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免疫沉淀技術(shù)的應(yīng)用
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本文由 上海金穗生物科技有限公司 整理匯編
2018-10-08 10:00 561閱讀次數(shù)
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上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com
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免疫沉淀技術(shù)的應(yīng)用
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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免疫沉淀的改進(jìn)方法
- 免疫沉淀的改進(jìn)方法[詳細(xì)]
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2013-11-11 00:00
其它
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免疫沉淀的實(shí)驗(yàn)過程
- 上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司,生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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免疫沉淀實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
- 1.用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實(shí)驗(yàn)?答:抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實(shí)驗(yàn)影響很大??贵w不同,和抗原以及ProteinG或ProteinA的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。一般來說,多抗是沉淀反應(yīng)**的選擇。另外,純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。2.為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶YZ劑?答:從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中,往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解,修飾,溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每YZ劑,并且在低溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3.溶解抗原的緩沖液的配制需要注意什么?答:多數(shù)的抗原是細(xì)胞構(gòu)成的蛋白,特別是骨架蛋白,緩沖液必須要使其溶解。為此,必須使用含有強(qiáng)表面活性劑的緩沖液,盡管它有可能影響一部分抗原抗體的結(jié)合。另一面,如用弱表面活性劑溶解細(xì)胞,就不能充分溶解細(xì)胞蛋白。即便溶解也產(chǎn)生與其它的蛋白結(jié)合的結(jié)果,抗原決定族被封閉,影響與抗體的結(jié)合。4.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)應(yīng)如何把握抗體和緩沖液的比例?答:每次沉淀實(shí)驗(yàn)之前,考慮抗體/緩沖液的比例十分重要。抗體過少就不能檢出抗原,過多則就不能沉降在beads上,殘存在上清;緩沖劑太少則不能溶解抗原,過多則抗原被稀釋。具體比例視具體情況而定。5.免疫沉淀應(yīng)該如何配制細(xì)胞裂解液?答:適當(dāng)?shù)募?xì)胞裂解液的選擇取決于所要研究蛋白的特性。TritonX-100,NP40是非離子界面活性劑,作用溫和;DOC(sodiumde-oxycholate),SDS是離子性的強(qiáng)活性劑。所以裂解液的配制時所用去污劑的種類和濃度以及鹽濃度等條件需實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行優(yōu)化。注意如果忘記加TritonX-100,只加DOC或SDS,可能使抗體完全失去活性。[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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滬鼎生物免疫沉淀技術(shù)服務(wù)流程
- 免疫沉淀反應(yīng)主要用于抗原或者抗體的定性檢測。其原理是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在有電解質(zhì)存在的情況下,按適當(dāng)比例所形成的可見沉淀物現(xiàn)象。據(jù)此現(xiàn)象設(shè)計(jì)的沉淀實(shí)驗(yàn)主要包括絮狀沉淀試驗(yàn),環(huán)狀沉淀試驗(yàn)和凝膠內(nèi)的沉淀試驗(yàn)。凝膠內(nèi)的沉淀試驗(yàn)依所用的實(shí)驗(yàn)方法又可分為免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)和免疫電泳技術(shù)2類。免疫共沉淀是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其基本原理是:細(xì)胞裂解液中加入抗體,與抗原形成特異免疫復(fù)合物,經(jīng)過洗脫,收集免疫復(fù)合物,然后進(jìn)行SDS-PAGE及Westernblotting分析。免疫沉淀操作流程(以ProteinAAgarose方法為例):一、蛋白樣品的準(zhǔn)備1.對于10厘米細(xì)胞培養(yǎng)皿中的貼壁細(xì)胞,吸除細(xì)胞培養(yǎng)液,PBS洗滌一次,然后加入500微升至2毫升細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞。2.對于組織樣品參考貼壁細(xì)胞使用裂解液的比例進(jìn)行裂解。3.對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞后,PBS洗滌一次,然后參考貼壁細(xì)胞的裂解方法進(jìn)行裂解。二、去除非特異性結(jié)合1.取200微升至1毫升蛋白樣品,蛋白量約為200微克至1毫克,加入約1微克和免疫沉淀時使用的IgG種屬相同的普通IgG和20微升充分重懸的ProteinAAgarose,4℃緩慢搖動30分鐘至2小時。2.2500rpm(約1000g)離心5分鐘,取上清用于后續(xù)的免疫沉淀。三、免疫沉淀1.加入0.2-2微克用于免疫沉淀的一抗,4℃緩慢搖動放置一個晚上。2.再加入20微升充分重懸的ProteinAAgarose,4℃緩慢搖動1-3個小時。3.2500rpm(約1000g)離心5分鐘,或瞬時高速離心,小心吸除上清,注意寧可留下少量上清也不能吸掉ProteinAAgarose。4.用準(zhǔn)備蛋白樣品時的裂解液或PBS洗滌沉淀5次,裂解液或PBS的用量每次為0.5-1毫升。洗滌時離心條件和吸除上清的要求同上面的步驟。5.完成Z后一次洗滌后,去除上清,加入20-40微升1XSDS-PAGE電泳上樣緩沖液Vortex重懸沉淀,瞬時高速離心把樣品離心至管底。6.100℃或沸水浴處理3-5分鐘,取部分或全部樣品用于SDS-PAGE電泳,暫時不用的樣品可以-20℃保存。免疫共沉淀:參考免疫沉淀的方法進(jìn)行,但免疫共沉淀(co-IP)通常必須使用未經(jīng)凍存的新鮮蛋白樣品。普通的免疫沉淀雖然可以使用凍存的蛋白樣品,但也宜用新鮮的蛋白樣品為佳。[詳細(xì)]
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2024-10-03 09:26
產(chǎn)品樣冊
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等離子體技術(shù)的應(yīng)用
- 等離子體技術(shù)的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:01
專利
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植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒 產(chǎn)品說明書
