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GSH和MDA的問題
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本文由 江萊-試劑,Elisa試劑盒供應商 整理匯編
2024-10-08 05:22 582閱讀次數(shù)
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GSH和MDA的問題
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GSH和MDA的問題
- GSH和MDA的問題[詳細]
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2024-10-08 05:22
標準
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細胞培養(yǎng)常見的問題和解決方法
- 細胞培養(yǎng)常見問題及回答如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)**AIMV(12005)培養(yǎng)基(SFM)。L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有Z終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I二肽是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I二肽溶液有Z小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。如何消除組織培養(yǎng)的污染?當重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟。1.在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞,稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。2.分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性霉素B推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0mg/ml。3.每天觀測細胞毒性指標,如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。4.確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2~3代。5.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。6.重復步驟4。7.在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4~6代,確定污染是否以已被消除。培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。目錄上說,Hank's平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用,不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么?Hank's平衡鹽溶液(HBS)和Earle's平衡鹽溶液(EBS)有什么本質(zhì)的功能差別?HBS和EBS的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles(2.2g/L)中比在Hanks(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2中,溶液會變堿,Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagles液,。如果僅僅是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks液就可以了。二價離子YZ胰蛋白酶活性嗎?使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么?二價離子的確YZ胰蛋白酶活性。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持YZ胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。我SYSF900II時,細胞生長良好,但是我的蛋白產(chǎn)物不如使用Graces液和10%胎牛血清時效果好。如果目的蛋白是一個后期蛋白,它將與蛋白酶一起表達,這些蛋白酶將會作用于目的蛋白。在加有血清的培養(yǎng)基中,這些蛋白酶將作用到血清中的蛋白,從而使目的蛋白產(chǎn)品保持完好。在無血清配方中,蛋白酶作用的**底物是你的目的蛋白。為了避免這一問題,加入一些蛋白酶YZ劑或加入少量的血清(少于1%),讓血清給蛋白酶提供作用底物。20°C下配制的緩沖液,在較高或較低的溫度下PH值會改變嗎?對于普通使用的緩沖液,PH值隨溫度變化而變化。下表列出溫度改變10℃時,PH值的變化情況:例如20℃下配制PH7.4Tris緩沖液,40℃時PH值為7.4-(2x0.310)=6.78緩沖系統(tǒng)pKa/20℃[Delta]pKa/10℃Mes6.15-0.110Ada6.60-0.110Pipes6.80-0.08ces6.90-0.200Bes7.15-0.160Mops7.20-0.013Tes7.50-0.200Hepes7.55-0.140Tricine8.15-0.210Tris8.30-0.310Bicine8.35-0.180Glycylglycine8.40-0.280室溫下(25)配制的Tris-HCl溶液,在37℃使用時PH值是多少?緩沖液的PH值隨溫度變化而變化。下表列出了50mMTris-HC溶液在4℃,25℃,37℃時,不同的PH值。4°C25°C37°C8.17.57.28.27.67.38.37.77.48.47.87.58.57.97.68.68.07.78.78.17.88.88.27.98.98.38.09.08.48.19.18.58.29.28.68.39.38.78.49.48.88.5昆蟲細胞培養(yǎng)的Z適PH值和滲透壓是多少?生長培養(yǎng)基的PH值對細胞的增殖和病毒或重組蛋白的生產(chǎn)均會產(chǎn)生影響。對于大部分鱗翅類昆蟲細胞系,在PH值6.0~6.4范圍的大部分應用效果良好。培養(yǎng)鱗翅類昆蟲細胞系時,培養(yǎng)基的Z適滲透壓是345-380mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細胞培養(yǎng)方式,減少技術問題,保持PH值和滲透壓在以上所列的范圍之內(nèi)。HighFive細胞有任何其它名稱嗎?HighFive細胞也被稱為Trichoplasiani5B1-4和BTI-TN-5B1-4。PFHM-II和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別PFHM-II(Protein-freeHybridomaMedium)是不包含有蛋白質(zhì)的單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。如果作為雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基使用,PFHM-II可能需要補充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM既是雜交瘤生產(chǎn)培養(yǎng)基,也是單克隆抗體生產(chǎn)培養(yǎng)基。