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供應(yīng)草莓輕型黃邊病毒(SMYEV)ELISA試劑盒
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2015-02-03 00:00 259閱讀次數(shù)
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供應(yīng)草莓輕型黃邊病毒(SMYEV)ELISA試劑盒
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供應(yīng)草莓輕型黃邊病毒(SMYEV)ELISA試劑盒
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2015-02-03 00:00
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2024-09-29 01:23
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2016-02-18 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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- 人乙型肝炎病毒表面抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書人ELISA試劑盒病毒分析?實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)濃度。人ELISA試劑盒病毒分析?試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(800IU/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個人ELISA試劑盒病毒分析?標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人ELISA試劑盒病毒分析?操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。400IU/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200IU/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100IU/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50IU/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25IU/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。人ELISA試劑盒病毒分析?計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人ELISA試劑盒病毒分析?注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。人ELISA試劑盒病毒分析?保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Elisa細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒
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2024-09-11 17:48
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2015-03-03 00:00
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- 菠蘿蛋白酶(Bromelain)ELISA試劑盒供應(yīng)[詳細(xì)]
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2024-09-29 22:07
實驗操作
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魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒說明書
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FishVTGELISAKitForthequantitativeinvitrodeterminationofFishVitellogeninconcentrationsinbodyfluid-celiacfluid-tissuehomogenates-otherbiologicalfluidsFORLABORATORYRESEARCHUSEONLY.NOTFORUSEINDIAGNOSTICPROCEDURES.Thispackageinsertmustbereadinitsentiretybeforeusingthisproduct.ELISAENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYINTENDEDUSEANDTESTPRINCIPLEThisVTGELISAkitisintendedLaboratoryforResearchuseonlyandisnotforuseindiagnosticortherapeuticprocedures.TheStopSolutionchangesthecolorfrombluetoyellowandtheintensityofthecolorismeasuredat450nmusingaspectrophotometer.InordertomeasuretheconcentrationofVTGinthesample,thisVTGELISAKitincludesasetofcalibrationstandards.ThecalibrationstandardsareassayedatthesametimeasthesamplesandallowtheoperatortoproduceastandardcurveofOpticalDensityversusVTGconcentration.TheconcentrationofVTGinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.SAMPLECOLLECTIONANDSTORAGESSerum-Useaserumseparatortubeandallowsamplestoclotfortwohoursatroomtemperatureorovernightat4℃beforecentrifugationfor20minutesatapproximately1000×g.Assayfreshlypreparedserumimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Plasma-CollectplasmausingEDTAorheparinasananticoagulant.Centrifugesamplesfor15minutesat1000×gat2-8℃within30minutesofcollection.Removeplasmaandassayimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Tissuehomogenates-Forgeneralinformation,hemolysisbloodmayaffecttheresult,soyou首ldrinsethetissueswithice-coldPBS(0.01M,pH=7.4)toremoveexcessbloodthoroughly.Tissuepieces首ldbeweighedandthenmincedtosmallpieceswhichwillbehomogenizedinPBS(thevolumedependsontheweightofthetissue.9mLPBSwouldbeappropriateto1gramtissuepieces.SomeproteaseinhibitorisrecommendedtoaddintothePBS.)withaglasshomogenizeronice.Tofurtherbreakthecells,youcansonicatethesuspensionwithanultrasoniccelldisrupterorsubjectittofreeze-thawcycles.Thehomogenatesarethencentrifugatedfor5minutesat5000×gtogetthesupernate.Cellculturesupernatesandotherbiologicalfluids-Centrifugesamplesfor20minutesat1000×g.Removeparticulatesandassayimmediatelyorstoresamplesinaliquotat-20℃or-80℃forlateruse.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Note:Thesamples首lebecentrifugateddequatelyandnohemolysisorgranulewasallowed.MATERIALSREQUIREDBUTNOTSUPPLIED1.37℃incubator2.Standardmicroplatereadercapableofmeasuringabsorbanceat450nm3.Precisionpipettes,disposablepipettetipsandAbsorbentpaper4.DistilledordeionizedwaterREAGENTSPROVIDEDAllreagentsprovidedarestoredat2-8°C.Refertotheexpirationdateonthelabel.Name96determinations48determinationsMICROTITERPLATE8*12strips8*6stripsSTANDARD(6vial)0.3ml/vial0.3ml/vialSAMPLEDILUENT6.0ml3.0mlENZYMECONJUGATE10.0ml5.0mlWASHSOLUTION25ml15mlSUBSTRATEA6.0ml3.0mlSUBSTRATEB6.0ml3.0mlSTOPSOLUTION6.0ml3.0mlClosureplatemembrane22Usermanual11Sealedbags11Note:1.Standardconcentrationwasfollowedby:480,240,120,60,30,15ng/mL.2.Ifsamplesgeneratevalueshigherthanthehigheststandard,pleasedilutethesampleswithSampleDiluentandrepeattheassay.PRECAUTIONSDonotsubstitutereagentsfromonekitlottoanother.Standard,conjugateandmicrotiterplatesarematchedforoptimalperformance.Useonlythereagentssuppliedbymanufacturer.Allowkitreagentsandmaterialstoreachroomtemperature(20-25°C)beforeuse.Donotusewaterbathstothawsamplesorreagents.Donotusekitcomponentsbeyondtheirexpirationdate.Useonlydeionizedordistilledwatertodilutereagents.Donotremovemicrotiterplatefromthestoragebaguntilneeded.Unusedstrips首ldbestoredat2-8°Cintheirpouchwiththedesiccantprovided.Usefreshdisposablepipettetipsforeachtransfertoavoidcontamination.Donotmixacidandsodiumhypochloritesolutions.Serumandplasma首ldbehandledaspotentiallyhazardousandcapableoftransmittingdisease.Disposableglovesmustbewornduringtheassayprocedure,sincenoknowntestmethodcanoffercompleteassurancethatproductsderivedfromRatbloodwillnottransmitinfectiousagents.Therefore,allbloodderivatives首ldbeconsideredpotentiallyinfectiousandgoodlaboratorypractices首ldbefollowed.Allsamples首ldbedisposedofinamannerthatwillinactivateviruses.LiquidWaste:Addsodiumhypochloritetoafinalconcentrationof1.0%.Thewaste首ldbeallowedtostandforaminimumof30minutestoinactivatethevirusesbeforedisposal.SubstrateSolutioniseasilycontaminated.Ifbluishpriortouse,donotuse.SubstrateBcontain20%acetone,keepthisreagentawayfromsourcesofheatorflame.Removeallkitreagentsfromrefrigeratorandallowthemtoreachroomtemperature(20-25°C).REAGENTPREPARATIONANDSTORAGEWashSolution(1X)-Dilute1volumeofWashsolution(20X)with19volumesofdeionizedordistilledwater.WashSolutionisstablefor1monthat2-8°C.ASSAYPROCEDURE1.Prepareallreagentsbeforestartingassayprocedure.ItisrecommendedthatallStandardsandSamplesbeaddedinduplicatetotheMicrotiterplate.2.Add50μlofStandardorSampletotheappropriatewells.Blankwelldoesn’taddanyting.3.Add100μlofEnzymeconjugatetostandardwellsandsamplewellsexcepttheblankwell,coverwithanadhesivestripandincubatefor60minutesat37°C.4.WashtheMicrotiterPlate4times.ManualWashing-Removeincubationmixturebyaspiratingcontentsoftheplateintoasinkorproperwastecontainer.Usingasquirtbottle,filleachwellcompletelywithWashSolution(1X),thenaspiratecontentsoftheplateintoasinkorproperwastecontainer.Repeatthisprocedureforatotaloffourtimes.Afterfinalwash,invertplate,andblotdrybyhittingplateontoabsorbentpaperorpapertowelsuntilnomoistureappears.Note:Holdthesidesoftheplateframefirmlywhenwashingtheplatetoassurethatallstripsremainsecurelyinframe.AutomatedWashing-Aspirateallwells,thenwashplatesfourtimesusingWashBuffer(1X).Alwaysadjustyourwashertoaspirateasmuchliquidaspossibleandsetfillvolumeat350μL/well/wash.Afterfinalwash,invertplate,andblotdrybyhittingplateontoabsorbentpaperorpapertowelsuntilnomoistureappears.5.AddSubstrateA50μlandSubstrateB50μltoeachwell.Gentlymixandincubatefor15minutesat37°C.Protectfromlight.6.Add50μlStopSolutiontoeachwell.Thecolorinthewells首ldchangefrombluetoyellow.Ifthecolorinthewellsisgreenorthecolorchangedoesnotappearuniform,gentlytaptheplatetoensurethoroughmixing.7.ReadtheOpticalDensity(O.D.)at450nmusingamicrotiterplatereaderwithin15minutes.CALCULATIONOFRESULTSThisstandardcurveisusedtodeterminetheamountinanunknownsample.ThestandardcurveisgeneratedbyplottingtheaverageO.D.(450nm)obtainedforeachofthesixstandardconcentrationsonthevertical(X)axisversusthecorrespondingconcentrationonthehorizontal(Y)axis.First,calculatethemeanO.D.valueforeachstandardandsample.AllO.D.Valuesaresubtractedbythemeanvalueofthebalnkwellbeforeresultinterpretation.Constructthestandardcurveusinggraphpaperorstatisticalsoftware.Todeterminetheamountineachsample,firstlocatetheO.D.valueontheY-axisandextendahorizontallinetothestandardcurve.Atthepointofintersection,drawaverticallinetotheX-axisandreadthecorrespondingconcentration.Anyvariationinoperator,pipettingandwashingtechnique,incubationtimeortemperature,andkitagecancausevariationinresult.Eachuser首ldobtaintheirownstandardcurve.Intra-assayCV(%)islessthan10%andInter-assayCV(%)islessthan15%.Assayrange:15ng/mL480ng/mL.7.Sensitivity:TheminimumdetectabledoseofFishVTGistypicallylessthan1.0ng/mL.8.Cross-reactivity:ThisassayrecognizesrecombinantandnaturalFishVTG.Nosignificantcross-reactivityorinterferencewasobserved.9.Storage:2-8℃(Usefrequently);sixmonths(-20℃)。10.StandardcurveFORRESEARCHUSEONLY;NOTFORTHERAPEUTICORDIAGNOSTICAPPLICATIONS!PLEASEREADTHROUGHENTIREPROCEDUREBEFOREBEGINNING!魚卵黃蛋白原(VTG)試劑盒(ELISA)使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測體液、腔液、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中魚卵黃蛋白原(VTG)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被魚卵黃蛋白原(VTG)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚卵黃蛋白原(VTG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會影響Z后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:480、240、120、60、30、15ng/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實驗。注意事項嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結(jié)果計算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能檢測范圍:15ng/mL480ng/mL。靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0ng/mL。特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。[詳細(xì)]
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2018-12-11 10:00
產(chǎn)品樣冊
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犬瘟熱病毒CDV ELISA試劑盒說明書
