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2024-09-29 07:55 312閱讀次數(shù)

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  葉綠素測(cè)定儀/植物葉綠素檢測(cè)儀型號(hào):HAD-YL6綠素測(cè)定儀可以即時(shí)測(cè)量植物的葉綠素相對(duì)含量或“綠色程度”，植物葉片中的葉綠素含量指示了植物本身的狀況，長(zhǎng)勢(shì)良好的植物的葉子會(huì)含有更多的葉綠素，葉綠素的含量與葉片中氮的含量有很密切的關(guān)系，因而葉綠素測(cè)量值還能說(shuō)明植物真實(shí)的硝基需求量，通過(guò)這種儀器有利于合理施加氮肥，提高氮的利用率，并可保護(hù)環(huán)境（防止施加過(guò)多的氮肥而使環(huán)境特別是水源受到污染）測(cè)量原理：葉綠素測(cè)定儀通過(guò)測(cè)量葉片在兩種波長(zhǎng)范圍內(nèi)的透光系數(shù)來(lái)確定葉片當(dāng)前葉綠素的相對(duì)數(shù)量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長(zhǎng)光的兩個(gè)波長(zhǎng)區(qū)域，根據(jù)葉片透射光的量來(lái)計(jì)算測(cè)量值。技術(shù)參數(shù)：功能特點(diǎn)測(cè)量時(shí)間快速LCD直接顯示葉綠素值儀器小巧便攜，可隨身攜帶到野外測(cè)量測(cè)量樣品各種植物葉片測(cè)量面積Ф10mm測(cè)量方式2波長(zhǎng)光學(xué)濃度差方式感應(yīng)器硅半導(dǎo)體光電二極管顯示方式測(cè)量值：3位數(shù)液晶顯示測(cè)量次數(shù)：2位數(shù)液晶顯示測(cè)量的Z小間隔小于2秒測(cè)量范圍0.0-99.9SPAD精度±1.0SPAD(室溫下，SPAD值介乎0-50)重復(fù)性±0.2SPAD單位以內(nèi)(SPAD值介乎0-50)重現(xiàn)性±0.5SPAD單位以內(nèi)(SPAD值介乎0-50)操作溫度0～50℃儲(chǔ)存溫度-20~～55℃數(shù)據(jù)存儲(chǔ)SD卡存儲(chǔ)：2G電源充電鋰電池待機(jī)時(shí)間充一次電正常情況可用七天[詳細(xì)]

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  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• FluorCam 葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)在國(guó)內(nèi)的應(yīng)用

  FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)應(yīng)用案例（第四期）FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)在國(guó)內(nèi)的應(yīng)用FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)作為Z早實(shí)用化的葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)，是目前世界上Zquan威、使用范圍Z廣、種類Z全面、發(fā)表論文Z多的葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)。FluorCam已經(jīng)發(fā)展出十幾個(gè)型號(hào)，涵蓋了從葉綠體、單個(gè)細(xì)胞、微藻到葉片、果實(shí)、花朵，乃至整株植物和植物灌層，幾乎可以測(cè)量所有的植物樣品，甚至包括含有葉綠素的微生物和動(dòng)物。易科泰Ecolab生態(tài)實(shí)驗(yàn)室總結(jié)了FluorCam相關(guān)SCI參考文獻(xiàn)近500篇，可聯(lián)系Ecolab生態(tài)實(shí)驗(yàn)室（eco-lab@eco-tech.com.cn,info@eco-lab.cn）索取文獻(xiàn)目錄及全文。了解FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)詳情請(qǐng)點(diǎn)擊以下鏈接：FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)Z早在21世紀(jì)初引進(jìn)到國(guó)內(nèi)，但一直到2010年后國(guó)內(nèi)的科學(xué)家才在國(guó)際交流中逐漸發(fā)現(xiàn)這項(xiàng)技術(shù)的巨大價(jià)值，在短短數(shù)年中也利用這一技術(shù)發(fā)表了幾十篇高水平SCI文獻(xiàn)。本期主要介紹目前FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)在國(guó)內(nèi)的應(yīng)用情況。一、植物光合生理研究葉綠素?zé)晒饪梢灾苯臃磻?yīng)植物光系統(tǒng)的生理狀況，因此從葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)發(fā)明之初，就被用于各種植物光合生理研究。山東農(nóng)科院使用FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)研究了小麥旗葉與外露花梗光合能力的差異[1]。研究中發(fā)現(xiàn)在小麥生長(zhǎng)前中期，旗葉與外露花梗的Zda光化學(xué)效率Fv/Fm和量子產(chǎn)額ΦPSII基本相同。但在生長(zhǎng)后期，旗葉的光合能力顯著下降，而花梗光合能力的下降幅度要小于旗葉（圖1）。