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小鼠核因子kb受體活化因子配體( RANKL)試劑盒使用方法
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2018-09-19 10:01 390閱讀次數(shù)
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本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中核因子kb受體活化因子配體(RANKL)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)水平。用純化的小鼠核因子kb受體活化因子(RANK)包被微孔板,制成固相受體,往包被受體的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體(RANKL),再與HRP標(biāo)記的RANKL受體結(jié)合,形成受體-配體-酶標(biāo)受體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL))含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:900pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存
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小鼠核因子kb受體活化因子配體( RANKL)試劑盒使用方法
- 本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中核因子kb受體活化因子配體(RANKL)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)水平。用純化的小鼠核因子kb受體活化因子(RANK)包被微孔板,制成固相受體,往包被受體的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體(RANKL),再與HRP標(biāo)記的RANKL受體結(jié)合,形成受體-配體-酶標(biāo)受體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL))含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:900pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠核因子kb受體活化因子配體elisa試劑盒使用方法
- 實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL)水平。用純化的小鼠核因子kb受體活化因子(RANK)包被微孔板,制成固相受體,往包被受體的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配體(RANKL),再與HRP標(biāo)記的RANKL受體結(jié)合,形成受體-配體-酶標(biāo)受體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配體(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠核因子kb受體活化因子配體(RANKL))含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:900pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為600pmol/L,400pmol/L,200pmol/L,100pmol/L,50pmol/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠核因子kb受體活化因子配體試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 大鼠核因子kb受體活化因子配體試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-04-08 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
- 小鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
專利
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核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法
- 使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核因子κB受體活化因子配基(RANKL)含量。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)水平。用純化的大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核因子κB受體活化因子配基(RANKL),再與HRP標(biāo)記的核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB受體活化因子配基(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480pmol/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pmol/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pmol/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pmol/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pmol/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測(cè)樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)::計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。核因子受體活化因子配基試劑盒使用方法注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
- 兔核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-13 00:00
專利
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倉(cāng)鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
- 倉(cāng)鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-18 18:06
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
- 大鼠核因子B受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-20 13:27
安裝說(shuō)明
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大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒
- 大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T20pmol/L-500pmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配(RANKL)水平。用純化的大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480pmol/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pmol/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pmol/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pmol/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pmol/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月__[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
- 檢測(cè)范圍:96T20pmol/L-500pmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)水平。用純化的大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL),再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠細(xì)胞核因子kb受體活化因子配體(RANKL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人核因子kb受體活化因子配基酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 檢測(cè)范圍:96T30pmol/L-1000pmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核因子kb受體活化因子配基(RANKL)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人核因子kb受體活化因子配基(RANKL)水平。用純化的人核因子kb受體活化因子配基(RANKL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核因子kb受體活化因子配基(RANKL),再與HRP標(biāo)記的核因子kb受體活化因子配基(RANKL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子kb受體活化因子配基(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人核因子kb受體活化因子配基(RANKL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(2000pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基檢測(cè)試劑盒說(shuō)明
- 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD40抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD40一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測(cè)試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型CD40一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見(jiàn)附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法酶消化修復(fù)切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來(lái)水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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核因子受體活化因子配基試劑檢測(cè)說(shuō)明
- 使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中核因子κB受體活化因子配基(RANKL)含量。核因子受體活化因子配基試劑檢測(cè)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)水平。用純化的大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入核因子κB受體活化因子配基(RANKL),再與HRP標(biāo)記的核因子κB受體活化因子配基(RANKL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子κB受體活化因子配基(RANKL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。核因子受體活化因子配基試劑檢測(cè)說(shuō)明操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。480pmol/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液240pmol/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120pmol/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60pmol/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30pmol/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測(cè)樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)::計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。核因子受體活化因子配基試劑檢測(cè)說(shuō)明注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑