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷犬(Canine)瘟熱病毒(CDV)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被犬瘟熱病毒(CDV)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中犬瘟熱病毒(CDV)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。預(yù)處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的的**檢測效果。嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板12孔×8條12孔×4條無陰性對照0.5mL0.5mL無陽性對照0.5mL0.5mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋樣本稀釋液6mL3mL無底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無試劑的準(zhǔn)備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷1.試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15。2.臨界值(Cutoff)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.153.陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cutoff),樣品為陰性4.陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cutoff),樣品為陽性試劑盒性能準(zhǔn)確性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15,說明試驗結(jié)果有效。特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。貯藏:2-8℃,避光防潮保存。有效期:6個月免責(zé)聲明試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。[詳細(xì)]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人ev病毒elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中ev病毒表達(dá)。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人ev病毒表達(dá)。用純化的人ev病毒抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中ev病毒相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的艾柯病毒(ECHO)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人ev病毒的存在與否。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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甲肝病毒抗體ELISA檢測試劑盒
- 甲肝病毒抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人甲肝病毒IgG(HAV-IgG)抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人甲肝病毒抗體IgG(HAV-IgG)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標(biāo)儀(450nm)2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱甲肝病毒抗體ELISA檢測試劑盒操作注意事項1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。3.預(yù)處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的的檢測效果。4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。5.所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板12孔×8條12孔×4條無陰性對照0.5mL0.5mL無陽性對照0.5mL0.5mL無檢測抗原-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋樣本稀釋液6mL3mL無底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無試劑的準(zhǔn)備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;3.待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。甲肝病毒抗體ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷1.試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15。2.臨界值(Cutoff)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.153.陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cutoff),樣品為陰性4.陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cutoff),樣品為陽性試劑盒性能1.準(zhǔn)確性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15,說明試驗結(jié)果有效。2.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。4.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。5.有效期:6個月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。2.嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。[詳細(xì)]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
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犬瘟熱病毒(CDV)ELISA試劑盒使用說明
- 犬瘟熱病毒(CDV)ELISA試劑盒使用說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2ng/L-50ng/L使用目的:本試劑盒用于測定犬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中瘟熱病毒(CDV)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中犬瘟熱病毒(CDV)水平。用純化的犬瘟熱病毒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入瘟熱病毒(CDV),再與HRP標(biāo)記的瘟熱病毒抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瘟熱病毒(CDV)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中犬瘟熱病毒(CDV)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(96ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。48ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液24ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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禽流感病毒(AIV)ELISA試劑盒說明書
- 禽流感病毒(AIV)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中禽流感病毒(AIV)表達(dá)。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中禽流感病毒(AIV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中禽流感病毒(AIV)的存在與否。禽流感病毒(AIV)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8陽性對照0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9陰性對照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。禽流感病毒(AIV)ELISA試劑盒操作步驟1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計算和結(jié)果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為禽流感病毒(AIV)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為禽流感病毒(AIV)陽性。注意事項1.操作嚴(yán)格按照禽流感病毒(AIV)ELISA試劑盒說明書進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人腮腺炎病毒IgG ELISA試劑盒
- 人腮腺炎病毒IgG ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:09
專利
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人流感H1N1病毒ELISA試劑盒
- 人流感H1N1病毒ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-15 18:16
應(yīng)用文章
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人腮腺炎病毒IgM ELISA試劑盒
- 人腮腺炎病毒IgM ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 04:17
課件
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艾然供應(yīng)大鼠β-葡萄糖苷酶elisa試劑盒
- 艾然供應(yīng)大鼠β-葡萄糖苷酶elisa試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
操作手冊
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供應(yīng)副嗜血桿菌(HPS)ELISA試劑盒
- 供應(yīng)副嗜血桿菌(HPS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-02-27 00:00
應(yīng)用文章
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