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大鼠(Rat)低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒說明書
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本文由 上海盈公生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2018-09-27 10:00 397閱讀次數(shù)
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本試劑僅供研究使用ELISA檢測試劑盒試驗原理:HIF-1α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知HIF-1α濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將HIF-1α和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HIF-1α的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標(biāo)記的抗HIF-1α抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800pg/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的HIF-1α標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的HIF-1α含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、ELISA檢測試劑盒檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml
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大鼠(Rat)低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒說明書
- 本試劑僅供研究使用ELISA檢測試劑盒試驗原理:HIF-1α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知HIF-1α濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將HIF-1α和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HIF-1α的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標(biāo)記的抗HIF-1α抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800pg/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的HIF-1α標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的HIF-1α含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、ELISA檢測試劑盒檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
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2013-12-10 00:00
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2018-09-14 10:00
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人低氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)ELISA試劑盒
- 人低氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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操作手冊
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2015-09-18 00:00
安裝說明
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人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
- 人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)水平。用純化的人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α),再與HRP標(biāo)記的低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)濃度。人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標(biāo)試劑3ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。人低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬低氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)ELISA試劑盒
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2024-09-28 00:34
課件
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人低氧誘導(dǎo)因子1(HIF-1)ELISA試劑盒
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2024-09-28 00:42
標(biāo)準(zhǔn)
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低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)ELISA試劑盒說明
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2024-09-29 05:17
實驗操作
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人低氧誘導(dǎo)因子ELISA 檢測試劑盒
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2016-03-01 00:00
操作手冊
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低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒說明書
- 低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9.按照中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlMLZE人黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子規(guī)格:48T/96TMCAb人黑色素細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TMSH人黑色素細(xì)胞刺激素規(guī)格:48T/96TMMSAM人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子規(guī)格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96TMAGE人黑色素瘤相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96TMART/Melan-A人黑色素瘤標(biāo)記物規(guī)格:48T/96TNF-κBp65人核因子-κB亞基p65親和肽規(guī)格:48T/96TRANKL人核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96TRNASE人核糖核酸酶規(guī)格:48T/96TAg-NORs人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白規(guī)格:48T/96TNMP-22人核基質(zhì)蛋白22規(guī)格:48T/96TLPO人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶規(guī)格:48T/96TPPAR-γ人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96TPPARs人過氧化物酶體增殖因子活化受體規(guī)格:48T/96TPPAR-α人過氧化物酶體增殖物激活受體α規(guī)格:48T/96TC4a人過敏毒素/補體片斷4規(guī)格:48T/96TFDA人果糖1,6二磷酸醛縮酶規(guī)格:48T/96TP-CK人廣譜細(xì)胞角蛋白規(guī)格:48T/96TCasp-9人胱天蛋白酶9規(guī)格:48T/96TCasp-3人胱天蛋白酶3規(guī)格:48T/96TCasp-12人胱天蛋白酶12規(guī)格:48T/96Toligomeric人寡聚蛋白規(guī)格:48T/96T[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠HIF-1a單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HIF-1a與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠HIF-1a,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,HIF-1a濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HIF-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0PG/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HIF-1a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HIF-1a檢測濃度小于78pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠HIF-1a。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11.6%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠(Rat)基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒說明書
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HE1542大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)elisa試劑盒HE1543大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)elisa試劑盒HE1544大鼠乙醇脫氫酶(ADH)elisa試劑盒HE1545大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)elisa試劑盒HE1546大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原14(sCD14)elisa試劑盒HE1547大鼠多巴胺D2受體(D2R)elisa試劑盒HE1548大鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)elisa試劑盒HE1549大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)elisa試劑盒HE1550大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)elisa試劑盒HE1551大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)elisa試劑盒HE1552大鼠白介素2受體(IL-2R)elisa試劑盒HE1553大鼠β羥丁酸(βOHB)elisa試劑盒HE1554大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)elisa試劑盒HE1555大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa試劑盒HE1556大鼠網(wǎng)膜素(omentin)elisa試劑盒HE1557大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa試劑盒HE1558大鼠淋巴細(xì)胞因子elisa試劑盒HE1559大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)elisa試劑盒HE1560大鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)elisa試劑盒HE1561大鼠補體因子H(CFH)elisa試劑盒HE1562大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)elisa試劑盒HE1563大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)elisa試劑盒HE1564大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)elisa試劑盒HE1565大鼠白介素27(IL-27)elisa試劑盒HE1566大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒HE1567大鼠P53(P53)elisa試劑盒HE1568大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa試劑盒HE1569大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