對(duì)微納器件進(jìn)行表征時(shí)，常關(guān)注的便是器件的表面形貌和三維尺寸信息，比如粗糙度、深度、體積等，這些都是評(píng)價(jià)微納加工工藝的重要指標(biāo)。然而，在進(jìn)行表面三維的分析工作中，我們可能常遇到這樣的苦惱：

　　光學(xué)明場(chǎng)無法直接定位到亞微米級(jí)缺陷結(jié)構(gòu)!

　　樣品結(jié)構(gòu)太復(fù)雜，微弱信號(hào)無法捕獲，難以準(zhǔn)確測(cè)量尺度信息!

　　三維接觸式測(cè)量經(jīng)常會(huì)損傷柔軟樣品，導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確!

　　今天，友碩小編將從下面幾個(gè)角度來看看蔡司激光共聚焦顯微鏡如何幫助你更好地解決這些問題。

　　失效分析：多尺度多維度原位分析!

　　器件表面往往存在一些特殊的結(jié)構(gòu)或缺陷，比如亞微米尺度的劃痕，這些特征難以在光學(xué)明場(chǎng)下被直接觀察到。C-DIC(圓微分干涉)觀察模式可以讓樣品表面亞微米尺度的微小起伏都可以呈現(xiàn)出浮雕效果，幫助我們快速定位并開展下一步的分析工作。

　　▲ 不同觀察方式下晶圓表面缺陷

　　在定位到感興趣區(qū)域后，可以直接切換到共聚焦模式，進(jìn)行表面三維形貌掃描，并進(jìn)行尺寸測(cè)量及分析，無需轉(zhuǎn)移樣品即可完成樣品多尺度多維度的表征。

　　▲共聚焦三維圖像及深度測(cè)量

　　對(duì)于某些樣品，暗場(chǎng)和熒光模式也是一種很好定位方法，表面起伏的結(jié)構(gòu)在暗場(chǎng)下尤其明顯，如藍(lán)寶石這類能發(fā)熒光的晶圓，利用熒光成像也能幫助我們快速地定位到失效結(jié)構(gòu)。甚至，共聚焦還可以和電鏡或者雙束電鏡(FIB)(點(diǎn)擊查看)實(shí)現(xiàn)原位關(guān)聯(lián)，在共聚焦顯微鏡下進(jìn)行定位后轉(zhuǎn)移樣品到電鏡下進(jìn)行更高分辨的表征分析。

　　深硅刻蝕：結(jié)構(gòu)深，信號(hào)弱，蔡司激光共聚焦顯微鏡有辦法!

　　深硅刻蝕的樣品通常為窄而深的溝壑結(jié)構(gòu)。接觸式測(cè)量(如臺(tái)階儀)無法接觸到溝壑底部測(cè)得信息，而由于結(jié)構(gòu)特殊造成了反射光信號(hào)損失，常規(guī)白光干涉或者顯微明場(chǎng)無法捕獲底面的微弱信號(hào)。因此，不得不對(duì)樣品進(jìn)行裂片分析，這不僅破壞了樣品，而且還使分析流程復(fù)雜化。

　　西湖大學(xué)張先鋒老師用蔡司激光共聚焦顯微鏡對(duì)深163.905 μm，寬3.734μm的刻蝕坑進(jìn)行成像，高靈敏探測(cè)器、大功率激光及Z Brightness Correction技術(shù)可以幫助成功檢測(cè)到底部的微弱信號(hào)，完成大深寬比(近50：1)樣品的三維形貌表征與測(cè)量，輕松實(shí)現(xiàn)無損檢測(cè)分析。

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脂質(zhì)納米粒簡(jiǎn)介

脂質(zhì)納米粒(Lipid Nanoparticle，LNP)是一種粒徑介于 10-1000 nm 的新型藥物遞送載體，由多種有機(jī)材料、無機(jī)材料、金屬 - 有機(jī)框架或這些材料組合而成，可作為化學(xué)與生物制劑之間傳遞的媒介，脂質(zhì)納米粒包裹藥物可顯著提高藥物的穩(wěn)定性與生物利用度。[1]目前脂質(zhì)納米粒廣泛應(yīng)用于mRNA疫苗遞送、腫瘤治 療、抗 炎和抗感染藥物載體、治 療神經(jīng)退行性疾病、抗瘧等領(lǐng)域。

