本文由 上海滬宇生物科技有限公司 整理匯編

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• 小鼠核因子kb受體活化因子配體elisa試劑盒使用方法

  實驗原理：本試劑盒應用夾心法測定標本中小鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL）水平。用純化的小鼠核因子kb受體活化因子（RANK）包被微孔板，制成固相受體，往包被受體的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體（RANKL），再與HRP標記的RANKL受體結合，形成受體-配體-酶標受體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL））含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：900pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為600pmol/L，400pmol/L，200pmol/L，100pmol/L，50pmol/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• 小鼠核因子kb受體活化因子配體（ RANKL）試劑盒使用方法

  本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中核因子kb受體活化因子配體（RANKL）的含量。實驗原理：本試劑盒應用夾心法測定標本中小鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL）水平。用純化的小鼠核因子kb受體活化因子（RANK）包被微孔板，制成固相受體，往包被受體的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體（RANKL），再與HRP標記的RANKL受體結合，形成受體-配體-酶標受體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠核因子kb受體活化因子配體（RANKL））含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：900pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存[詳細]

  2018-09-19 10:01

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• 大鼠核因子kb受體活化因子配體試劑盒使用說明書

  大鼠核因子kb受體活化因子配體試劑盒使用說明書[詳細]

  2015-04-08 00:00

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• 核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法

  使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中核因子κB受體活化因子配基（RANKL）含量。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）水平。用純化的大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子κB受體活化因子配基（RANKL），再與HRP標記的核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB受體活化因子配基（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（960pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pmol/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液240pmol/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液120pmol/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液60pmol/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液30pmol/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• 大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒

  大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T20pmol/L-500pmol/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞核因子kb受體活化因子配（RANKL）水平。用純化的大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL），再與HRP標記的細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（960pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pmol/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液240pmol/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液120pmol/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液60pmol/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液30pmol/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月__[詳細]

  2018-09-19 10:01

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• 大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體elisa試劑盒實驗原理

  檢測范圍：96T20pmol/L-500pmol/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）水平。用純化的大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL），再與HRP標記的細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞核因子kb受體活化因子配體（RANKL）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（960pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產品樣冊

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• 小鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒

  小鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  專利

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• 人核因子kb受體活化因子配基酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  檢測范圍：96T30pmol/L-1000pmol/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中核因子kb受體活化因子配基（RANKL）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人核因子kb受體活化因子配基（RANKL）水平。用純化的人核因子kb受體活化因子配基（RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配基（RANKL），再與HRP標記的核因子kb受體活化因子配基（RANKL）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配基（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人核因子kb受體活化因子配基（RANKL）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（2000pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]

  2018-10-03 10:00

  產品樣冊

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• 小鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑

  小鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑[詳細]

  2013-12-09 00:00

  實驗操作

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• 兔核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒

  兔核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-13 00:00

  專利

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• 倉鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒

  倉鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-18 18:06

  實驗操作

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• 大鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒

  大鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-20 13:27

  安裝說明

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• 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基檢測試劑盒說明

  小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒說明書該試劑盒以HRP標記的鏈霉親和素復合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎，可用于檢測血液,細胞、組織內的特異性CD40抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的CD40一抗與相應靶抗原結合后，用生物化二抗與一抗特異性結合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進口分裝）已稀釋的即用型CD40一抗（2.5ml）試劑D（原裝進口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復：根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫度達到98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復，直接進入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明；16.封片：待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測試劑盒注意事項：1.修復后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導致結晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應低速離心，將內蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結果觀察。5.如須復染細胞核，則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。附1：抗原修法常用抗原修復液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復法酶消化修復切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復法微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調整。三、直接高壓抗原修復法取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。四、隔水式高壓抗原修復法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 核因子受體活化因子配基試劑檢測說明

  使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中核因子κB受體活化因子配基（RANKL）含量。核因子受體活化因子配基試劑檢測說明實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）水平。用純化的大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子κB受體活化因子配基（RANKL），再與HRP標記的核因子κB受體活化因子配基（RANKL）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB受體活化因子配基（RANKL）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（960pmol/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。核因子受體活化因子配基試劑檢測說明操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pmol/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液240pmol/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液120pmol/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液60pmol/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液30pmol/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結：：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。核因子受體活化因子配基試劑檢測說明注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• 大鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑

  大鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑[詳細]

  2024-09-21 06:29

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• 小鼠凋亡相關因子配體（sFas-L）ELISA試劑盒說明書

  小鼠凋亡相關因子配體（sFas-L）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠sFas-L單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的sFas-L與單抗結合，加入生物素化的抗小鼠sFas-L，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，sFas-L濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中sFas-L濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：10ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液作1：10稀釋（取20ul，加標本稀釋液180ul,稀釋10倍）。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應sFas-L含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的sFas-L檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠sFas-L。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒

  小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  應用文章

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• 小鼠白血病YZ因子受體（LIFR）ELISA試劑盒

  雞補體3裂解產物（C3SP）ELISA試劑盒ChickenComplement3splitproduct,C3SPELISA試劑盒96T/48T小鼠白血病YZ因子受體（LIFR）ELISA試劑盒雞腎上腺髓質素（ADM）ELISA試劑盒Chickenadrenomedullin,ADMELISA試劑盒96T/48T雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1（AmAC-1）ELISA試劑盒ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISA試劑盒96T/48T雞免疫核糖核酸（Irna）ELISA試劑盒ChickenImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒96T/48T【小鼠白血病YZ因子受體（LIFR）ELISA試劑盒技術與自動化過程】在一般的概念里，ELISA技術的可操作性強，不需復雜設備，甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結果，便可完成小鼠白血病YZ因子受體（LIFR）ELISA試劑盒技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強，盡可能做到Zdi限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動強度等觀念的不斷改進，解決ELISA技術中加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的系統(tǒng)誤差問題及GX率運作問題導致了自動化概念的形成。ELISA技術的加樣、溫育、洗板及判讀結果過程的科學地、有機地、系統(tǒng)地結合，盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響，便成為自動化ELISA技術的理論基礎。在自動化ELISA技術中，可以將整個體系分成加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)及判讀系統(tǒng)、機械臂系統(tǒng)、液路動力系統(tǒng)及軟件控制系統(tǒng)等幾種結構，這些系統(tǒng)既獨立又緊密聯(lián)系。加樣系統(tǒng)包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤、試劑架及加樣臺等構件。加樣針有兩手中，一為有TEFLON涂層的金屬針，另一為可更換的一次性加樣頭（Tip）0有些儀器的加樣針只配金屬針，無一次性加樣頭，有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑，它是靠液路動力系統(tǒng)提供動力，通過注射器樣的分配器進行極ng確加樣的。加樣針的數(shù)量在各型號儀器上是不同的，有一根的、兩根的或多根的O條碼閱讀器是幫助識別標本的重要工作，目前的儀器均配有此裝置。樣品盤除了放置標本外，還能放置稀釋標本用的稀釋管，供不同檢測目的使用。試劑架是供放置酶標記試劑、顯色液、終止液等試劑用的，有些型號的儀器這一部分是獨立的，有些是并在樣品盤上O加樣臺是酶標板放置的平臺，有些儀器在臺上設置溫育裝置，讓溫育在臺上進行O整個加樣系統(tǒng)由控制軟件進行協(xié)調操作。溫育系統(tǒng)主要由加溫器及易導熱的金屬材料板架構成O有些是盒式的，有些是臺式的O一般控制的溫度可在室溫-50°C之間。溫育時間及溫度設置是由控制軟件需確調控的。洗板系統(tǒng)是整個體系的重要組成部分，主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項洗板的洗板殘留量一般控制在5L以內。**設備可控制在2L內。洗板次數(shù)可通過軟件控制實現(xiàn)并可更改次數(shù)。讀板系統(tǒng)由光源、激光片、光導纖維、鏡片和光電倍增管組成，是酶促反應Z突結果客觀判讀的設備。各型號儀器的比色探頭配置不一樣，有單頭的3也有8頭的?？刂栖浖ㄟ^機械臂和輸送軌道將酶標板送入讀板器進行自動比色，再將光信號轉變成數(shù)據(jù)信號又回送到軟件系統(tǒng)進行分析，Z終得出結果。酶標板的移動靠機械臂或軌道運輸系統(tǒng)來完成。機械臂的另一重要功能是移動抽樣針O機械系統(tǒng)的運動受控子控制軟件，其運動非常地極ng確和到位。雞表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒96T/48T雞胰島素樣生長因子1（IGF-1）ELISA試劑盒ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒96T/48T雞生長激素（GH）ELISA試劑盒Chickengrowthhormone,GHELISA試劑盒96T/48T雞乙酰乙酸檢測（ACAC）ELISA試劑盒ChickenAcetoaceticacid,ACACELISA試劑盒96T/48T雞傳染性鼻炎抗體（IC）ELISA試劑盒Chickeninfectiouscoryza,icELISA試劑盒96T/48T雞透明質酸（HA）ELISA試劑盒ChickenHyaluronicacid,HAELISA試劑盒96T/48T雞硫酸類肝素（HS）ELISA試劑盒Chickenheparansulfate,HSELISA試劑盒96T/48T雞催乳素（PRL）ELISA試劑盒Chickenprolactin,PRLELISA試劑盒96T/48T雞白血病病毒抗原（ALV-AG）ELISA試劑盒ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒96T/48T雞促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒96T/48T雞促黃體激素（LH）ELISA試劑盒ChickenLuteinizingHormone,LHELISA試劑盒96T/48T雞γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒ChickenInterferonγ,IFN-γELISA試劑盒96T/48T雞白介素6（IL-6）ELISA試劑盒ChickenInterleukin6,IL-6ELISA試劑盒96T/48T雞碳酸酐酶（CA）ELISA試劑盒Chickencarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒96T/48T雞抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）ELISA試劑盒ChickenAnti-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒96T/48T雞熱休克蛋白20（HSP-20）ELISA試劑盒ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒96T/48T雞熱休克蛋白60（Hsp-60）ELISA試劑盒ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒96T/48T雞17羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒Hydroxycorticosteroids,17-OHCSELISA試劑盒96T/48T雞白介素4（IL-4）ELISA試劑盒ChickenInterleukin4,IL-4ELISA試劑盒96T/48T雞白介素2（IL-2）ELISA試劑盒ChickenInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒96T/48T雞一氧化氮（NO）ELISA試劑盒Chickennitricoxide,NOELISA試劑盒96T/48T雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體（HSVⅡ-Ab）ELISA試劑盒ChickenHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒96T/48T[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

  小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-24 01:43

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• 人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒

  人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-16 03:36

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