4elisa試劑盒HE1570大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒HE1571大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)elisa試劑盒HE1572大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)elisa試劑盒HE1573大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)elisa試劑盒HE1574大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)elisa試劑盒HE1575大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)elisa試劑盒HE1576大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)elisa試劑盒HE1577大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa試劑盒HE1578大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)elisa試劑盒HE1579大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒HE1580大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒HE1581大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)elisa試劑盒HE1582大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)elisa試劑盒HE1583大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)elisa試劑盒HE1584大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)elisa試劑盒HE1585大鼠S100蛋白(S-100)elisa試劑盒HE1586大鼠S100B蛋白(S-100B)elisa試劑盒HE1587大鼠白介素1(IL-1)elisa試劑盒HE1588大鼠白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒HE1589大鼠白三烯B4(LTB4)elisa試劑盒HE1590大鼠白血病YZ因子受體(LIFR)elisa試劑盒HE1591大鼠表皮生長因子(EGF)elisa試劑盒HE1592大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa試劑盒HE1593大鼠端粒酶(TE)elisa試劑盒HE1594大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)elisa試劑盒HE1595大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)elisa試劑盒HE1596大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)elisa試劑盒HE1597大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)elisa試劑盒HE1598大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)elisa試劑盒HE1599大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)elisa試劑盒HE1600大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)elisa試劑盒HE1601大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa試劑盒HE1602大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)elisa試劑盒HE1603大鼠免疫球蛋白A(IgA)elisa試劑盒HE1604大鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa試劑盒HE1605大鼠免疫球蛋白G(IgG)elisa試劑盒HE1606大鼠免疫球蛋白M(IgM)elisa試劑盒HE1607大鼠內(nèi)皮抑素(ES)elisa試劑盒HE1608大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)elisa試劑盒HE1609大鼠前列腺素E2(PGE2)elisa試劑盒HE1610大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)elisa試劑盒HE1611大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa試劑盒HE1612大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)elisa試劑盒HE1613大鼠纖溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)elisa試劑盒HE1614大鼠纖溶酶原激活物YZ因子(PAI)elisa試劑盒HE1615大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa試劑盒HE1616大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)elisa試劑盒HE1617大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)elisa試劑盒HE1618大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa試劑盒HE1619大鼠血小板活化因子(PAF)elisa試劑盒HE1620大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒HE1621大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)elisa試劑盒HE1622大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒HE1623大鼠組織因子(TF)elisa試劑盒HE1624大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)elisa試劑盒HE1625大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)elisa試劑盒HE1626大鼠白介素13(IL-13)elisa試劑盒HE1627大鼠白介素15(IL-15)elisa試劑盒HE1628大鼠白介素16(IL-16)elisa試劑盒HE1629大鼠白介素17(IL-17)elisa試劑盒HE1630大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa試劑盒HE1631大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa試劑盒HE1632大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa試劑盒HE1633大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa試劑盒HE1634大鼠白介素3(IL-3)elisa試劑盒HE1635大鼠白介素5(IL-5)elisa試劑盒HE1636大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)elisa試劑盒HE1637大鼠瘦素(LEP)elisa試劑盒HE1638大鼠白血病YZ因子(LIF)elisa試劑盒HE1639大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa試劑盒HE1640大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa試劑盒HE1641大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa試劑盒HE1642大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa試劑盒HE1643大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa試劑盒HE1644大鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa試劑盒HE1645大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒HE1646大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa試劑盒HE1647大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa試劑盒HE1648大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa試劑盒HE1649大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa試劑盒HE1650大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)elisa試劑盒HE1651大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)elisa試劑盒HE1652大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)elisa試劑盒HE1653大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa試劑盒HE1654大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)elisa試劑盒HE1655大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)elisa試劑盒HE1656大鼠骨保護素(OPG)elisa試劑盒HE1657大鼠B因子(BF)elisa試劑盒HE1658大鼠抑瘤素M(OSM)elisa試劑盒HE1659大鼠胎盤生長因子(PLGF)elisa試劑盒HE1660大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒HE1661大鼠正常T細(xì)胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒HE1662大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)elisa試劑盒HE1663大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)elisa試劑盒HE1664大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)elisa試劑盒HE1665大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒HE1666大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)elisa試劑盒HE1667大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)elisa試劑盒HE1668大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)elisa試劑盒HE1669大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子3(TIMP-3)elisa試劑盒HE1670大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)elisa試劑盒HE1671大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒HE1672大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒HE1673大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa試劑盒HE1674大鼠血小板生成素(TPO)elisa試劑盒HE1675大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)elisa試劑盒HE1676大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)elisa試劑盒HE1677大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)elisa試劑盒HE1678大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)elisa試劑盒HE1679大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)elisa試劑盒HE1680大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)elisa試劑盒HE1681大鼠白介素12(IL-12/P70)elisa試劑盒HE1682大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(VEGF-B)elisa試劑盒HE1683大鼠白介素12(IL-12/P40)elisa試劑盒HE1684大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(VEGF-C)elisa試劑盒HE1685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大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa試劑盒HE1829大鼠胃蛋白酶(Pepsin)elisa試劑盒HE1830大鼠氫化可的松(HYD)elisa試劑盒HE1831大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