脂質(zhì)脂質(zhì)納米?？煞譃楣腆w脂質(zhì)脂質(zhì)納米粒(Solid Lipid Nanoparticles，SLN)和納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(Nanostructured Lipid Carriers，NLC)。固體脂質(zhì)脂質(zhì)納米粒（SLN）主要是由固體脂質(zhì)、表面活性劑、有效成分和水制備的膠體顆粒，具有生物相容性好、有機(jī)溶劑使用少、體內(nèi)穩(wěn)定性高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。但在儲(chǔ)藏過程中仍存在載藥量低、易凝膠化和藥物泄漏等問題；為此，研發(fā)人員嘗試在固體脂質(zhì)壁材中加入一定量的液體油脂，打亂了原來單純固體脂質(zhì)壁材的有序的晶體結(jié)構(gòu)，負(fù)載活性成分的量得到了提高，也使得晶體結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，不易發(fā)生泄露等現(xiàn)象。[2-3]

圖1 LNP的結(jié)構(gòu)[3]

脂質(zhì)納米粒靶向性研究是藥物遞送熱點(diǎn)研究方向之一，考慮到納米藥物自身性質(zhì)的影響，可通過對(duì)其自身物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行調(diào)控，如粒徑、表面電荷、表面修飾物等，以此來增加脂質(zhì)納米粒藥物的滲透作用。目前還開發(fā)了各種粒徑可調(diào)控的納米遞藥系統(tǒng)，Li 等[4，5]構(gòu)建了一種酸刺激響應(yīng)型脂質(zhì)納米粒，可以在低 pH 條件下將其粒徑從 100 nm 縮減到5 nm。脂質(zhì)納米粒的初始尺寸有利于長(zhǎng)時(shí)間的血液循環(huán)，當(dāng)?shù)竭_(dá)腫瘤部位后，酸性環(huán)境刺激脂質(zhì)納米粒發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，粒徑縮小，有助于脂質(zhì)納米粒外滲和組織滲透。除 pH 響應(yīng)外，腫瘤組織處特異的酶環(huán)境、腫瘤細(xì)胞內(nèi)的還原環(huán)境和光、熱、磁等外部刺激都可以用于調(diào)控納米藥物的粒徑和表面電荷。[5]

除平均粒徑外，脂質(zhì)納米粒的尾端大顆粒和過小顆粒也會(huì)影響納米藥物的效果，尾端大顆粒容易造成脂質(zhì)納米粒聚集，影響藥物的穩(wěn)定性和安全性，小顆粒（＜5nm）會(huì)被直接臟快速地過濾清除，影響藥物的有效性。過濾可有效減少脂質(zhì)納米粒藥物中的大顆粒和雜質(zhì)，提高脂質(zhì)納米粒藥物的穩(wěn)定性。

Alpharmaca

奧法美嘉平臺(tái)提供整套的脂質(zhì)納米粒均一性和穩(wěn)定性的解決方案，可用于快速評(píng)估、優(yōu)化脂質(zhì)納米粒的配方和工藝：高壓微射流均質(zhì)機(jī)、微流控技術(shù)對(duì)脂質(zhì)納米粒進(jìn)行均質(zhì)乳化分散處理、Nicomp粒度分析儀分析平均粒徑、AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器分析大粒子濃度，Lum穩(wěn)定性分析儀快速分析脂質(zhì)納米粒藥物穩(wěn)定性，Entegris-ANOW濾芯過濾雜質(zhì)及大顆粒。

脂質(zhì)納米粒的制備技術(shù)

傳統(tǒng)的脂質(zhì)納米粒制備技術(shù)，包括乙醇注入法、薄膜分散法、逆向蒸發(fā)法、凍融法等，存在粒徑分布廣和批間重復(fù)性大等問題，對(duì)藥物開發(fā)的臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)具有很大的影響。為了解決傳統(tǒng)制備方法的弊端，微流控混合技術(shù)、高壓微射流技術(shù)、高壓均質(zhì)等新型制備技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。

