本文由 上海谷研生物科技有限公司 整理匯編

2015-05-27 00:00 415閱讀次數(shù)

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  豬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-05-27 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗豬VEGF單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的VEGF與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗豬VEGF，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，VEGF濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中VEGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)VEGF含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的VEGF檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的豬VEGF。不與豬其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍：20ng/L-800ng/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)水平。用純化的豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)，再與HRP標(biāo)記的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。800ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-05 00:00

  其它

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• 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-25 00:10

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• 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 18:08

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• 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-20 03:55

  專利

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• 雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒

  雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 13:46

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（sVCAM-1）ELISA試劑盒

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子-1（sVCAM-1）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗豬sVCAM-1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的sVCAM-1與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗豬sVCAM-1，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，sVCAM-1濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中sVCAM-1濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1：20稀釋（取10ul，加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sVCAM-1含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的sVCAM-1檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的豬sVCAM-1。不與豬其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

  豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-12 00:00

  期刊論文

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• 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒

  豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-20 13:38

  操作手冊(cè)

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• 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒

  在小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒實(shí)驗(yàn)前的我們應(yīng)該要特別注意的有以下幾點(diǎn)：一、請(qǐng)老師看清楚說(shuō)明書(shū)內(nèi)容。二、廠家發(fā)貨的盒子都是Z近生產(chǎn)的，但在實(shí)驗(yàn)前還是要確定一下生產(chǎn)日期。三、另外要根據(jù)試劑盒組成查看小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa代測(cè),VEGF試劑盒所包含的試劑是否齊全。四、酶標(biāo)板可以用多少拆卸多少，剩余部分做點(diǎn)處理低溫保存。五、實(shí)驗(yàn)所用到的酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱[詳細(xì)]

  2018-10-23 10:30

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人（Human）血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA檢測(cè)試劑盒

  人（Human）血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：VEGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知VEGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將VEGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中VEGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制：試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）塑料膜板蓋1塊半塊標(biāo)準(zhǔn)品：480ng/ml1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素標(biāo)記的抗VEGF抗體1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）親和鏈酶素-HRP1瓶（12ml）1瓶（5ml）洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）自備材料：1.蒸餾水。2.加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法：1、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作注意事項(xiàng)：●試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。●實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)?！癫挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用?！袷褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器?！袷褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲?。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。●底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值?！窦尤朐噭┑捻樞驊?yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣?！癜凑照f(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。安全性：1.避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準(zhǔn)備：1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：480ng/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul240ng/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120ng/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60ng/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30ng/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15ng/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對(duì)照）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。試劑盒性能：1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟：1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。結(jié)果判斷與分析：1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的VEGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的VEGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-480ng/ml4、敏感度：1.0ng/ml上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司主營(yíng)產(chǎn)品：ELISA試劑盒，酶免試劑盒，試劑盒，進(jìn)口抗體，血清，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，生物試劑、ATCC細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)耗材等。電話：021-60517348QQ：2675483613[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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  大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2014-09-29 00:00

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  2016-07-25 00:00

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  2023-08-18 11:43

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