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小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒
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2013-12-09 00:00 164閱讀次數(shù)
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小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒
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小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒
- 小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
標準
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人克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒
- 人克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
期刊論文
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大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒
- 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-10 20:51
期刊論文
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人克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒說明書
- 人克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CC16單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CC16與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人CC16,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CC16濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CC16濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CC16含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CC16檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CC16。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒
- 裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 12:16
安裝說明
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人克拉拉細胞蛋白(cc16)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1.5ng/L-48ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中克拉拉細胞蛋白(cc16)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人克拉拉細胞蛋白(cc16)水平。用純化的人克拉拉細胞蛋白(cc16)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入克拉拉細胞蛋白(cc16),再與HRP標記的克拉拉細胞蛋白(cc16)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的克拉拉細胞蛋白(cc16)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人克拉拉細胞蛋白(cc16)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(96ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人克拉拉細胞蛋白(CC16) 檢測試劑盒
- 人克拉拉細胞蛋白(CC16) 檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-14 19:11
選購指南
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人克拉拉細胞蛋白(cc16)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T[詳細]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.4ng/L-25ng/L大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫分析使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中克拉拉細胞蛋白(CC16)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)水平。用純化的大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入克拉拉細胞蛋白(CC16),再與HRP標記的克拉拉細胞蛋白(CC16)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的克拉拉細胞蛋白(CC16)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)濃度。試劑盒組成標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫分析操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫分析保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人克拉拉細胞蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T[詳細]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠麥角蛋白IgA,小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒說明書
- 小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒組成:130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個小鼠麥角蛋白IgAELISA試劑盒,小鼠elisa試劑盒標本要求:1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。更多資料請下載文件[詳細]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊
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小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
- 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
實驗操作
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小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒
- 小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
報價單
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小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)ELISA試劑盒
- 小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)ELISA試劑盒[詳細]
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2016-08-08 00:00
期刊論文
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小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 12:53
操作手冊
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96T人克拉拉細胞蛋白16ELISA 檢測試劑盒的步驟
- 人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:CC16試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CC16濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CC16和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CC16的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CC16標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CC16含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒DAE1078-0.1mlAACT/PE熒光素PE標記胰糜蛋白酶0.1mlDA2427-0.2mlMRP3(Multidrugresistanec-associatedProtein3)多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體0.2mlDA2428-0.1mlMRP4/ABCC4(Multidrugresistanec-associatedProtein4)多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體0.1mlDA2428-0.2mlMRP4/ABCC4(Multidrugresistanec-associatedProtein4)多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體0.2mlDA2429-0.1mlMRP5/ABCC5(Multidrugresistanec-associatedProtein5)多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體0.1mlDA2429-0.2mlMRP5/ABCC5(Multidrugresistanec-associatedProtein5)多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體0.2mlDA2430-0.1mlMrpL28(mitochondrialribosomalproteinL28)線粒體核糖體蛋白L28抗體0.1mlDA2430-0.2mlMrpL28(mitochondrialribosomalproteinL28)線粒體核糖體蛋白L28抗體0.2mlDA2432-0.1mlMSH-2(MutShomolog2)錯配修復(fù)蛋白2抗體0.1mlDA2480-0.2mlNeurobeachinprotein(AKAP550)蛋白激酶錨定蛋白/激酶固定蛋白抗體0.2mlDAR1195-0.1mlGoatanti-mouseIgG/PE-CY5熒光素PE-CY5標記羊抗小鼠IgG0.1mlDA2432-0.2mlMSH-2(MutShomolog2)錯配修復(fù)蛋白2抗體0.2mlDA2433-0.1mlMLH1/hMLH1(Mutlhomologlgene)錯配修復(fù)蛋白1抗體0.1mlDA2433-0.2mlMLH1/hMLH1(Mutlhomologlgene)錯配修復(fù)蛋白1抗體0.2mlDA2434-0.1mlMSLN(mesothelin)間皮素抗體0.1mlDA2434-0.2mlMSLN(mesothelin)間皮素抗體0.2mlDA008-2mlhumanCD38Monoclonalantibody/beads抗人CD38單抗免疫磁珠2mlDA009-2mlhumanCD45Monoclonalantibody/beads抗人CD45單抗免疫磁珠2mlDA2435-0.2mlMUCC/MucinC(GastricMucinM1)胃粘液素抗體0.2ml[詳細]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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現(xiàn)貨促銷人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒說明書
- 本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:CC16試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CC16濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將CC16和生物素標記的抗體同時溫育。人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CC16的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的CC16標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CC16含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-400pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlCLS1083-200ml細胞分離液1.083200mlCLS1092-200ml細胞分離液1.092200mlCLS1113-200ml細胞分離液1.113200mlCLS1119-200ml細胞分離液1.119200mlRC085-20ugRecombinantMurine人克拉拉細胞蛋白16ELISA檢測試劑盒GM-CSF重組鼠粒-巨噬細胞集落刺激因子20ugDAH1034-1mlAnthraxPaperantigen健康皮張?zhí)烤铱乖?mlDAH1028-100mlFBS特級胎牛血清100mlDAH1029-200mlFBS優(yōu)級胎牛血清200ml[詳細]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒
- 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-08 00:00
操作手冊
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小鼠連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(-Cat)ELISA試劑盒
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2013-11-15 00:00
課件
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小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒
- 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-09-28 00:00
實驗操作
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