高壓微射流制備方法：制備水相、油相，經(jīng)過混合、剪切步驟形成初乳，初乳經(jīng)微射流均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，而后除 菌過濾得到脂質(zhì)納米粒。

微流控混合技術(shù)制備方法：制備水相、油相，將水相油相經(jīng)過微流控均質(zhì)乳化后，除 菌過濾得到脂質(zhì)納米粒。

無論是通過何種方法制備脂質(zhì)納米粒藥物，后續(xù)都需要對(duì)其平均粒徑、尾端大顆粒、穩(wěn)定性進(jìn)行檢測(cè)來篩選配方，PSS的Nicomp粒度分析儀可用于測(cè)試平均粒徑、AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器可用于測(cè)試大顆粒濃度、Lum穩(wěn)定性分析儀可用于快速篩選在不同工藝制備下脂質(zhì)納米粒藥物的穩(wěn)定性。

圖2 高壓微射流法制備脂質(zhì)納米粒

圖3 微流控混合技術(shù)法制備脂質(zhì)納米粒

脂質(zhì)納米粒的粒徑控制

脂質(zhì)納米粒的粒徑與其靶向性和有效性緊密相關(guān)，粒徑小且分布窄是脂質(zhì)納米粒藥物的理想粒徑。微流控技術(shù)通過微米通道控制流體的流動(dòng)和混合，具有良好的單分散性、可控性及重現(xiàn)性，可改善脂質(zhì)納米粒的均一性和藥物包封效率，并實(shí)現(xiàn)高通量生產(chǎn)，已成功應(yīng)用于Covid-19 mRNA 疫苗的制備[6]。高壓微射流均質(zhì)技術(shù)使物料在高壓作用下以高速度流經(jīng)腔體，經(jīng)過剪切、碰撞、空穴效應(yīng)等物理作用降低脂質(zhì)納米粒的平均粒徑，可對(duì)脂質(zhì)納米粒初乳進(jìn)一步均質(zhì)分散。

高壓微射流均質(zhì)機(jī)

PSI-20高壓微射流均質(zhì)機(jī)（小試兼中試型）采用固定結(jié)構(gòu)的均質(zhì)腔，通過電液傳動(dòng)的增壓器使物料在高壓作用下以極大的速度流經(jīng)交互容腔的微管通道，物料流在此過程中受到高剪切力、高碰撞力、空穴效應(yīng)等物理作用，使得平均粒徑降低、體系均一穩(wěn)定，由此獲得理想的均質(zhì)、分散、去團(tuán)聚的結(jié)果。

圖4 PSI高壓微射流均質(zhì)機(jī)

最 高2069 bar的均質(zhì)壓力，最 高處理量20L/h（PSI-20）

采用特殊設(shè)計(jì)Y型腔，去除尾端大顆粒效果佳，物料的混合更均一，處理效率高。

屏顯界面，數(shù)據(jù)可溯源：支持?jǐn)?shù)據(jù)導(dǎo)出設(shè)定壓力及實(shí)時(shí)壓力、監(jiān)測(cè)點(diǎn)溫度、實(shí)時(shí)流量、時(shí)間等。

配置K型熱電偶：可用于實(shí)施監(jiān)測(cè)料液溫度。

低噪音：運(yùn)行音量低于70分貝，工作環(huán)境友好型。

NanoSpirit 系列微流控藥物制劑遞送平臺(tái)

微流控制備系統(tǒng)通過制造泵和高壓輸送泵與微流控芯片連接。A相和B相可以按一定比例以恒定速度混合和乳化。在微流控芯片中，設(shè)計(jì)不同的流道結(jié)構(gòu)，控制不同的速度，使樣品在微流控芯片中湍流、層流或霧化，可以滿足預(yù)乳化或再乳化的要求。還可以將制備好的樣品通過高壓泵輸送到高壓微流控芯片中，通過沖擊力和剪切力控制粒徑，達(dá)到達(dá)到所需的包封率、粒徑、粒徑分布均一性等要求。

