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人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢測試劑盒
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本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2015-03-16 00:00 241閱讀次數(shù)
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人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢測試劑盒
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更多資料
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人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢測試劑盒
- 人絨毛膜促性腺激素(HCG)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-16 00:00
報價單
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人絨毛膜促性腺激素(HCG)ELISA試劑盒
- 人絨毛膜促性腺激素(HCG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-06 00:00
實驗操作
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人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)檢測試劑盒
- 人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-11 00:00
選購指南
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人(human)β絨毛膜促性腺激素(β-hCG) ELISA 檢測試劑盒
- 人(human)β絨毛膜促性腺激素(β-hCG)ELISA檢測試劑盒用途:人β-hCGELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的β-hCG。本試劑盒可以檢測天然和重組的β-hCG。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。試驗原理:人β-hCG試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知β-hCG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將β-hCG和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中β-hCG的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:8.0IU/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗β-hCG抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(60ml)1瓶(30ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:8.0IU/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。4.0IU/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.0IU/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.0IU/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.5IU/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.25IU/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0IU/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(20×)的稀釋:蒸餾水20倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(IU/ml)A8.08.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4.04.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2.02.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1.01.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E0.50.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F0.250.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品結(jié)果分析以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的β-hCG標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的β-hCG含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒
- 人抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-20 13:27
操作手冊
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人絨毛促性腺激素β(β-HCG)elisa試劑盒使用說明書
- 人絨毛促性腺激素β(β-HCG)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-09-20 00:32
報價單
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人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
- 人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10g/L-240g/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中絨毛促性腺激素β(β-HCG)含量。人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人絨毛促性腺激素β(β-HCG)水平。用純化的人絨毛促性腺激素β(β-HCG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入絨毛促性腺激素β(β-HCG),再與HRP標(biāo)記的絨毛促性腺激素β(β-HCG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的絨毛促性腺激素β(β-HCG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人絨毛促性腺激素β(β-HCG)濃度。試劑盒組成人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人絨毛促性腺激素β(β-HCG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人(Human)絨毛膜促性腺激素(HCG)
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被絨毛膜促性腺激素(HCG)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的絨毛膜促性腺激素(HCG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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β內(nèi)酰胺酶檢測試劑盒
- β內(nèi)酰胺酶檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2011-02-09 00:00
期刊論文
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三聚氰胺檢測試劑盒
- 三聚氰胺檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2012-08-24 00:00
產(chǎn)品樣冊
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四環(huán)素檢測試劑盒
- 四環(huán)素檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2012-08-24 00:00
期刊論文
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呋喃西林檢測試劑盒
- 呋喃西林檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2012-08-24 00:00
安裝說明
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淀粉檢測試劑盒
- 訂貨號:10207748035產(chǎn)品名稱:淀粉(Starch)產(chǎn)品英文名稱:Starch包裝:Ca.27tests產(chǎn)品介紹:請下載產(chǎn)品說明:Starch(用于檢測食品中的淀粉)[詳細(xì)]
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2018-09-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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膽固醇檢測試劑盒