它包含低水平的蛋白質(zhì)。在HighFive無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度是多少?HighFive無血清培養(yǎng)基中去污劑的濃度:0.025g/LTween-80,1.0g/LPluronicPoly-all。HighFive細胞用多大的密度凍存?3.0x10E6cells/ml。在我的果蠅培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)形成白色沉淀,加熱后溶解。它是什么?對我的細胞有害嗎?可能是谷氨酰胺沉淀,但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培養(yǎng)基中谷氨酰胺的濃度比典型的2mM高6倍。酪氨酸的濃度比在RPMI1640中高25倍,而且比谷氨酰胺更加難以溶解。沉淀也可能是不止一種成分的復合物。它可能是由于貯存在局部溫度較低的地方引起。只要沉淀在培養(yǎng)條件下可以溶解,對實驗不會有不利的影響。如何從T25瓶中轉(zhuǎn)移sf9細胞?能用胰蛋白酶消化嗎?我們QL推薦使用脫落細胞的方法,因為這項技術破壞性Z小,生活力Z高。正如手冊上所顯示,通過使用巴斯德吸液管,讓細胞上培養(yǎng)基流動。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養(yǎng)瓶。只有在必要的情況下,才使用胰酶消化細胞。胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞:1.去除培養(yǎng)基。2.用2ml1xPBS(足以覆蓋細胞表面)洗滌細胞,去除PBS。3.加入2ml1x胰酶EDTA(恰好覆蓋細胞表面)。4.37℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動。5.向細胞中加入2ml細胞培養(yǎng)液,移入錐形管,用2ml培養(yǎng)液洗瓶壁,移入同一錐形管中。(培養(yǎng)基中的FBS終止了胰酶的活性。)6.離心(1100rpm)沉淀細胞。去除培養(yǎng)基。7.用新的培養(yǎng)基重新懸浮細胞。傳代。在Sf9,Sf21,和highFive細胞懸浮培養(yǎng)時,肝素的使用量是多少?為了防止懸浮培養(yǎng)細胞聚集的形成,使用肝素濃度為10單位/毫升細胞懸液。在重新凍存sf9細胞前,它可以傳多少代?隨著傳代的次數(shù)的增加,它的感染能力會降低嗎?通常情況當細胞經(jīng)過30次傳代后,應該返回凍存。無論什么時候計數(shù)時,都應該檢查細胞活力。如果超過95%的細胞保持有活力和在大約30小時左右加倍,細胞仍然可以使用。如果活力和加倍時間下降,它們的感染力將不在是有效的。Techtips●貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基,可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時,碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘,來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)?!袢绻毎囵B(yǎng)基偶然被凍,您應該熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生,培養(yǎng)基可以正常使用,如果出現(xiàn)沉淀,只能丟棄這些培養(yǎng)基?!衲檎遗囵B(yǎng)基成分表嗎?您可以在GIBCO目錄**章的后面或在我們網(wǎng)站的技術資源部分找到?!癞斣跓o血清培養(yǎng)基中添加抗生素時,降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下,抗生素不被滅活,可能對于細胞達到毒性水平?!褚坏┠谛迈r培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解?!窨傊蟛糠痔砑游锖驮噭㈱多可以凍融3次,如果次數(shù)更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,將會影響它的性能?!裨谶M行傳代培養(yǎng)時,我們強烈推薦進行臺盼蘭活性記數(shù)。研究者常常通過一個簡單的稀釋(1∶4或1∶2)進行傳代,不進行活性檢測,您可能接種比你認為的低的多的濃度的細胞,這常常可能導致生長緩慢或培養(yǎng)物根本不生長。●在溶解的一周內(nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液。胰蛋白酶在4℃就可能開始降解,如果在室溫下放置超過30分鐘,就會變得不穩(wěn)定?!馟IBCO產(chǎn)品的貯存期立足于實時穩(wěn)定性研究結(jié)果。產(chǎn)品說明在超過指定的貯存期的一段時間內(nèi),產(chǎn)品仍然在可接受的范圍內(nèi),但是由于在超過指定的效期后,產(chǎn)品的性能和穩(wěn)定性沒有檢測,我們不推薦使用過了效期的產(chǎn)品。[詳細]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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實驗室儀器設備的特點和存在的問題
- 隨著國家對產(chǎn)品質(zhì)量要求的不斷提高,檢測技術也飛速發(fā)展,先進的儀器設備不斷涌現(xiàn),老設備不斷升級、換代;同時,現(xiàn)代試驗技術正在向著多學科交叉滲透、多學科智能密集型方向發(fā)展。許多大型精密儀器設備是化學、機械、電子、光學、生物、計算機等多學科智能的集中體現(xiàn),如氣質(zhì)聯(lián)用儀、原子吸收光譜儀等[詳細]
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2021-06-28 15:34
標準
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關于色譜儀的選型和配套問題
- 關于色譜儀的選型和配套問題[詳細]
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2012-06-18 00:00
期刊論文
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茶葉殘留農(nóng)藥的現(xiàn)狀和對策問題
- 茶葉殘留農(nóng)藥的現(xiàn)狀和對策問題[詳細]
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2014-11-05 00:00
操作手冊
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氮氣發(fā)生器常出現(xiàn)的問題和解決方法