圖5 NanoSpirit 系列

高精度流量控制（＜5‰）。

可提供多項(xiàng)可調(diào)參數(shù)（ 反應(yīng)量、流速等）。

多型號(hào)微流芯片通用，適合多種載體類型。

注射器規(guī)格：0.25，1，2.5，5，10 ml。

自動(dòng)充液、反應(yīng)、前后排廢、清洗等工能

平均粒徑與Zeta電位檢測(cè)

脂質(zhì)納米粒徑不同使藥物富集在不同部位可現(xiàn)不同治 療 效果。應(yīng)用于腫瘤治 療領(lǐng)域的脂質(zhì)納米粒，由于腫瘤組織處血管豐富，血管壁間隙較寬且結(jié)構(gòu)完整性差，具有適宜尺寸的脂質(zhì)納米粒（60-200 nm）可通過 EPR 效應(yīng)在腫瘤處積聚，實(shí)現(xiàn)納米藥物的被動(dòng)靶向。

脂質(zhì)納米粒電性一般呈中性或輕微負(fù)電性，在血液循環(huán)中，高正電性的脂質(zhì)納米粒會(huì)吸附蛋白質(zhì)，被迅速清除，進(jìn)而影響脂質(zhì)納米粒的藥代動(dòng)力學(xué)和生物分布。相比之下，中性脂質(zhì)納米粒以及帶有輕微負(fù)電荷的脂質(zhì)納米粒則顯示出延長(zhǎng)的半衰期。Zeta電位是衡量藥物穩(wěn)定性指標(biāo)之一，Zeta電位的絕 對(duì)值越高，體系越穩(wěn)定。

Nicomp納米激光粒度儀系列

Nicomp系列納米激光粒度儀采用動(dòng)態(tài)光散射原理檢測(cè)分析樣品的粒度分布，基于多普勒電泳光散射原理檢測(cè)ZETA電位。

圖6  Nicomp 3000系列

粒徑檢測(cè)范圍0.3nm-10μm，ZETA電位檢測(cè)范圍為+/-500mV

搭載Nicomp多峰算法，可以實(shí)時(shí)切換成多峰分布觀察各部分的粒徑。

高分辨率的納米檢測(cè)，Nicomp納米激光粒度儀對(duì)于小于10nm的粒子仍然顯示較好的分辨率和準(zhǔn)確度。

圖7  高斯粒徑分布圖                      圖8  多峰粒徑分布圖

顆粒分布檢測(cè)

尾端大顆粒的存在會(huì)影響藥物本身的穩(wěn)定性，由于表面積增大，使得體系形成熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，容易發(fā)生脂質(zhì)納米粒聚集以降低體系自由能現(xiàn)象。尾端大顆粒的存在還會(huì)對(duì)身體機(jī)能造成影響，較大的顆粒（> 200 nm）容易積聚在肝臟和脾 臟中，影響藥物安全性；粒徑極小（< 5 nm）的顆粒則會(huì)被腎臟快速地過濾清除，影響藥物的有效性。

AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器系列

AccuSizer系列在檢測(cè)液體中顆粒數(shù)量的同時(shí)精確檢測(cè)顆粒的粒度及粒度分布，通過搭配不同傳感器、進(jìn)樣器，適配不同的樣本的測(cè)試需求，能快速而準(zhǔn)確地測(cè)量顆粒粒徑以及顆粒數(shù)量/濃度。

圖9 AccuSizer系列

檢測(cè)范圍為0.5μm-400μm（可將下限拓展至0.15μm）。

0.01μm的超高分辨率，AccuSizer系列具有1024個(gè)數(shù)據(jù)通道，能反映復(fù)雜樣品的細(xì)微差異，為研發(fā)及品控保駕護(hù)航。

靈敏度高達(dá)10PPT級(jí)別，即使只有微量的顆粒通過傳感器，也可以精 準(zhǔn)檢測(cè)出來。

可出具法規(guī)報(bào)告

LumiSpoc單粒子顆粒計(jì)數(shù)器

LumiSpoc采用單粒子光散射技術(shù)（SPLS），通過在光學(xué)流通池中進(jìn)行流體動(dòng)力聚焦，將單個(gè)粒子排列成一條直線。通過調(diào)整流動(dòng)條件來調(diào)整樣品濃度，從而避免濃度峰值的影響。當(dāng)單個(gè)納米或者微米顆粒經(jīng)過特殊光束截面的激光束時(shí)，記錄其正向和側(cè)向散射的光強(qiáng)。根據(jù)米氏理論，將分類強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為粒度分布密度。通過軟件分析顯示計(jì)數(shù)分布、顆粒濃度。在行業(yè)內(nèi)已有使用Lumispoc用于顆粒濃度的監(jiān)測(cè)成功案例。