這證明了在生長(zhǎng)后期的灌漿期，花梗對(duì)維持籽粒的生長(zhǎng)更為重要。之后，他們又研究了小麥葉片和穎片季節(jié)衰老過(guò)程中以及穎果發(fā)育過(guò)程中光合特性的變化[2；3，圖2]。圖1.不同生長(zhǎng)階段的旗葉（A，C）和外露花梗（B，D）的Fv/Fm（A，B）和ΦPSII（C，D）典型葉綠素?zé)晒獬上駡D圖2.不同生長(zhǎng)期小麥葉片和穎片的Zda光化學(xué)效率Fv/Fm（A）、量子產(chǎn)額ΦPSII（B）和非光化學(xué)淬滅NPQ（C）的變化二、植物生物/非生物逆境脅迫與抗逆性研究由于幾乎所有種類的生物/非生物逆境脅迫都會(huì)影響到植物光合系統(tǒng)的正常生理功能，而葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)是公認(rèn)的植物逆境光合功能研究Z靈敏的無(wú)損探針。因此通過(guò)FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)不但能反映植物受脅迫程度和抗逆能力的差異，而且能指明脅迫影響光合系統(tǒng)的具體機(jī)理過(guò)程。1.養(yǎng)分虧缺山東農(nóng)業(yè)大學(xué)使用FluorCam研究了兩種玉米在不同施氮條件下光合特性的變化[4]。研究發(fā)現(xiàn)，施加氮肥使兩個(gè)品種的Zda光化學(xué)效率Fv/Fm和量子產(chǎn)額ΦPSII都有所升高，而ΦPSII的升高幅度要高于Fv/Fm，表明氮肥對(duì)PSII的實(shí)際功能活性更有作用。同時(shí)玉米品種HZ4熒光參數(shù)的升高幅度也要高于Q319，這應(yīng)該是由于HZ4是一種低N效率的非持綠玉米（圖3）。圖3.氮對(duì)兩種玉米品種造成影響的葉綠素?zé)晒獬上駡D2.鹽堿脅迫山東農(nóng)業(yè)大學(xué)使用FluorCam研究發(fā)現(xiàn)S-adenosyl-L-methionine(SAM)基因過(guò)表達(dá)會(huì)顯著增加在堿脅迫下的番茄的光合能力[5]（圖4）。圖4.野生型和轉(zhuǎn)基因番茄葉片在堿脅迫下的Fv/Fm熒光成像圖3.水分脅迫山東農(nóng)科院研究了不同灌溉方式對(duì)小麥光合特性的影響[6]。研究發(fā)現(xiàn)比起傳統(tǒng)的漫灌，溝灌條件下的小麥葉片有更高的Zda光化學(xué)效率Fv/Fm、量子產(chǎn)額ΦPSII、光化學(xué)淬滅qP和更低的非光化學(xué)淬滅NPQ（圖5）。這說(shuō)明溝灌給小麥提供了更好的土壤水分條件，從而使小麥葉片擁有了更強(qiáng)的光化學(xué)活性。圖5.傳統(tǒng)漫灌和溝灌條件下小麥的Fv/Fm、ΦPSII、qP和NPQ熒光成像圖國(guó)內(nèi)還有其他院校使用FluorCam開(kāi)展了熱脅迫、病害、重金屬毒害、光質(zhì)影響等多種脅迫研究[7；8；9；10]。三、植物光合基因組學(xué)與分子生物學(xué)研究植物光合作用可以說(shuō)是植物對(duì)人類乃至整個(gè)生物圈Z重要的功能，一方面為其他生物直接或間接地提供能量和食物，另一方面也在地球碳氧循環(huán)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。因此，對(duì)植物光合作用功能基因的研究，一直是植物基因組學(xué)與分子生物學(xué)研究的重中之重。而葉綠素?zé)晒饽苤苯臃从诚嚓P(guān)功能基因的表型變化，所以幾乎所有與光合基因相關(guān)的研究都要用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)來(lái)進(jìn)行表型篩選、基因功能驗(yàn)證等方面的工作。1.從光合表型到基因功能ZG科學(xué)院植物研究所張立新研究員是Z早將FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)引入國(guó)內(nèi)的科學(xué)家。中科院植物所光生物學(xué)ZD實(shí)驗(yàn)室是國(guó)內(nèi)植物光合基因相關(guān)研究Z前沿的科研單位。FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)引入后就立刻用于了光合相關(guān)基因功能與表型研究。2006年，張立新研究團(tuán)隊(duì)就使用FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)研究了擬南芥ppt1突變體光系統(tǒng)II光化學(xué)能力的變化，進(jìn)而證明了磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對(duì)維持葉片生長(zhǎng)后期正常光合作用的重要性[11]（圖6）。之后，植物所張立新團(tuán)隊(duì)和彭連偉團(tuán)隊(duì)都使用FluorCam發(fā)表了多篇植物光合基因相關(guān)文獻(xiàn)[12；13]。彭連偉在研究NADH脫氫酶復(fù)合體穩(wěn)定性時(shí)[14]，發(fā)現(xiàn)在50molphotons/m.s的光強(qiáng)下，lhca5lhca6pgr5、lhca6pgr5和crr4-2pgr5擬南芥突變體都產(chǎn)生了生長(zhǎng)阻滯，并表現(xiàn)出了高葉綠素?zé)晒猓▓D7A，B）。這表明了這些突變體的光合電子傳遞活性和NDH活性都受到了YZ。進(jìn)一步分析不同光強(qiáng)下的ΦPSII，野生型、lhca5和lhca6突變體的ΦPSII水平是相近的，這表明Lhca5和Lhca6在光合電子傳遞中都不是必需的（圖7C）。