- 植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒 產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-01-08 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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微波干燥技術(shù)的應(yīng)用進(jìn)展
- 闡述了微波干燥的原理、特點(diǎn)以及微波技術(shù)在國內(nèi)外的研究和應(yīng)用現(xiàn)狀,同時對該技術(shù)在復(fù)混肥料干燥中的應(yīng)用進(jìn)行了預(yù)測分析。
[詳細(xì)]
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2018-06-28 11:52
期刊論文
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光譜儀器及技術(shù)的應(yīng)用
- 光波是由原子內(nèi)部運(yùn)動的電子產(chǎn)生的。各種物質(zhì)的原子內(nèi)部電子的運(yùn)動情況不同,所以它們發(fā)射的光波也不同。研究不同物質(zhì)的發(fā)光和吸收光的情況,有重要的理論和實(shí)際意義,已成為一門專門的學(xué)科--光譜學(xué)。[詳細(xì)]
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2018-08-02 13:06
應(yīng)用文章
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超聲波清洗技術(shù)的應(yīng)用
- 超聲波清洗技術(shù)的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:06
其它
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微波殺菌技術(shù)的應(yīng)用
- 微波殺菌技術(shù)的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:21
選購指南
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靜電紡絲技術(shù)的應(yīng)用及發(fā)展
- 靜電紡絲技術(shù)的應(yīng)用及發(fā)展[詳細(xì)]
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2014-09-18 00:00
操作手冊
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頂空分析進(jìn)樣技術(shù)的應(yīng)用
- 頂空分析進(jìn)樣技術(shù)的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2011-02-23 00:00
期刊論文
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過程質(zhì)譜儀的技術(shù)及應(yīng)用
- 過程質(zhì)譜儀的技術(shù)及應(yīng)用[詳細(xì)]
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2014-07-28 00:00
專利
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光電子技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用
- 綜述了光電子學(xué)的產(chǎn)生及其發(fā)展,提出了光電子技術(shù)的發(fā)展方向和研究熱點(diǎn)。光電子學(xué)是由光學(xué)和電子學(xué)相結(jié)合的新興交叉學(xué)科,涉及光顯示、光存儲、導(dǎo)波光學(xué)、材料科學(xué)的科研成就。光電子學(xué)以光學(xué)研究為核心,以電子學(xué)研究為支撐,它不僅全面兼容電子技術(shù),而且規(guī)避了電子作為信息載體存在電磁串?dāng)_和路徑延遲的缺點(diǎn),在當(dāng)今信息時代愈發(fā)占有重要位置。[詳細(xì)]
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2018-07-11 14:27
期刊論文
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超臨界二氧化碳萃取技術(shù)的應(yīng)用
- 近年來隨著人們對超臨界二氧化碳萃取技術(shù)的不斷研究,該技術(shù)被廣泛應(yīng)用在各個領(lǐng)域當(dāng)中。本文主要介紹了超臨界二氧化碳萃取技術(shù)在醫(yī)藥、食品、環(huán)境保護(hù)等方面的應(yīng)用。[詳細(xì)]
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2018-07-24 17:39
期刊論文
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萃取技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用
- 利用物質(zhì)在互不相溶的兩種溶劑中溶解度的不同而進(jìn)行分離的方法稱之為萃取。在近十幾年中,隨著生命科學(xué)、生物工程、合成藥學(xué)、環(huán)境科學(xué)、食品工程的迅速發(fā)展,分析對象不斷增加,對復(fù)雜基體中的各組分的分離與檢驗(yàn)成為突出問題。對樣品的預(yù)處理的要求也越來越高,如采用不正確的樣品預(yù)處理方法,將導(dǎo)致定性、定量的錯誤、儀器壽命的縮短等嚴(yán)重后果。目前常用的傳統(tǒng)萃取方法有很多不足,如需大量試劑,試驗(yàn)成本過高,樣品處理步驟復(fù)雜,浪費(fèi)時間、人力,樣品回收率、精密度不理想,且樣品易損失等問題。隨著問題的出現(xiàn)也相應(yīng)出現(xiàn)解決問題的方法:固相萃取、固相微萃取、超臨界萃取、微波萃取等新技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,本文簡要介紹上述幾種新型萃取技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用。
[詳細(xì)]
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2018-07-27 13:10
期刊論文
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冷凍干燥箱的技術(shù)與應(yīng)用
- 對冷凍干燥技術(shù)的原理及特點(diǎn)進(jìn)行了介紹,詳細(xì)分析了干燥過程的技指標(biāo)及干燥后產(chǎn)品的質(zhì)量評價,Z后對凍干技術(shù)在中藥領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述。[詳細(xì)]
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2018-10-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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分子檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用
- 分子檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的應(yīng)用[詳細(xì)]
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2024-09-18 19:24
應(yīng)用文章
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活體生物光學(xué)成像技術(shù)的應(yīng)用
- 作為一項(xiàng)新興的分子、基因表達(dá)的分析檢測技術(shù),在體生物光學(xué)成像已成功應(yīng)用于生命科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域,取得了大量研究成果,主要包括: 在體監(jiān)測腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移、基因ZL中的基因表達(dá)、機(jī)體的生理病理改變過程以及進(jìn)行藥物的篩選和評價等。[詳細(xì)]
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2024-09-12 18:32
應(yīng)用文章
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