圖10 LumiSpoc單粒子顆粒計(jì)數(shù)器

顆粒粒徑檢測(cè)范圍：50 nm ~ 8 μm（取決于樣品）

顆粒濃度檢測(cè)范圍：1 × 106 ml-1 ~ 1 × 109 ml-1

進(jìn)樣體積：250 μl

穩(wěn)定性分析檢測(cè)

穩(wěn)定性是評(píng)價(jià)藥物制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，也是確定藥物制劑使用期限的主要依據(jù)。藥物制劑若發(fā)生分解、變質(zhì)，可導(dǎo)致藥效降低，甚至產(chǎn)生或增加毒副作用，危及患者的身體健康和生命安全，Zeta電位、尾端大顆粒濃度都是衡量藥物穩(wěn)定性的指標(biāo)之一。除此之外，還可以使用穩(wěn)定性分析儀測(cè)量樣品的分離、沉降、懸浮或澄清、浮離、聚集、凝聚或產(chǎn)品存放期以及粒徑分布。

LUM穩(wěn)定性分析儀

Lum穩(wěn)定性分析儀可以直接測(cè)量整個(gè)樣品的分散體的穩(wěn)定性，檢測(cè)和區(qū)分各種不穩(wěn)定現(xiàn)象，如上浮、絮凝、聚集、聚結(jié)、沉降等，通過測(cè)量結(jié)果可用來開發(fā)新的配方和優(yōu)化現(xiàn)有的配方及工藝。

圖11 LUM穩(wěn)定性分析儀

快速、直接測(cè)試穩(wěn)定性，無需稀釋，溫度范圍寬廣

可同時(shí)測(cè)8個(gè)樣品，測(cè)量及辨別不同的不穩(wěn)定現(xiàn)象及不穩(wěn)定性指數(shù)

加速離心，最高等效2300倍重力加速度

過濾

經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)或微流控技術(shù)處理的脂質(zhì)納米粒，還需進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪^濾工藝，用于去除脂質(zhì)納米粒藥物中的尾端大顆粒和雜質(zhì)，提高藥物的穩(wěn)定性和安全性。濾膜的材質(zhì)和型號(hào)將影響脂質(zhì)納米粒藥物的過濾效率和效果，綜合考慮膜與納米藥物配方的兼容性、成本、效率等多方面因素選擇合適的濾膜。

Entegris濾芯

Entegris-Anow是一家高分子微孔膜過濾企業(yè)，專業(yè)從事MCE、Nylon、PES、PVDF、PTFE等（膜孔徑為0.03μm~10μm）微孔膜的研發(fā)及生產(chǎn)，具有二十多年服務(wù)與醫(yī)藥客戶經(jīng)驗(yàn)，并為全 球生物制藥、醫(yī)療器械、食品飲料、實(shí)驗(yàn)室分析、微電子及工業(yè)等領(lǐng)域的客戶提供過濾、分離和凈化解決方案。

萬家燈火，歡樂元宵！

納克微束祝大家好夢(mèng)皆圓！

引言：量子點(diǎn)及微腔的研究對(duì)于許多應(yīng)用來說越來越重要，例如單光子源，量子計(jì)算機(jī)的量子比特，電信設(shè)備，頻率梳或非線性光學(xué)。這些應(yīng)用有很多接近量子極限，并且依賴于高性能光源，從而能夠滿足其對(duì)于線寬、噪聲、高分辨率調(diào)頻、靈活度以及控制方面的苛刻要求。通常，人們運(yùn)用無跳?？烧{(diào)諧窄線寬激光來檢測(cè)、研究和使用量子點(diǎn)及微腔的共振頻率。