)elisa試劑盒HE1832大鼠C型鈉尿肽(CNP)elisa試劑盒HE1833大鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)elisa試劑盒HE1834大鼠同型半胱氨酸(Hcy)elisa試劑盒HE1835大鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)elisa試劑盒HE1836大鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)elisa試劑盒HE1837大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)elisa試劑盒HE1838大鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒HE1839大鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa試劑盒HE1840大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)elisa試劑盒HE1841大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa試劑盒HE1842大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa試劑盒HE1843大鼠阿立新A(OrexinA)elisa試劑盒HE1844大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa試劑盒HE1845大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒HE1846大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)elisa試劑盒HE1847大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)elisa試劑盒HE1848大鼠羥脯氨酸(Hyp)elisa試劑盒HE1849大鼠骨保護素配體(OPGL)elisa試劑盒HE1850大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa試劑盒HE1851大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)elisa試劑盒HE1852大鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒HE1853大鼠碳酸酐酶2(CA-2)elisa試劑盒HE1854大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)elisa試劑盒HE1855大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)elisa試劑盒HE1856大鼠抗胰蛋白酶(AT)elisa試劑盒HE1857大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)elisa試劑盒HE1858大鼠腎損傷分子1(Kim-1)elisa試劑盒HE1859大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)elisa試劑盒HE1860大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒HE1861大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)elisa試劑盒HE1862大鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)elisa試劑盒HE1863大鼠纖溶YZ因子/凝血酶激活的纖溶YZ物(TAFI)elisa試劑盒HE1864大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)elisa試劑盒HE1865大鼠游離脂肪酸(FFA)elisa試劑盒HE1866大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)elisa試劑盒HE1867大鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒HE1868大鼠葉酸(FA)elisa試劑盒HE1869大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)elisa試劑盒HE1870大鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa試劑盒HE1871大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒HE1872大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)elisa試劑盒HE1873大鼠腦紅蛋白(NGB)elisa試劑盒HE1874大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒HE1875大鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒HE1876大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒HE1877大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)elisa試劑盒HE1878大鼠髓過氧化物酶(MPO)elisa試劑盒HE1879大鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒HE1880大鼠顆粒酶A(Gzms-A)elisa試劑盒HE1881大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa試劑盒HE1882大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)elisa試劑盒HE1883大鼠補體蛋白4(C4)elisa試劑盒HE1884大鼠腎素(Renin)elisa試劑盒HE1885大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa試劑盒HE1886大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)elisa試劑盒HE1887大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒HE1888大鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)elisa試劑盒HE1889大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa試劑盒HE1890大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)elisa試劑盒HE1891大鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒HE1892大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)elisa試劑盒HE1893大鼠血清一氧化氮(NO)elisa試劑盒HE1894大鼠補體蛋白3(C3)elisa試劑盒HE1895大鼠疊氮胸苷(AZT)elisa試劑盒HE1896大鼠多巴胺(DA)elisa試劑盒HE1897大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa試劑盒HE1898大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)elisa試劑盒HE1899大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)elisa試劑盒HE1900大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)elisa試劑盒HE1901大鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)elisa試劑盒HE1902大鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)elisa試劑盒HE1903大鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa試劑盒HE1904大鼠apelin12(AP12)elisa試劑盒HE1905大鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒HE1906大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測elisa試劑盒HE1907大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒HE1908大鼠內(nèi)毒素(ET)elisa試劑盒HE1909大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)elisa試劑盒HE1910大鼠環(huán)孢素A(CsA)elisa試劑盒HE1911大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa試劑盒HE1912大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)elisa試劑盒HE1913大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)elisa試劑盒HE1914大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)elisa試劑盒HE1915大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)elisa試劑盒HE1916大鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒HE1917大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)elisa試劑盒HE1918大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa試劑盒HE1919大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa試劑盒HE1920大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa試劑盒HE1921大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa試劑盒HE1922大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)elisa試劑盒HE1923大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa試劑盒HE1924大鼠血管緊張素原(aGT)elisa試劑盒HE1925大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)elisa試劑盒HE1926大鼠丙二醛(MDA)elisa試劑盒HE1927大鼠超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒HE1928大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)elisa試劑盒HE1929大鼠血清總補體(CH50)elisa試劑盒HE1930大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)elisa試劑盒HE1931大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)elisa試劑盒HE1932大鼠胰淀素(Amylin)elisa試劑盒HE1933大鼠白三烯C4(LTC4)elisa試劑盒HE1934大鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)elisa試劑盒HE1935大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)elisa試劑盒HE1936大鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)elisa試劑盒HE1937大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa試劑盒HE1938大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)elisa試劑盒HE1939大鼠補體片斷5a(C5a)elisa試劑盒HE1940大鼠補體片斷3a(C3a)elisa試劑盒HE1941大鼠卵泡抑素(FS)elisa試劑盒HE1942大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒HE1943大鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa試劑盒HE1944大鼠甲基化酶(Methylase)elisa試劑盒HE1945大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)elisa試劑盒HE1946大鼠脂蛋白脂酶(LPL)elisa試劑盒HE1947大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒HE1948大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa試劑盒HE1949大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)elisa試劑盒HE1950大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)elisa試劑盒HE1951大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)elisa試劑盒HE1952大鼠甲狀腺素抗體(TAb)elisa試劑盒HE1953大