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使用Skyline 創(chuàng)建單克隆抗體的 MRM 方法
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本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編
2018-08-26 10:00 606閱讀次數(shù)
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本文向您介紹使用Skyline軟件和島津LCMS-8050/8060創(chuàng)建MRM方法,對生物樣品中的單克隆抗體進(jìn)行特異性檢測的分析示例。島津LCMS-8050/8060和Skyline軟件的組合使用,縮短定量分析方法的創(chuàng)建時(shí)間。
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使用Skyline 創(chuàng)建單克隆抗體的 MRM 方法
- 本文向您介紹使用Skyline軟件和島津LCMS-8050/8060創(chuàng)建MRM方法,對生物樣品中的單克隆抗體進(jìn)行特異性檢測的分析示例。島津LCMS-8050/8060和Skyline軟件的組合使用,縮短定量分析方法的創(chuàng)建時(shí)間。[詳細(xì)]
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2018-08-26 10:00
產(chǎn)品樣冊
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使用 Skyline 創(chuàng)建單克隆抗體的 MRM 方法
- 使用 Skyline 創(chuàng)建單克隆抗體的 MRM 方法[詳細(xì)]
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2024-09-30 17:32
期刊論文
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使用GamryCOM創(chuàng)建新的應(yīng)用
- IntroductionHerearethebasicstepsforcreatingabasicapplicationwithGamryCOM.OnthesecondpageareerrorcodesreportedbyGamryCOM.Pleaseseethedocumentationandotherexamplecodeformoreinformation.Thespecificsofeachstepanderrorsvarydependingontheprogrammingenvironmentused.[詳細(xì)]
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2018-08-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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使用QCM-D研究單克隆抗體的表面相互作用
- 使用QCM-D研究單克隆抗體的表面相互作用[詳細(xì)]
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2024-09-17 01:53
實(shí)驗(yàn)操作
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使用適用于 GC/TQ 的 Agilent MassHunter Optimizer 根據(jù) US EPA 方法 8270 進(jìn)行自動(dòng)化 MRM 方法開發(fā)
- 本應(yīng)用簡報(bào)展示了如何使用適用于 GC/TQ 的 Agilent MassHunter Optimizer 實(shí)現(xiàn)高度自動(dòng)化的整體多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 數(shù)據(jù)采集方法開發(fā)。即使在存在色譜干擾的情況下,用于 GC/TQ 的 Optimizer 也可以通過質(zhì)譜解卷積可靠地鑒定母離子。在開發(fā)MRM 數(shù)據(jù)采集方法時(shí),該工具可節(jié)省大量時(shí)間并減少手動(dòng)審查工作。采用與美國國家環(huán)境保護(hù)局 (EPA) 方法 8270 相關(guān)的 83 種化合物的混合物挑戰(zhàn)該工藝,并評估共流出物對 MRM 方法開發(fā)的影響。
Optimizer 工具的主要優(yōu)勢包括:
? 節(jié)省 MRM 方法的開發(fā)優(yōu)化時(shí)間
? 自動(dòng)完成并減少手工工作
? 重現(xiàn)性
? 從 GC/MSD 方法平穩(wěn)過渡至 GC/TQ
? 內(nèi)置審查工具[詳細(xì)]
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2020-11-19 16:03
應(yīng)用文章
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ELISA技術(shù)測定單克隆抗體效價(jià)方法