微腔

由于微腔的尺寸小，他們的自由光譜范圍相對(duì)較大，即便是很小的幾何尺寸變化都會(huì)帶

來較大的譜線漂移。因此，寬范圍無跳?？烧{(diào)激光對(duì)于尋找和研究微腔共振頻率是非常有價(jià)值的。微腔的光譜特性與其幾何大小以及其他環(huán)境參數(shù)有關(guān)，這些特點(diǎn)可被應(yīng)用于溶液中單生物分子的無標(biāo)記檢測(cè)，這是一個(gè)非常有前景的領(lǐng)域。

微腔的電子顯微鏡圖像，該微腔被用于驗(yàn)證光與機(jī)械諧振子的參數(shù)耦合

該應(yīng)用的實(shí)現(xiàn)需要利用微型環(huán)狀光諧振器配合寬范圍無跳?？烧{(diào)諧激光，如Toptica CTL 可調(diào)諧激光器：

CTL 連續(xù)可調(diào)諧激光器

CTL 激光器是Littman 結(jié)構(gòu)的外腔可調(diào)諧激光器，在具備高功率，窄線寬的同時(shí)，還可以保證極高的/相對(duì)波長(zhǎng)精度和極高的掃描分辨率。du創(chuàng)光學(xué)機(jī)械設(shè)計(jì)以及稱為SMILE（單模智能環(huán)路引擎）的有源反饋回路能夠使激光始終處于同一模式。

特點(diǎn)：

? 無跳?？烧{(diào)范圍高達(dá)120 nm，可選波長(zhǎng)：950, 1050, 1320, 1470, 1500 以及1550 nm

? 輸出功率Z大可達(dá)100 mW

? 高分辨率，低噪音，低漂移

? 采用了DLC pro 數(shù)字控制器，極低的噪音和精確的控制，方便的本地和遠(yuǎn)程操作，智能鎖定功能。

提供了直觀的用戶界面：借助觸摸屏和旋鈕，可以輕松調(diào)整掃描，放大觀察到的功能，激活頻率鎖定等。

窄線寬

多種可選功能 

應(yīng)用：

全新的CTL 激光器對(duì)于需要無跳模寬范圍的應(yīng)用是非常理想的光源：

-量子點(diǎn)

-微腔

-光譜學(xué)

-器件測(cè)試

除此之外還有多種類型可調(diào)諧激光器，涵蓋以下波段，詳細(xì)的產(chǎn)品參數(shù)請(qǐng)咨詢森泉光電～

抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）作為一種生物ZL候選藥物是近年來的研究熱點(diǎn)。ADC藥物是將單克隆抗體的腫瘤特異性和靶向性與GX的小分子藥物的細(xì)胞毒性結(jié)合成一個(gè)新的藥物分子，從而形成有效的kang癌ZL劑。這些分子由三部分組成：?jiǎn)慰寺】贵w、穩(wěn)定的連接物以及細(xì)胞毒性小分子藥物。

ADC藥物的藥效和清除率都與藥物抗體偶聯(lián)比（DAR）值有關(guān)，因此在藥物開發(fā)過程中必須對(duì)其精確分析。尺寸排阻色譜法和疏水色譜法是在天然生理?xiàng)l件下檢測(cè)DAR的兩種最常用的方法。

在本應(yīng)用中，我們通過SEC-MS和HIC-UV法來對(duì)一個(gè)半胱氨酸偶聯(lián)的ADC藥物模擬物進(jìn)行分析。該模擬物是由LC-SMCC交聯(lián)劑將丹磺?；灩鈭F(tuán)共價(jià)鍵合到IgG1-mAb上，形成一個(gè)載藥量不同（0-8）的抗體混合物。

圖1. 半胱氨酸偶聯(lián)的ADC模擬物

圖2. 半胱氨酸偶聯(lián)的ADC的異質(zhì)性

實(shí)驗(yàn)部分

在SEC-MS方法中，我們選用TSKgel SuperSW3000尺寸排阻色譜柱。將ADC注入該色譜柱中，HPLC系統(tǒng)與質(zhì)譜相連，用于檢測(cè)DAR譜圖。從譜圖中觀察到，每個(gè)主峰之間的分子量差異為1336 Da，對(duì)應(yīng)兩個(gè)丹磺?；鶡晒鈭F(tuán)分子的分子量。SEC/MS分析表明，平均DAR為3.9 。