- 小鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑
- 大鼠可溶性核因子B受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑[詳細(xì)]
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2024-09-21 06:29
實(shí)驗(yàn)操作
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小鼠凋亡相關(guān)因子配體(sFas-L)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 小鼠凋亡相關(guān)因子配體(sFas-L)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠sFas-L單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的sFas-L與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠sFas-L,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,sFas-L濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中sFas-L濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。正常標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sFas-L含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的sFas-L檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠sFas-L。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠γ干擾素受體(IFN-γR )試劑盒使用方法
- 檢測(cè)范圍:96T20ng/L-600ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中巨噬細(xì)胞中γ干擾素受體(IFN-γR)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠γ干擾素受體(IFN-γR)水平。用純化的小鼠γ干擾素受體(IFN-γR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素受體(IFN-γR),再與HRP標(biāo)記的γ干擾素受體(IFN-γR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素受體(IFN-γR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠γ干擾素受體(IFN-γR)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(1200ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人可溶性凋亡相關(guān)因子配體酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T100pg/ml3200pg/ml[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
- 小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
應(yīng)用文章
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小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
- 雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒ChickenComplement3splitproduct,C3SPELISA試劑盒96T/48T小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒Chickenadrenomedullin,ADMELISA試劑盒96T/48T雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISA試劑盒96T/48T雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒ChickenImmuneRNA,IrnaELISA試劑盒96T/48T【小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒技術(shù)與自動(dòng)化過(guò)程】在一般的概念里,ELISA技術(shù)的可操作性強(qiáng),不需復(fù)雜設(shè)備,甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成小鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng),盡可能做到Zdi限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度等觀念的不斷改進(jìn),解決ELISA技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的系統(tǒng)誤差問(wèn)題及GX率運(yùn)作問(wèn)題導(dǎo)致了自動(dòng)化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過(guò)程的科學(xué)地、有機(jī)地、系統(tǒng)地結(jié)合,盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響,便成為自動(dòng)化ELISA技術(shù)的理論基礎(chǔ)。在自動(dòng)化ELISA技術(shù)中,可以將整個(gè)體系分成加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)及判讀系統(tǒng)、機(jī)械臂系統(tǒng)、液路動(dòng)力系統(tǒng)及軟件控制系統(tǒng)等幾種結(jié)構(gòu),這些系統(tǒng)既獨(dú)立又緊密聯(lián)系。加樣系統(tǒng)包括加樣針、條碼閱讀器、樣品盤、試劑架及加樣臺(tái)等構(gòu)件。加樣針有兩手中,一為有TEFLON涂層的金屬針,另一為可更換的一次性加樣頭(Tip)0有些儀器的加樣針只配金屬針,無(wú)一次性加樣頭,有些是兩種針都配備。加樣針的功能主要是加樣品及試劑,它是靠液路動(dòng)力系統(tǒng)提供動(dòng)力,通過(guò)注射器樣的分配器進(jìn)行極ng確加樣的。加樣針的數(shù)量在各型號(hào)儀器上是不同的,有一根的、兩根的或多根的O條碼閱讀器是幫助識(shí)別標(biāo)本的重要工作,目前的儀器均配有此裝置。樣品盤除了放置標(biāo)本外,還能放置稀釋標(biāo)本用的稀釋管,供不同檢測(cè)目的使用。試劑架是供放置酶標(biāo)記試劑、顯色液、終止液等試劑用的,有些型號(hào)的儀器這一部分是獨(dú)立的,有些是并在樣品盤上O加樣臺(tái)是酶標(biāo)板放置的平臺(tái),有些儀器在臺(tái)上設(shè)置溫育裝置,讓溫育在臺(tái)上進(jìn)行O整個(gè)加樣系統(tǒng)由控制軟件進(jìn)行協(xié)調(diào)操作。溫育系統(tǒng)主要由加溫器及易導(dǎo)熱的金屬材料板架構(gòu)成O有些是盒式的,有些是臺(tái)式的O一般控制的溫度可在室溫-50°C之間。溫育時(shí)間及溫度設(shè)置是由控制軟件需確調(diào)控的。洗板系統(tǒng)是整個(gè)體系的重要組成部分,主要由支持板架、洗液注入針及液體迸出言路等組成。;洗液注入針一般是8頭的。每項(xiàng)洗板的洗板殘留量一般控制在5L以內(nèi)。**設(shè)備可控制在2L內(nèi)。洗板次數(shù)可通過(guò)軟件控制實(shí)現(xiàn)并可更改次數(shù)。讀板系統(tǒng)由光源、激光片、光導(dǎo)纖維、鏡片和光電倍增管組成,是酶促反應(yīng)Z突結(jié)果客觀判讀的設(shè)備。各型號(hào)儀器的比色探頭配置不一樣,有單頭的3也有8頭的??刂栖浖ㄟ^(guò)機(jī)械臂和輸送軌道將酶標(biāo)板送入讀板器進(jìn)行自動(dòng)比色,再將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù)信號(hào)又回送到軟件系統(tǒng)進(jìn)行分析,Z終得出結(jié)果。酶標(biāo)板的移動(dòng)靠機(jī)械臂或軌道運(yùn)輸系統(tǒng)來(lái)完成。機(jī)械臂的另一重要功能是移動(dòng)抽樣針O機(jī)械系統(tǒng)的運(yùn)動(dòng)受控子控制軟件,其運(yùn)動(dòng)非常地極ng確和到位。雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒96T/48T雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒96T/48T雞生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒Chickengrowthhormone,GHELISA試劑盒96T/48T雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)ELISA試劑盒ChickenAcetoaceticacid,ACACELISA試劑盒96T/48T雞傳染性鼻炎抗體(IC)ELISA試劑盒Chickeninfectiouscoryza,icELISA試劑盒96T/48T雞透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒ChickenHyaluronicacid,HAELISA試劑盒96T/48T雞硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒Chickenheparansulfate,HSELISA試劑盒96T/48T雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒Chickenprolactin,PRLELISA試劑盒96T/48T雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒96T/48T雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒96T/48T雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒ChickenLuteinizingHormone,LHELISA試劑盒96T/48T雞γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒ChickenInterferonγ,IFN-γELISA試劑盒96T/48T雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒ChickenInterleukin6,IL-6ELISA試劑盒96T/48T雞碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒Chickencarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒96T/48T雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒ChickenAnti-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒96T/48T雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒96T/48T雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒96T/48T雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒Hydroxycorticosteroids,17-OHCSELISA試劑盒96T/48T雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒ChickenInterleukin4,IL-4ELISA試劑盒96T/48T雞白介素2(IL-2)ELISA試劑盒ChickenInterleukin2,IL-2ELISA試劑盒96T/48T雞一氧化氮(NO)ELISA試劑盒Chickennitricoxide,NOELISA試劑盒96T/48T雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒ChickenHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒96T/48T[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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