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人P16抗體elisa試劑盒使用方法
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2018-10-01 10:00 216閱讀次數(shù)
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本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T3.2pg/ml-140pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P16抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人P16抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入P16抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P16抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人P16抗體濃度。
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人P16抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T3.2pg/ml-140pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P16抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人P16抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入P16抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P16抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人P16抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人ANO1抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T15pg/ml-500pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中ANO1抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人ANO1抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入ANO1抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANO1抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人ANO1抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人GP73抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T6ng/mL-160ng/mL使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中GP73抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人GP73抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入GP73抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的GP73抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人GP73抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人S100A2抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.6μg/L-22μg/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中S100A2抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人S100A2抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入S100A2抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S100A2抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人S100A2抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
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人PI3Kp8抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.2pmol/L-40pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PI3Kp8抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人PI3Kp8抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入PI3Kp8抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PI3Kp8抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人PI3Kp8抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
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人P62抗體 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.5pg/ml-22pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P62抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人P62抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入P62抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P62抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人P62抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人LY6K抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.2pg/ml-45pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中LY6K抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人LY6K抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入LY6K抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的LY6K抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人LY6K抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人KOC抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.3pg/ml-52pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中KOC抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人KOC抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入KOC抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的KOC抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人KOC抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人PRDX5抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T6.0pg/mL-220pg/mL使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PRDX5抗體(PRDXb)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人PRDX5抗體(PRDXb)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入PRDX5抗體(PRDXb),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PRDX5抗體(PRDXb)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人PRDX5抗體(PRDXb)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人NY-ESO-1抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T12pg/ml-520pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中NY-ESO-1抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人NY-ESO-1抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入NY-ESO-1抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NY-ESO-1抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人NY-ESO-1抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人PRX-VI抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.8pg/ml-35pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PRX-VI抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人PRX-VI抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入PRX-VI抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PRX-VI抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人PRX-VI抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人PTP1B抗體 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T28pg/ml-900pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PTP1B抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人PTP1B抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入PTP1B抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PTP1B抗體呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人PTP1B抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人DKK1抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.2μg/L50μg/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中DKK1抗體含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人DKK1抗體水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入DKK1抗體,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的DKK1抗體正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人DKK1抗體濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒
- 人干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
操作手冊
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人干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒
- 人干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-20 12:18
應(yīng)用文章
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人EB病毒抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定人唾液中EB病毒抗體(EBvAb)表達(dá)。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人EB病毒抗體(EBvAb)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中EB病毒抗體(EBvAb)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人EB病毒抗體(EBvAb)的存在與否。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人登革熱抗體IgG elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中登革熱抗體IgG(DengueIgG)表達(dá)。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人登革熱抗體IgG(DengueIgG)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中登革熱抗體IgG(DengueIgG)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人登革熱抗體IgG(DengueIgG)的存在與否。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人SARS冠狀病毒抗體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:48T1.0pg/mL-48pg/mL使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中SARS冠狀病毒抗體(SARS-CovAb)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人SARS冠狀病毒抗體(SARS-CovAb)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入SARS冠狀病毒抗體(SARS-CovAb),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SARS冠狀病毒抗體(SARS-CovAb)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人SARS冠狀病毒抗體(SARS-CovAb)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人登革熱抗體IgM elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中登革熱抗體IgM(DengueIgM)表達(dá)。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人登革熱抗體IgM(DengueIgM)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中登革熱抗體IgM(DengueIgM)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人登革熱抗體IgM(DengueIgM)的存在與否。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人 (Human) p16 ELISA 檢測試劑盒說明書
- 人(Human)p16ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:p16試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知p16濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將p16和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中p16的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗p16抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:80ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40ng/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的p16標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的p16含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
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