- 1.深入了解ELISA法測定抗體效價(jià)的原理?! ?.掌握ELISA法測定單克隆抗體效價(jià)的方法?! 《?shí)驗(yàn)原理 ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的GX催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種,其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進(jìn)行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗滌,這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系,也避免了末反應(yīng)的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA法中.酶促反應(yīng)只進(jìn)行一次,而抗原、抗體的免疫反應(yīng)可進(jìn)行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進(jìn)行免疫反應(yīng)?! ∧壳俺S玫膸追NELISA方法有:測定抗體的間接法,測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本實(shí)驗(yàn)采用間接法測定單克隆抗體效價(jià)。其主要過程為:首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板的凹孔內(nèi),加待測抗體,保溫后洗滌以除去未結(jié)合的雜蛋白質(zhì),加酶標(biāo)抗抗體,保溫后洗滌,加底物保溫30分鐘后,加酸或堿終止酶促反應(yīng),用目測或光電比色測定抗體含量?! ∪?、儀器、原料和試劑 儀器 聚苯乙烯96孔酶標(biāo)板、微量移液管、酶聯(lián)免疫閱讀儀、水浴鍋?! ≡稀 慰寺】贵w 試劑 1.抗原及酶標(biāo)記抗體 ?、倏乖和每谷薎gG(RabbitAanti-humanIgG,CodeNo.A0423); ②酶標(biāo)抗抗體:兔抗鼠IgG-HRP(RabbitAnti-mouseIgG-HRP,CodeNo.P0260);均為 DAKO公司產(chǎn)品,使用時(shí)按照說明書要求稀釋?! ?.洗滌液(含0.05%Tween20的PBS):1LPBS中加入Tween-20500μL?! ?.ELISA試劑盒封閉液(含1%牛血清白蛋白,0.1%Tween20的PBS):10mLPBS中加入100mgBSA,10μLTween-20。6.底物溶液 ?、倭姿徕c鹽緩沖液(0.1mol/LpH6.0):稱Na2HPO412H2O2.2g,NaH2PO42H2O6.84g,用蒸餾水溶解,定容至500mL。 ?、赥MB貯液:稱60mgTMB溶于10mL二甲基亞砜中,4℃避光保存。 ?、鄣孜飸?yīng)用液:現(xiàn)用現(xiàn)配,磷酸鈉緩沖液10mL,TNB貯液10μL。30%H2O215μL,混勻?! ?.終止液:2mol/LH2SO4 四、操作步驟 ?、倏乖唬和每谷薎gG作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應(yīng)板 中。4℃放置。 ?、谙礈欤捍稳諆A去凹孔內(nèi)的液體,洗滌液洗3次?! 、鄯忾]:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h?! 、芟礈欤河孟礈煲合?次。 ?、菁哟郎y樣品(一抗):將含單克降抗體的細(xì)胞培養(yǎng)上清在另塊板上用PBS連續(xù)稀釋(按照1:2或1:10),100μL/孔加到已包被的板上,每個(gè)樣品平行做兩份,PBS或空白培養(yǎng)基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒溫箱溫育1~2h?! 、尴礈欤河孟礈煲合?次。 ?、呒用笜?biāo)抗抗體:兔抗鼠IgG-HRP,用封閉液l:8000稀釋,100μL/孔,加蓋37℃恒溫箱溫育1h?! 、嘞礈欤河孟礈煲合?次,蒸餾水洗2次?! 、犸@色:ELISA試劑盒加新鮮配制的底物溶液100μL/孔,室溫暗處放置5~30min,顯示藍(lán)色。?、饨K止反應(yīng)、比色:加50μL/孔終止液.顏色變黃;用酶標(biāo)儀測定450nm處各孔的吸光值,陽性反應(yīng)的Zda稀釋度為待測樣品的效價(jià)。[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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布魯菌單克隆抗體乳膠凝集試驗(yàn)方法的建立
- 布魯菌單克隆抗體乳膠凝集試驗(yàn)方法的建立[詳細(xì)]
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2013-05-25 00:00
應(yīng)用文章
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使用適用于 GC/TQ 的 Agilent MassHunter Optimizer 針對大 麻中的農(nóng)藥進(jìn)行自動(dòng)化 MRM 方法開發(fā)
- 本應(yīng)用簡報(bào)展示了如何使用適用于 GC/TQ 的 Agilent MassHunter Optimizer 實(shí)現(xiàn)高度自動(dòng)化的端到端多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 數(shù)據(jù)采集方法開發(fā)。即使在存在色譜干擾的情況下,用于 GC/TQ 的 Optimizer 也可以通過質(zhì)譜解卷積可靠地鑒定母離子。在開發(fā)MRM 數(shù)據(jù)采集方法時(shí),該工具可節(jié)省大量時(shí)間并減少手動(dòng)審查工作。使用美國加利福尼亞州和加拿大規(guī)定的 25 種與相關(guān)的農(nóng)藥混合物測試該流程。
Optimizer 工具的主要優(yōu)勢包括:
? 節(jié)省 MRM 方法的開發(fā)優(yōu)化時(shí)間
? 可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化并減少手動(dòng)工作
? 重現(xiàn)性
? 從 GC/MSD 方法平穩(wěn)過渡至 GC/TQ