- 訂貨號:10139050035產(chǎn)品名稱:膽固醇(Cholesterol)產(chǎn)品英文名稱:Cholesterol包裝:Ca.31tests產(chǎn)品介紹:請下載詳細(xì)資料產(chǎn)品說明:Cholesterol(用于檢測食品中的膽固醇)[詳細(xì)]
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2018-09-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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(Digoxin) 檢測試劑盒
- www.biokanu.com(Digoxin)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。1使用目的:本試劑盒用于血液、血清、尿液等樣本中(Digoxin)殘留的定量檢測。2實驗原理本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有(Digoxin)偶聯(lián)抗原,加入(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離(Digoxin)與微孔條上預(yù)包被的(Digoxin)偶聯(lián)抗原互相競爭(Digoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中(Digoxin)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中(Digoxin)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的(Digoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。3.2(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L3.3抗(Digoxin)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。3.4顯色液A:1瓶(6ml)。3.5顯色液B:1瓶(6ml)。3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9說明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項6.1使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。6.2不要使用過期試劑盒。6.3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有(Digoxin),使用時應(yīng)特別注意,操作時應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結(jié)果。6.7不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結(jié)果。6.8稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結(jié)果6.9混合試劑時應(yīng)避免起泡。7工作液準(zhǔn)備7.1(Digoxin)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ug/L,0.01ug/L,0.03ug/L,0.15ug/L,0.45ug/L,1.35ug/L7.2濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用7.3樣本稀釋液:備用7.3顯色劑:已備用,避免光線直照7.4反應(yīng)終止液:已備用8樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)8.1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液8.2QL振蕩3分鐘8.3用WhatmanNo1濾紙過濾8.4取100l處理后的樣品,加入400l樣本稀釋液8.5取50μl稀釋液進(jìn)行分析(稀釋倍數(shù)10)動物組織前處理8.6準(zhǔn)確稱取1±0.05g勻漿后的組織樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入3ml乙腈--丙酮提取溶液,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮氣流下吹干8.8加入2mL1×樣品稀釋液Ⅰ,750rpm渦旋20s8.9取100ml用于分析飼料前處理方法8.10準(zhǔn)確稱取1±0.05g粉碎飼料樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入4ml乙腈,1ml丙酮,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮氣流下吹干8.12加入1mL1×樣品稀釋液Ⅰ,渦旋20s,取出100ml加到900ml1×樣品稀釋液Ⅰ,混勻后取100ml用于分析牛奶前處理方法8.13取1ml牛奶樣品到2ml離心管中;用1×樣品稀釋液Ⅱ稀釋30倍,混勻后取100ml用于分析奶粉前處理方法8.14準(zhǔn)確稱取0.3g奶粉樣品到7ml的聚苯乙烯離心管中;加入2ml1×樣品稀釋液Ⅲ,2ml正己烷,震蕩混勻8.154000r/min以上離心5min,去除有機層和中間層,取下層溶液100ml到300ml1×樣品稀釋液Ⅲ8.16混勻后取100ml用于分析9酶免分析步驟9.1實驗須知9.1.1實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時間約2小時?;販刂潦覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的極ng確度和準(zhǔn)確度。9.1.2使用后請立即將試劑放回2~8℃保存9.1.3請不要改變分析程序9.1.4請使用極ng確的微量移液器9.1.5操作一旦開始,請不要中斷任何程序9.1.6ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請嚴(yán)格按照要求操作9.1.7為避免交叉污染,每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9.1.8加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面9.2分析步驟9.2.1預(yù)先進(jìn)行編號,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測9.2.2取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)9.2.4在B0孔中加入50l0.0ug/L標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.5在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.6在各樣品孔中加入50l樣品溶液9.2.7在所有孔中加入50l的抗(Digoxin)抗體酶結(jié)合物9.2.8輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。9.337℃溫浴30min(溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)9.3.1甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。9.4反應(yīng)9.4.1洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50l顯色液A,再加50l顯色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之徹底混勻9.4.237℃溫浴10min9.4.3每孔中加入50l終止液,混勻9.4.4在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。10結(jié)果計算10.1定量分析10.1.1所獲得的每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以**個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00ug/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值10.1.2以(Digoxin)濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應(yīng)點的橫坐標(biāo),即為(Digoxin)濃度的對數(shù)值,求得反對數(shù)即為測定液中(Digoxin)濃度C(ug/L)10.1.3由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。10.2半定量測定10.1.1目測半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。10.1.2儀器半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。11特異性物質(zhì)交叉反應(yīng)(Digoxin)1**%12試劑盒參數(shù)本試劑盒檢測下限為0.01ug/LB0吸光度**值應(yīng)大于1.0試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8%,板間誤差小于15%。用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。13標(biāo)準(zhǔn)曲線模式(僅供參考)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0.01ug/L~1.35ug/L。14分析限制本試劑盒檢測為陽性的樣品應(yīng)該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。[詳細(xì)]
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