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)elisa試劑盒HE1954大鼠兒茶酚胺(CA)elisa試劑盒HE1955大鼠白介素23(IL-23)elisa試劑盒HE1956大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)elisa試劑盒HE1957大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)elisa試劑盒HE1958大鼠脂蛋白α(Lp-α)elisa試劑盒HE1959大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)elisa試劑盒HE1960大鼠凝血因子IX(FIX)elisa試劑盒HE1961大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)elisa試劑盒HE1962大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa試劑盒HE1963大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒HE1964大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa試劑盒HE1965大鼠抗凝血酶受體(ATR)elisa試劑盒HE1966大鼠凝血酶受體(TR)elisa試劑盒HE1967大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa試劑盒HE1968大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa試劑盒HE1969大鼠蛋白激酶B(PKB)elisa試劑盒HE1970大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)elisa試劑盒HE1971大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa試劑盒HE1972大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)elisa試劑盒HE1973大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)elisa試劑盒HE1974大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒HE1975大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)elisa試劑盒HE1976大鼠骨橋素(OPN)elisa試劑盒HE1977大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa試劑盒HE1978大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa試劑盒HE1979大鼠半胱氨酸蛋白酶YZ劑/胱抑素C(Cys-C)elisa試劑盒HE1980大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa試劑盒HE1981大鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)elisa試劑盒HE1982大鼠γ氨基丁酸(GABA)elisa試劑盒HE1983大鼠5羥色胺(5-HT)elisa試劑盒HE1984大鼠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2018-11-15 10:00
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特價銷人低氧誘導(dǎo)因子1aELISA檢測試劑盒促銷
- 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:HIF-1α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知HIF-1α濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將HIF-1α和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,人低氧誘導(dǎo)因子1aELISA檢測試劑盒然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HIF-1α的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。人低氧誘導(dǎo)因子1aELISA檢測試劑盒使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,人低氧誘導(dǎo)因子1aELISA檢測試劑盒輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的HIF-1α標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的HIF-1α含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重組鼠粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml細(xì)胞分離液1.077200mlCLS1077-1-200ml細(xì)胞分離液1.077(FICOLL配置)200mlCLS1083-200ml細(xì)胞分離液1.083200mlCLS1092-200ml細(xì)胞分離液1.092200mlCLS1113-200ml細(xì)胞分離液1.113200mlCLS1119-200ml細(xì)胞分離液1.119200mlRC085-20ugRecombinantMurineGM-CSF重組鼠粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子20ug[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠HIF-1a單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HIF-1a與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠HIF-1a,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,HIF-1a濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HIF-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0PG/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HIF-1a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HIF-1a檢測濃度小于78pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠HIF-1a。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11.6%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人缺氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)ELISA試劑盒說明書
- 人缺氧誘導(dǎo)因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HIF-1a單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HIF-1a與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人HIF-1a,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,HIF-1a濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HIF-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0PG/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HIF-1a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HIF-1a檢測濃度小于78pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人HIF-1a。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于11.6%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠 (Rat)堿性磷酸酶 (ALP) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 大鼠(Rat)堿性磷酸酶(ALP)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理:ALP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ALP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將ALP和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ALP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800IU/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標(biāo)記的抗ALP抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800IU/L(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400IU/L(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200IU/L(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100IU/L(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50IU/L(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25IU/L(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0IU/L(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(IU/L)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的ALP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的ALP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800IU/L4、敏感度:1.0IU/L[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠 (Rat) 緩激肽 (Bradykinin) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 大鼠(Rat)緩激肽(Bradykinin)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理:Bradykinin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Bradykinin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將Bradykinin和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Bradykinin的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標(biāo)記的抗Bradykinin抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800pg/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Bradykinin標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的Bradykinin含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠 (Rat) 雌激素 (Estrogen) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 大鼠(Rat)雌激素(Estrogen)ELISA檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:Estrogen試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Estrogen濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將Estrogen和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Estrogen的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗Estrogen抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:80ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40ng/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Estrogen標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的Estrogen含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
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