? 內(nèi)置審查工具[詳細(xì)]
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2020-11-19 16:00
應(yīng)用文章
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采用Empower樣品組生成器自動(dòng)創(chuàng)建色譜方法進(jìn)行方法驗(yàn)證
- 采用Empower樣品組生成器自動(dòng)創(chuàng)建色譜方法進(jìn)行方法驗(yàn)證[詳細(xì)]
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2024-09-27 23:50
選購指南
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nSMOL前處理技術(shù)結(jié)合Skyline軟件
- 本文利用nSMOL前處理試劑包結(jié)合Skyline軟件,加速抗體藥物L(fēng)CMS方法開發(fā)過程,僅在一個(gè)工作日就可以完成單個(gè)抗體藥物L(fēng)CMS方法的初步優(yōu)化。實(shí)例中貝伐珠單抗共篩選出9個(gè)肽段具有典型色譜峰,其中4條肽段與貝伐珠單抗的Fab區(qū)域相關(guān),并且這4條Fab區(qū)域的肽段響應(yīng)遠(yuǎn)高于其他肽段;曲妥珠單抗共有10個(gè)肽段具有典型色譜峰,其中8條肽段與曲妥珠單抗的Fab區(qū)域相關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明,利用nSMOL技術(shù)可以選擇性酶解Fab區(qū)域,從而降低抗體藥物定量肽段開發(fā)的復(fù)雜性。[詳細(xì)]
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2018-08-26 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Sequence Wizard輕松創(chuàng)建復(fù)雜的測試序列
- Formoreflexibility,GamryInstrumentsenablestheuserseveralwaystoperformelectrochemicalmeasurements.Theusercanchosefromavarietyofpre-builttechniqueswhicharesubordinatedinspecificgroupsintheFrameworksoftware.Inaddition,Gamry’sconceptof“OpenSourceScripting”allowstheusertomodifytheexperiment’sscriptsourceandtocustomizeexperiments.Forcombiningsingleexperiments,theSequenceWizardcanbeusedwhichisthesubjectofthisapplicationnote.TheSequenceWizardhastheadvantagethatcomplexmeasurementsequencescanbeeasilycreatedbyusingadraganddropapproach.Inthiswaycustomizedexperimentscanbeexecutedconsecutivelywithoutinterferingdisruptions.[詳細(xì)]
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2018-08-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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恒遠(yuǎn)告訴您關(guān)于單克隆抗體的應(yīng)用
- 本公司主營的產(chǎn)品有:試劑盒,生物試劑,血清,細(xì)胞,標(biāo)準(zhǔn)品與對照品,抗體等多種試劑,抗體的規(guī)格為:0.1ml,0.2ml單克隆抗體問世以來,由于其獨(dú)有的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:一、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù),并且單克隆抗體的應(yīng)用很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。目前,應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測;②腫瘤抗原的檢測;③免疫細(xì)胞及其亞群的檢測;④激素測定;⑤細(xì)胞因子的測定。單克隆抗體對抗原的識別,與多克隆抗體有很大的不同。不同試劑盒因使用的單克隆抗體不同,識別抗原的位點(diǎn)不同,導(dǎo)致檢測結(jié)果有一定差異。因此,標(biāo)準(zhǔn)化問題還需要進(jìn)一步研究。二、蛋白質(zhì)的提純單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個(gè)惰性的固相基質(zhì)(如Separose2B、4B、6B等)上,并制備成層析柱。當(dāng)樣品流經(jīng)層析柱時(shí),待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強(qiáng)度或pH,欲分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。三、小分子抗體的應(yīng)用將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將化療藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官,直接殺傷靶細(xì)胞,稱為腫瘤導(dǎo)向ZL。