而lhca6pgr5和lhca5lhca6pgr5的ΦPSII水平則顯著降低，通過(guò)其他結(jié)果比對(duì)發(fā)現(xiàn)這是由于在低光照條件下，這些突變體的PSI就受到了光YZ并出現(xiàn)了氧化應(yīng)激反應(yīng)。在后續(xù)的研究中，彭連偉團(tuán)隊(duì)還使用FluorCam發(fā)現(xiàn)了NdhV亞基對(duì)NADH脫氫酶復(fù)合體穩(wěn)定性的重要作用[15]。其團(tuán)隊(duì)的張琳博士利用FluorCam封閉式熒光成像系統(tǒng)，從T-DNA插入或EMS誘變的擬南芥突變體庫(kù)中篩選光合電子傳遞調(diào)控的突變體，并ZD研究了bfa3的功能，相關(guān)結(jié)果于2016年4月發(fā)表在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊PlantPhysiology[16]。憑借這一科研發(fā)現(xiàn)，張琳博士榮獲易科泰FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裾撐囊坏泉?jiǎng)。圖6.ppt1突變體和野生型的表型和葉綠素?zé)晒獬上駡D圖7.lhca5lhca6pgr5三突變體葉綠素?zé)晒夥治觯珹.可見(jiàn)表型；B.葉綠素?zé)晒獗硇?；C.ΦPSII測(cè)量國(guó)內(nèi)另一個(gè)應(yīng)用FluorCam技術(shù)進(jìn)行光合基因研究較為出色的單位是西北農(nóng)林科技大學(xué)。他們引進(jìn)儀器技術(shù)雖然較晚，但在購(gòu)置FluorCam開(kāi)放式葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)后很快就發(fā)表了2篇高水平文章，研究了多個(gè)關(guān)于擬南芥葉綠體發(fā)育和葉片顏色相關(guān)的基因功能[17；18]（圖8）。圖8.擬南芥野生型與GTPase家族基因突變株的葉綠素?zé)晒獬上駡D上海生命科學(xué)研究院青年研究組長(zhǎng)、博士生導(dǎo)師ChanhongKim在蘇黎世聯(lián)邦理工學(xué)院、康奈爾大學(xué)博伊斯湯普森研究所工作期間就已經(jīng)使用FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)進(jìn)行了大量的研究工作并在PNAS、PlantCell發(fā)表多篇相關(guān)文獻(xiàn)。2014年，ChanhongKim到上海生命科學(xué)研究院工作后立刻購(gòu)置了一臺(tái)FluorCam封閉式葉綠素?zé)晒?GFP成像系統(tǒng)。他用這一系統(tǒng)一方面進(jìn)行GFP表達(dá)植株的快速篩選（圖9），另一方面進(jìn)行單線態(tài)氧和EXECUTER1介導(dǎo)信號(hào)在基粒中發(fā)生過(guò)程的研究，這一Zxin研究成果發(fā)表同樣在2016年P(guān)NAS上[19]。沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)也使用FluorCam技術(shù)開(kāi)展了大白菜生長(zhǎng)緩慢、類囊體減少的突變體光和特性的研究[20]。2.從基因功能到光合表型在有的研究中，光合基因功能是通過(guò)其他方法基本上確定的。但這個(gè)基因表達(dá)出的表型是否符合預(yù)期，還是必須通過(guò)FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)進(jìn)行光合表型方面的驗(yàn)證。ZG農(nóng)業(yè)大學(xué)與易科泰生態(tài)技術(shù)有限公司EcoLab生態(tài)實(shí)驗(yàn)室合作，從黃瓜中克隆了紫黃質(zhì)脫環(huán)氧化酶基因（CsVDE），再將這一基因的反義片段轉(zhuǎn)基因到擬南芥中[21]。發(fā)現(xiàn)在高光脅迫條件下，轉(zhuǎn)基因擬南芥的葉綠素?zé)晒鈪?shù)非光化學(xué)淬滅（NPQ）比野生型顯著降低，這證明了CsVDE在葉黃素循環(huán)和PSII光YZ敏感性上的重要作用（圖10）。圖10.野生型與轉(zhuǎn)基因擬南芥在高光條件下的NPQ成像圖圖9.使用FluorCam獲得的GFP成像圖，圖中發(fā)出明亮顏色的擬南芥植株即為表達(dá)了GFP的植株，其顏色越偏向紅色，則表明其表達(dá)的GFP更多，暗藍(lán)色的植株即為沒(méi)有表達(dá)GFP的植株四、國(guó)際合作由于FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)引進(jìn)到國(guó)內(nèi)的時(shí)間較晚，國(guó)內(nèi)科學(xué)家對(duì)這一技術(shù)的運(yùn)用程度還低于歐美同行。因此，很多國(guó)內(nèi)的科學(xué)家目前是與國(guó)際上的知名科研院所開(kāi)展合作，使用FluorCam進(jìn)行研究工作并發(fā)表文章。比如浙江大學(xué)與德國(guó)康斯坦茨大學(xué)合作發(fā)表的使用FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)（此系統(tǒng)應(yīng)用了FluorCam顯微成像技術(shù)，康斯坦茨大學(xué)Kupper教授和PSI公司合作完善了這一技術(shù)，是國(guó)際上對(duì)這一技術(shù)應(yīng)用Z前沿的學(xué)者）研究了銅對(duì)海州香薷Elsholtziasplendens光合系統(tǒng)的毒害作用[22]；華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、江西農(nóng)業(yè)大學(xué)與德國(guó)洪堡大學(xué)等單位合作研究了病毒介導(dǎo)的豌豆基因沉默對(duì)四吡咯生物合成、葉綠體發(fā)育等造成的影響[23]；內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)與捷克科學(xué)院等單位合作研究的芽單胞菌門含有葉綠體的稀有細(xì)菌的光合特性和相關(guān)基因研究[24；25]；江蘇農(nóng)科院與英國(guó)諾丁漢大學(xué)合作研究的兩種病原菌對(duì)不同小麥品系的侵害性[26]等。