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96T人不對稱二甲基精氨酸ELISA檢測試劑盒

本文由 研域(上海)化學試劑有限公司 整理匯編

2018-09-14 10:01 497閱讀次數(shù)

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人不對稱二甲基精氨酸ELISA檢測試劑盒          本試劑僅供研究使用標本:細胞上清液試驗原理:    ADMA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ADMA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將ADMA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ADMA的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人不對稱二甲基精氨酸ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人不對稱二甲基精氨酸ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人不對稱二甲基精氨酸ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的ADMA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的ADMA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/LHAI-1(HepatocyteGrowthFactorActivatorInhibitor1)肝細胞生長因子激活物YZ因子抗體0.2mlHDAAg(HumanHepatitisBSurfaceAntigenPolyclonalAntibody)山羊抗人乙肝表面抗原抗體(包被0.1mlHBA1(hemoglobinalpha1)抗人血紅蛋白α1抗體0.1mlHBA1(hemoglobinalpha1)抗人血紅蛋白α1抗體0.2mlHDAAg(HumanHepatitisBSurfaceAntigenMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝表面抗原抗體(檢測)0.1mlHBcAg(HumanHepatitisBcoreAntigen)小鼠抗人乙肝核心抗原抗體0.1mlHBcAg(HumanHepatitisBcoreAntigen)小鼠抗人乙肝核心抗原抗體0.2mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)0.1mlRabbitanti-pigIgG/RBITC羅丹明標記兔抗豬IgG0.3mlRabbitanti-PigIgM/RBITC羅丹明標記兔抗豬IgM0.3mlRabbitanti-DogIgG/RBITC羅丹明標記兔抗狗IgG0.3mlRabbitanti-RatIgG/RBITC羅丹明標記兔抗大鼠IgG0.3mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)0.2mlHBeAg(HBeAgMouseMonoclonalAntibody小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)1mgHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)0.1mlHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)0.2mlHBeAg(MousehumanHbeAgMonoclonalAntibody)小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)1.0mlURGCP/URG4(Up-regulatorofcellproliferation)乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體0.2mlβ-HCG(Humanchorionicgonadotropinβ)抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素抗體0.1mlβ-HCG(Humanchorionicgonadotropinβ)抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素抗體0.2mlα-HCG(Humanchorionicgonadotropinα)抗人α亞基人絨毛膜促性腺激素抗體0.1ml血友病因子C域抗體0.2mlHBV/preS1/S2protein抗乙肝病毒preS1/乙肝病毒preS2抗體0.1mlHBV/preS1/S2protein抗乙肝病毒preS1/乙肝病毒preS2抗體0.2mlβ-HCG(HumanChorionicGonadotropinβ)mousemonoclonalantibody小鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗0.2mlBRI3BP/HCCR-1(BRI3bindingprotein)人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體0.1mlBRI3BP/HCCR-1(BRI3bindingprotein)人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體0.2mlα-HCG(MouseHumanChorionicGonadotropinαMonoclonalAntibody)小鼠抗人α亞基人絨毛膜促性腺激素單抗0.2mlHck(hemopoieticcellkinase)造血細胞激酶抗體0.2mlRabbitanti-guineapigIgM/RBITC羅丹明標記兔抗豚鼠IgM0.3mlRabbitanti-bovIgG/RBITC羅丹明標記兔抗牛IgG0.3mlRabbitanti-bovIgM/RBITC羅丹明標記兔抗牛IgM0.3mlRabbitanti-chiIgM/RBITC羅丹明標記兔抗雞IgM0.3mlHCFHrp/BTA(Bladdertumorantigen)human膀胱腫瘤抗原抗體0.2mlHCN4(HyperpolarizationactivatedCyclicNucleotide-gatedchannel4)環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型40.2mlHCV-Core丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體0.1mlHCV-HCBP1/ACY-3(HepatitisCviruscore-bindingprotein1)丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體0.2mlHCV-NS1丙型肝炎病毒-NS1抗體0.1mlHCV-NS1丙型肝炎病毒-NS1抗體0.2ml

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