另外,將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)可進(jìn)行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。小分子抗體是分子量較小但具有抗原結(jié)合功能的分子片段。它有以下獨(dú)特的優(yōu)勢:分子量小,穿透性強(qiáng),抗原性低;由于不含F(xiàn)c段,不會(huì)與帶有Fc段受體的細(xì)胞結(jié)合,不良反應(yīng)少;半衰期短,有利于及時(shí)中和及清除毒素;另外,可在原核系統(tǒng)表達(dá)及易于基因工程操作。四、抗體融合蛋白的應(yīng)用1,腫瘤的體內(nèi)顯像診斷單鏈抗體排除速度快,穿透力強(qiáng),因此在腫瘤組織中的分布指數(shù)較完整抗體分子高。在放射顯像時(shí),放射性核素排除較快,對身體危害程度小,顯像的本底較低,因此是較為理想的顯像定位診斷載體,為腫瘤的診斷提供了新的途徑。2.病毒的診斷和抗病毒感染單鏈抗體為醫(yī)學(xué)上某些至今難以ZL的疾病如病毒病的診斷和ZL提供了新的、GX的免疫制劑。因此用于免疫ZL和診斷顯得尤為重要血液性疾病的診斷抗人白血病單鏈抗體可用于白血病的免疫診斷及分型。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司長期供應(yīng):進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體。更多咨詢歡迎您的來電洽談。[詳細(xì)]
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2024-09-27 23:50
產(chǎn)品樣冊
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MA373_單克隆抗體中氨基酸分析
- MA373_單克隆抗體中氨基酸分析[詳細(xì)]
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2016-07-21 00:00
課件
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兔抗人BP180單克隆抗體
- www.biokanu.com兔抗人BP180單克隆抗體產(chǎn)品編號:QD82416規(guī)格:20ug形式:0.1ml,濃縮型反應(yīng)種屬:人。鼠,等其他種屬未做過相應(yīng)的檢測抗體類型:兔抗人BP180單克隆抗體理化特性:透明溶液,50%油,PBS,pH=7.4±0.1。產(chǎn)品使用濃度:0.5ug-2ug/ml產(chǎn)品應(yīng)用本抗體適用于IH/WB/ELISA。本抗體根據(jù)需要再進(jìn)行稀釋。保存條件:試劑需在-20℃避光條件下進(jìn)行保存。每次使用后,應(yīng)立即放回冰箱進(jìn)行保存。本產(chǎn)品的保質(zhì)期為12個(gè)月。配制成即用型的試劑在4℃避光條件下進(jìn)行保存。如果試劑不是按產(chǎn)品說明書的條件儲存,可能影響其使用效果。本抗體僅供研究使用,不用于臨床診斷。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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山羊抗兔prx-2單克隆抗體
- www.biokanu.com山羊抗兔prx-2單克隆抗體產(chǎn)品編號:QD823412規(guī)格:20ug形式:0.1ml,濃縮型反應(yīng)種屬:人。大鼠,小鼠,豚鼠等其余種屬未做過相應(yīng)的檢測免疫原:重組prx-2抗體類型:山羊抗prx-2單克隆抗體理化特性:透明溶液(顏色微黃),50%甘,PBS,pH=7.4±0.1。產(chǎn)品使用濃度:0.5ug-2ug/ml產(chǎn)品應(yīng)用本抗體適用于IH/WB/ELISA。本抗體根據(jù)需要用0.01MPBS進(jìn)行稀釋。注:本抗體用于ELISA包被之前,必須使用本公司生產(chǎn)的酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板。酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板的方法:用1%的Na2HPO4將酶標(biāo)專用試劑稀釋200倍,加入到空白酶標(biāo)板內(nèi)(100ul/孔),室溫夜,甩干后立即加入用0.01MPBS稀釋的包被抗體,再室溫夜,之后即可加入封閉液(0.1%BSAin0.01MTBS)。保存條件:試劑需在-20℃避光條件下進(jìn)行保存。每次使用后,應(yīng)立即放回-20℃冰箱進(jìn)行保存。本產(chǎn)品(濃縮型)的保質(zhì)期為12個(gè)月。即用型的試劑,使用時(shí)臨時(shí)配制,4℃避光條件下進(jìn)行保存(Z長不要超過2小時(shí))。如果試劑不是按產(chǎn)品說明書的條件儲存,可能影響其使用效果。本產(chǎn)品開啟之前必須離心,2000rpm5分鐘。僅供研究使用,不用于臨床診斷。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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山羊抗兔PPAR-δ單克隆抗體