圖3. ADC模擬物的SEC/MS譜圖

然后，使用疏水色譜柱TSKgel Butyl-NPR和UV檢測(cè)，來確認(rèn)DAR分布情況。mAb抗體結(jié)合的藥物分子數(shù)越多，ADC的疏水性越大，在HIC固定相上的保留時(shí)間更長(zhǎng)，載藥量不同的組分便可得到分離。從DAR譜圖中可以看到，DAR=0-8的各峰之間分離情況很好。

圖4. ADC模擬物的HIC-UV譜圖

結(jié)果與討論

SEC-MS和HIC-UV是有效表征ADC的DAR譜圖的兩種方法。在TSKgel SuperSW3000色譜柱上，使用了質(zhì)譜兼容的流動(dòng)相，通過高分辨率ESI-MS檢測(cè)，驗(yàn)證藥物模擬物中ADC組分的分子量。

HIC-UV方法中，使用TSKgel Butyl-NPR色譜柱對(duì)樣品中各種抗體-載荷的ADC異構(gòu)體進(jìn)行疏水性分析，進(jìn)一步確認(rèn)其DAR分布。結(jié)合這兩種分析方法，可以有效驗(yàn)證ADC生物大分子的DAR譜圖。

近日，來自不來梅大學(xué)微型傳感器、致動(dòng)器和系統(tǒng)(IMSAS)研究所的科學(xué)家們發(fā)明了一種全新的微流道混合方式，即通過堆疊彼此交替的液流來減少擴(kuò)散長(zhǎng)度，并提出了微流控混合的新概念：多級(jí)互換式混合器。

科學(xué)家們使用Nanoscribe公司的3D打印系統(tǒng)，將自由形式3D微流控混合元件集成到預(yù)制的晶圓級(jí)二維微流道中。該微型混合器可以處理高達(dá)100微升/分鐘的高流速樣品，適用于藥物和納米顆粒制造，快速化學(xué)反應(yīng)、生物學(xué)測(cè)量和分析藥物等各種不同應(yīng)用。

上圖：在預(yù)制的二維微流道中3D打印制作壁厚約為2μm的螺旋狀結(jié)構(gòu)三級(jí)微流控混合器。圖片來自于Martin Oellers, Frieder Lucklum and Michael J. Vellekoop, University of Bremen

通過使用Nanoscribe的Photonic Professional打印系統(tǒng)制作的微流控元件完全嵌入進(jìn)預(yù)制的二維微流道系統(tǒng)中，換句話說，科學(xué)家們運(yùn)用3D微納加工技術(shù)將自由形式的3D微流體混合器直接做成微流體芯片。每個(gè)微納混合器都能在30秒內(nèi)制作完成，從而確保了在一小時(shí)內(nèi)完成加工整個(gè)晶圓。這要?dú)w功于Nanoscribe的3D微納加工技術(shù)，可以實(shí)現(xiàn)混合器的快速制作，即從電腦模型設(shè)計(jì)（CAD）到打印樣品的一步式操作流程。

當(dāng)雙光子聚合原理應(yīng)用到傳統(tǒng)光刻技術(shù)

互換式混合器是通過基于雙光子聚合原理（2PP）的Nanoscribe光刻系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn)制作的。DY步，使用SU-8光刻膠在硅晶圓上利用光刻技術(shù)制作二維微通道系統(tǒng)；第二步，運(yùn)用雙光子聚合技術(shù)將3D混合器元件集成到開放式為通道中；打印結(jié)束后在顯影階段將殘留的未聚合材料沖洗掉，除去通道中所有抗蝕劑殘留物；ZH，通過將聚二甲基硅氧烷（PDMS）片壓在微通道的頂部來密封微流體裝置。

三級(jí)微納混合器在微通道中的頂視圖。螺旋狀互換式結(jié)構(gòu)標(biāo)記為紅色。圖片來自于Martin Oellers, Frieder Lucklum andMichael J. Vellekoop, University of Bremen

