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葉綠素分析方法
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本文由 斯卡拉分析儀器(上海)有限公司 整理匯編
2024-09-15 22:05 1715閱讀次數(shù)
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葉綠素分析方法
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(zhǔn)確稀釋而造成濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液。若需要分次使用標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按照每一次用量分裝,將其放在-20~-80℃貯存。避免反復(fù)凍融。7.顯色時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如每隔5分鐘),如梯度已很明顯,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免顏色過深影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。8.底物:底物請避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。9.混勻:充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,**使用微量振蕩器(使用Zdi頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。10.安全:試驗(yàn)中請穿著實(shí)驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時(shí),請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條例執(zhí)行。11.不同批號(hào)的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)12.試驗(yàn)中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁混用,否則將影響試驗(yàn)結(jié)果!結(jié)果判斷:1.以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。如有設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curveexpert1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。3.若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計(jì)算濃度時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。靈敏度、檢測范圍、特異性和重復(fù)性:●靈敏度:Z小可測2pg/mL?!駲z測范圍:285pg/mL?!裉禺愋裕嚎蓹z測重組或天然的原脫植基葉綠素(PCHLIDE),且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)?!裰貜?fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均<10%。聲明1.限于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平,尚不能對所有原料進(jìn)行全面的鑒定分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的待測樣品。3.只有全部使用試劑盒內(nèi)的試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到**的檢測結(jié)果。4.有效期:6個(gè)月。5.本操作說明同樣適用于48T試劑盒。[詳細(xì)]
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植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2pg/mL-85pg/mL使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中原脫植基葉綠素含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物原脫植基葉綠素水平。用純化的植物原脫植基葉綠素抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物原脫植基葉綠素,再與HRP標(biāo)記的原脫植基葉綠素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物原脫植基葉綠素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物原脫植基葉綠素濃度。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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葉綠素?zé)晒鉁y量技術(shù)產(chǎn)品概覽
- 葉綠素?zé)晒獠粌H能反映光能吸收、激發(fā)能傳遞和光化學(xué)反應(yīng)等光合作用的原初反應(yīng)過程,而且與電子傳遞、質(zhì)子梯度的建立及ATP合成和CO2固定等過程有關(guān)。是研究光合作用的探針。通過葉綠素?zé)晒鉁y量技術(shù),可以快速、靈敏、準(zhǔn)確地獲得眾多葉綠素?zé)晒鈪?shù),這些參數(shù)反映植物、藻類等測量目標(biāo)的光合效率。而葉綠素?zé)晒獬上駝t將葉綠素?zé)晒鉁y量代入二維成像時(shí)代。該技術(shù)已經(jīng)大量應(yīng)用于植物、藻類研究的各個(gè)領(lǐng)域,包括表型組學(xué)、遺傳育種、病蟲害、脅迫檢測、光合生理研究、基因功能鑒定、突變體篩選、園藝研究等。
易科泰擁有一系列不同型號(hào)的葉綠素?zé)晒鉁y量設(shè)備,所有型號(hào)均具備完備的自動(dòng)測量程序,獲得上百個(gè)熒光參數(shù)及對應(yīng)的熒光動(dòng)力學(xué)曲線,同時(shí)具備高分辨率CCD相機(jī)的成像系統(tǒng)還可輸出每個(gè)參數(shù)的成像圖,支持測量程序自定義,滿足各種用戶需求。[詳細(xì)]
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2024-09-12 00:37
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