- www.biokanu.com山羊抗兔PPAR-δ單克隆抗體產(chǎn)品編號:QD823496規(guī)格:20ug形式:0.1ml,濃縮型反應(yīng)種屬:人。大鼠,小鼠,豚鼠等其余種屬未做過相應(yīng)的檢測免疫原:重組PPAR-δ抗體類型:山羊抗PPAR-δ單克隆抗體理化特性:透明溶液(顏色微黃),50%甘,PBS,pH=7.4±0.1。產(chǎn)品使用濃度:0.5ug-2ug/ml產(chǎn)品應(yīng)用本抗體適用于IH/WB/ELISA。本抗體根據(jù)需要用0.01MPBS進(jìn)行稀釋。注:本抗體用于ELISA包被之前,必須使用本公司生產(chǎn)的酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板。酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板的方法:用1%的Na2HPO4將酶標(biāo)專用試劑稀釋200倍,加入到空白酶標(biāo)板內(nèi)(100ul/孔),室溫夜,甩干后立即加入用0.01MPBS稀釋的包被抗體,再室溫夜,之后即可加入封閉液(0.1%BSAin0.01MTBS)。保存條件:試劑需在-20℃避光條件下進(jìn)行保存。每次使用后,應(yīng)立即放回-20℃冰箱進(jìn)行保存。本產(chǎn)品(濃縮型)的保質(zhì)期為12個(gè)月。即用型的試劑,使用時(shí)臨時(shí)配制,4℃避光條件下進(jìn)行保存(Z長不要超過2小時(shí))。如果試劑不是按產(chǎn)品說明書的條件儲存,可能影響其使用效果。本產(chǎn)品開啟之前必須離心,2000rpm5分鐘。僅供研究使用,不用于臨床診斷。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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山羊抗兔C-SKI單克隆抗體
- www.biokanu.com山羊抗兔C-SKI單克隆抗體產(chǎn)品編號:QD823459規(guī)格:20ug形式:0.1ml,濃縮型反應(yīng)種屬:人。大鼠,小鼠,豚鼠等其余種屬未做過相應(yīng)的檢測免疫原:重組C-SKI抗體類型:山羊抗C-SKI單克隆抗體理化特性:透明溶液(顏色微黃),50%甘,PBS,pH=7.4±0.1。產(chǎn)品使用濃度:0.5ug-2ug/ml產(chǎn)品應(yīng)用本抗體適用于IH/WB/ELISA。本抗體根據(jù)需要用0.01MPBS進(jìn)行稀釋。注:本抗體用于ELISA包被之前,必須使用本公司生產(chǎn)的酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板。酶標(biāo)專用試劑來處理空白酶標(biāo)板的方法:用1%的Na2HPO4將酶標(biāo)專用試劑稀釋200倍,加入到空白酶標(biāo)板內(nèi)(100ul/孔),室溫夜,甩干后立即加入用0.01MPBS稀釋的包被抗體,再室溫夜,之后即可加入封閉液(0.1%BSAin0.01MTBS)。保存條件:試劑需在-20℃避光條件下進(jìn)行保存。每次使用后,應(yīng)立即放回-20℃冰箱進(jìn)行保存。本產(chǎn)品(濃縮型)的保質(zhì)期為12個(gè)月。即用型的試劑,使用時(shí)臨時(shí)配制,4℃避光條件下進(jìn)行保存(Z長不要超過2小時(shí))。如果試劑不是按產(chǎn)品說明書的條件儲存,可能影響其使用效果。本產(chǎn)品開啟之前必須離心,2000rpm5分鐘。僅供研究使用,不用于臨床診斷。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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非對稱場流分離系統(tǒng)制備單克隆抗體
- 非對稱場流分離系統(tǒng)制備單克隆抗體[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:57
產(chǎn)品樣冊
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TSK-GEL液相色譜柱在單克隆抗體分離中的應(yīng)用
- TSK-GEL液相色譜柱在單克隆抗體分離中的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2016-02-03 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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單克隆抗體 N-糖基化的毛細(xì)管電泳和質(zhì)譜分析
- 糖基化是Z重要的一種翻譯后修飾,指的是將糖基部分連接到蛋白質(zhì)上。糖基化模式的 改變對免疫原性和整體生物活性有很大影響。因此,糖基化表征對基于生物醫(yī)藥的應(yīng)用 至關(guān)重要。雖然現(xiàn)在已有多種分析技術(shù)被應(yīng)用于分析 N-糖基化,但低水平糖基化的極ng確 測定仍面臨著極大的挑戰(zhàn)。 本應(yīng)用簡報(bào)展示了利用毛細(xì)管電泳和質(zhì)譜 (CEMS) 對重組單克隆抗體 (mAb) 糖基化進(jìn)行分 析。此方法包括利用 N-糖苷酶 F (PNGase F) 酶解 mAb 得到多糖,對多糖進(jìn)行熒光標(biāo)記 (8-氨基吡-1,3,6-三磺酸三鈉鹽,ATPS),并利用 Agilent 7100 CE 串聯(lián) Agilent 6520 精 確質(zhì)量 Q-TOF LC/MS 進(jìn)行分析。從使用的重組 mAb 中,我們共鑒定出 7 種多糖,從 每種多糖成分的相對百分比可知,主要及次要糖基化修飾均有存在。本應(yīng)用簡報(bào)證明了 高分離速度的 CE 與高靈敏度檢測限的 MS 相結(jié)合,使 CE-MS 成為一種替代 LC/MS 方 法對 mAb 或其它糖蛋白進(jìn)行糖基化表征的有效且Z有前景的方法。[詳細(xì)]
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2020-05-09 10:44
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