) ELISA 檢測(cè)試劑盒Elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 大鼠(Rat)超氧化物歧化酶(SOD)ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用標(biāo)本:組織勻漿試驗(yàn)原理:SOD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知SOD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將SOD和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中SOD的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:8.0mg/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗SOD抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:8.0mg/L(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。4.0mg/L(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.0mg/L(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.0mg/L(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.5mg/L(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.25mg/L(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0mg/L(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/L)A8.08.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4.04.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2.02.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1.01.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E0.50.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F0.250.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的SOD標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的SOD含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-8.0mg/L4、敏感度:0.01mg/L[詳細(xì)]
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2024-09-29 02:40
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