參考文獻(xiàn)：1.KongLA,etal.2010.Thestructuralandphotosyntheticcharacteristicsoftheexposedpeduncleofwheat(TriticumaestivumL.):animportantphotosynthatesourceforgrainfil領(lǐng).BMCplantbiology10,1412.KongLA,etal.2015.Photochemicalandantioxidativeresponsesoftheglumeandflagleaftoseasonalsenescenceinwheat.FrontiersinPlantScience,6:358.doi:10.3389/fpls.2015.003583.KongLA,etal.2016.Comparisonofthephotosyntheticcharacteristicsinthepericarpandflagleavesduringwheat(TriticumaestivumL.)caryopsisdevelopment.Photosynthetica54(1),40-464.Li,G.etal.2012.Effectsofnitrogenonphotosyntheticcharacteristicsofleavesfromtwodifferentstay-greencorn(ZeamaysL.)varietiesatthegrain-fil領(lǐng)stage.Can.J.PlantSci.92,671-6805.Gong,B.etal.2014.OverexpressionofS-adenosyl-L-methioninesynthetaseincreasedtomatotolerancetoalkalistressthroughpolyaminemetabolism.PlantBiotechnologyJournal,12,6947086.KongLA,etal.2010.Arootzonesoilregimeofwheat:physiologicalandgrowthresponsestofurrowirrigationinraisedbedplantinginNorthernChina.AgronomyJournal102,1541627.FengB.etal.2014.EffectofHeatStressonthePhotosyntheticCharacteristicsinFlagLeavesattheGrainFil領(lǐng)StageofDifferentHeatResistantWinterWheatVarieties.JournalofAgronomyandCropScience200(2),1431558.周錦業(yè)，丁國(guó)昌，何荊洲，曹光球，李秀玲，卜朝陽(yáng).2015.不同光質(zhì)對(duì)金線蓮組培苗葉綠素含量及葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響.農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)5(5)，67-729.簡(jiǎn)敏菲，汪斯琛，余厚平，李玲玉，簡(jiǎn)美鋒，余guan軍．2016.Cd2+?Cu2+脅迫對(duì)黑藻（Hydrillaverticillata）的生長(zhǎng)及光合熒光特性的影響.生態(tài)學(xué)報(bào)36(6)10.鄭國(guó)華,潘東明,牛先前&方樹(shù)民.2010.冰核細(xì)菌對(duì)低溫脅迫下枇杷光合參數(shù)和葉綠素?zé)晒鈪?shù)的影響.ZG生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)18(6)，1251125511.MaJF,GuoJK,PengLW,ChenCY&ZhangLX,2006.DecreaseofphotosystemiiphotochemistryinArabidopsisppt1mutantisdependentonleafage.Journalofintegrativeplantbiology48,1409141412.SunXW,WangLY&ZhangLX,2007.InvolvementofDEG5andDEG8proteasesintheturnoverofthephotosystemIIreactioncenterD1proteinunderheatstressinArabidopsisthaliana.ChineseScienceBulletin52,1742174513.ChiW,etal.2008.ThepentratricopeptiderepeatproteinDELAYEDGREENING1isinvolvedintheregulationofearlychloroplastdevelopmentandchloroplastgeneexpressioninArabidopsis.Plantphysiology147,57358414.PengL,&Shikanai,T.2011.SupercomplexformationwithphotosystemIisrequiredforthestabilizationofthechloroplastNADHdehydrogenaselikecomplexinArabidopsis.Plantphysiology155,1629163915.FanX,etal.2015.TheNdhVsubunitisrequiredtostabilizethechloroplastNADHdehydrogenase-likecomplexinArabidopsis.ThePlantJournal,82,22123116.ZhangL,etal.2016.BiogenesisFactorRequiredForATPSynthase3FacilitatesAssemblyoftheChloroplastATPSynthaseComplex.PlantPhysiology171,1291-130617.QiY,etal.2016.APutativeChloroplastThylakoidMetalloproteaseVIRESCENT3RegulatesChloroplastDevelopmentinArabidopsisthaliana.TheJournalofBiologicalChemistry291,3319-333218.QiY,etal.2016.MutationsincircularlypermutedGTPasefamilygenesAtNOA1/RIF1/SVR10andBPG2suppressvar2-mediatedleafvariegationinArabidopsisthaliana.PhotosynthesisResearch127(3),355-36719.WangLS,etal.2016.Singletoxygen-andEXECUTER1-mediatedsigna領(lǐng)isinitiatedingranamarginsanddependsontheproteaseFtsH2.PNAS,DOI:10.1073/pnas.160356211320.ZhangL,etal.2016.BiogenesisFactorRequiredForATPSynthase3FacilitatesAssemblyoftheChloroplastATPSynthaseComplex.PlantPhysiology171,1291-130621.LiX,etal.2013.MolecularCloningandCharacterizationofViolaxanthinDeEpoxidase(CsVDE)inCucumber.PLoSONE8(5):1-1122.PengH,etal.2012.DifferencesincopperaccumulationandcopperstressbetweeneightpopulationsofHaumaniastrumkatangense,EnvironmentalandExperimentalBotany,79:58-6523.LuoT.etal.2013.Virus-inducedgenesilencingofpeaCHLIandCHLDaffectstetrapyrrolebiosynthesis,chloroplastdevelopmentandtheprimarymetabolicnetwork.PlantPhysiologyandBiochemistry65,172624.ZengY，etal.2014.Functionaltype2photosyntheticreactioncentersfoundintherarebacterialphylumGemmatimonadetes.PNAS,111(21),7795780025.ZengY,etal.2015.Characterizationofthemicroaerophilic,bacteriochlorophylla-containingbacteriumGemmatimonasphototrophicasp.nov.,andemendeddescript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  2018-09-19 10:00

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• 植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

  植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T2pg/mL-85pg/mL使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中原脫植基葉綠素含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物原脫植基葉綠素水平。用純化的植物原脫植基葉綠素抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入植物原脫植基葉綠素，再與HRP標(biāo)記的原脫植基葉綠素抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物原脫植基葉綠素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物原脫植基葉綠素濃度。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié)：計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。植物原脫植基葉綠素酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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  SPE和HPLC方法檢測(cè)植物提取物中的葉綠素[詳細(xì)]

  2012-12-21 00:00

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  2018-08-23 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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