- 氮氣發(fā)生器常出現(xiàn)的故障和解決方法氮氣發(fā)生器是一套能提取氮氣的設備,它主要應用領域為:航空航天、核電核能、食品醫(yī)藥、石油化工、電子工業(yè)、材料工業(yè)科學實驗等領域。它利用恒定電位電解法,采用微孔膜(例如石棉膜)作為兩電極的分隔板,多孔氣體擴散型氧電極為陰極,鎳網(wǎng)為陽極,且電極安裝是采用硬支撐結(jié)構(gòu)。1,氮氣發(fā)生器運行中有響聲解決措施:用14的扳手對電磁閥上螺母適當調(diào)整松緊度,不要太緊;若不行需拆開電磁閥對內(nèi)部進行清洗(響主要是因電磁閥內(nèi)臟有雜質(zhì)),若清洗完還不行,須更換新的。2.開機不工作顯示板無顯示解決措施:檢查電源是否有電;檢查保險是否燒掉,保險位于儀器后面電線插座內(nèi)(有保險圖案),用小“一”字改錐或尖的金屬工具向外撬即可取出,保險為;看儀器內(nèi)電路板指示燈是否亮,若不亮,檢查電路板上保險是否燒掉,若燒掉須換保險3A,換后仍不顯示,須換電源等。3.氮氣發(fā)生器開機即有氣體輸出解決措施:當剛開機壓力上升時須按一下前面的紅色延時開關,然后輸出壓力從輸出放掉等待10分鐘后方可使用上海么能分析儀器有限公司專業(yè)生產(chǎn)氫氣發(fā)生器、氮氣發(fā)生器、空氣發(fā)生器、氫空一體機、氮氫空一體機[詳細]
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2018-08-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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水三相點的應用和注意問題
- 水三相點的應用和注意問題[詳細]
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2024-09-14 19:11
產(chǎn)品樣冊
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細胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題
- 細胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題[詳細]
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2024-09-24 21:45
期刊論文
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大鼠丙二醛(MDA)說明書
- www.biokanu.com大鼠丙二醛(MDA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中丙二醛(MDA)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠丙二醛(MDA)水平。用純化的大鼠丙二醛(MDA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛(MDA),再與HRP標記的羊抗鼠抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛(MDA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠丙二醛(MDA)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:5.4nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為3.6nmol/L,2.4nmol/L,1.2nmol/L,0.6nmol/L,0.3nmol/L)。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:0.2nmol/L-4nmol/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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微量丙二醛(MDA)測試
- 過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中的丙二醛(MDA)可與硫代吧比妥酸(TBA)縮合,形成紅色產(chǎn)物,在532nm處有蕞大吸收峰。因底物為硫代吧比妥酸(ThibabituricAcidTBA)所以此法稱TBA法。[詳細]
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2025-01-03 09:22
應用文章
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人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒
- 人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-06 00:00
產(chǎn)品樣冊
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人谷胱甘肽(GSH)檢測試劑盒
- 人谷胱甘肽(GSH)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-17 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠谷胱甘肽 (GSH)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠GSH單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GSH與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠GSH,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GSH濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GSH濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1.2nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:100稀釋(取10ul,加標本稀釋液990ul,稀釋100倍),尿液2倍稀釋(取100ul,加標本稀釋液100ul,稀釋2倍)后檢測。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成4000pmol/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入4000pmol/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pmol/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GSH含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GSH檢測濃度小于15pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠GSH。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
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2024-09-18 18:09
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2024-09-28 01:18
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2018-09-13 10:00
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