這種制造方法將3D微納結(jié)構(gòu)集成到了預(yù)制的晶圓級(jí)二維微流體通道中，突出了傳統(tǒng)光刻和雙光子聚合技術(shù)的WM兼容性和ZY性能。研究人員能夠利用系統(tǒng)的高設(shè)計(jì)自由度和超高精度的特點(diǎn)，將復(fù)雜形狀的3D微流體混合器定位到二維微流體通道中。

SEM圖片來自于: Martin Oellers, Frieder Lucklum and Michael J. Vellekoop, University of Bremen

相關(guān)文獻(xiàn)：

On-chip mixing of liquids with swap structures written by two-photon polymerization

網(wǎng)址：https://link.springer.com/article/10.1007/s10404-019-2309-8

研究團(tuán)隊(duì)：

Institute for Microsensors, - actuators and -systems (IMSAS) –University of Bremen

激光共聚焦顯微鏡多少錢？全面解析市場(chǎng)價(jià)格與因素

激光共聚焦顯微鏡（Confocal Laser Scanning Microscope, CLSM）作為現(xiàn)代生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)研究中不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞觀察、組織切片分析以及納米級(jí)材料表征。購(gòu)買這一設(shè)備的決策不僅涉及選擇合適的品牌和型號(hào)，還要考慮設(shè)備的價(jià)格。本文將詳細(xì)探討影響激光共聚焦顯微鏡價(jià)格的多種因素，并為您提供合理的價(jià)格區(qū)間參考，幫助科研人員和實(shí)驗(yàn)室選擇性價(jià)比高的設(shè)備。

激光共聚焦顯微鏡價(jià)格的影響因素

1. 品牌與型號(hào) 激光共聚焦顯微鏡的品牌和型號(hào)直接決定了價(jià)格的高低。知名品牌如萊卡（Leica）、奧林巴斯（Olympus）、卡爾·蔡司（Zeiss）等，通常提供的設(shè)備技術(shù)更加先進(jìn)，圖像質(zhì)量和操作便捷性也相對(duì)更好。這些品牌的高端型號(hào)價(jià)格通常較高，但提供的功能和精度也更加優(yōu)越。

2. 技術(shù)配置與性能 激光共聚焦顯微鏡的價(jià)格還與其技術(shù)配置密切相關(guān)。例如，激光源的類型和數(shù)量、探測(cè)器的種類、掃描速度以及分辨率等性能指標(biāo)會(huì)直接影響價(jià)格。高分辨率的激光顯微鏡能提供更為的圖像，而多通道的激光系統(tǒng)則能夠同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣本的成像，滿足不同科研需求。

3. 附加功能與定制化需求 一些高端激光共聚焦顯微鏡還配有3D成像、超分辨率成像、光片顯微鏡功能等附加功能，這些高性能功能的添加無疑提高了設(shè)備的價(jià)格。部分實(shí)驗(yàn)室可能根據(jù)特殊需求定制化配置，這也可能導(dǎo)致價(jià)格的波動(dòng)。

4. 售后服務(wù)與保修 各廠家提供的售后服務(wù)和保修政策也影響激光共聚焦顯微鏡的終價(jià)格。一些廠家提供長(zhǎng)時(shí)間的技術(shù)支持和設(shè)備維護(hù)服務(wù)，這對(duì)于確保實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的正常運(yùn)行至關(guān)重要，也會(huì)體現(xiàn)在價(jià)格中。

激光共聚焦顯微鏡的市場(chǎng)價(jià)格范圍

根據(jù)目前市場(chǎng)的情況，激光共聚焦顯微鏡的價(jià)格大致在30萬元至200萬元人民幣之間?；A(chǔ)型號(hào)的設(shè)備價(jià)格較為親民，一般適合初級(jí)科研項(xiàng)目或者教學(xué)使用；而高端型號(hào)則配備了更多先進(jìn)功能和更強(qiáng)大的性能，價(jià)格自然也相對(duì)較高。

中低端設(shè)備的價(jià)格通常在30萬元至60萬元之間，適用于基礎(chǔ)的細(xì)胞和組織觀察。而高端設(shè)備的價(jià)格則從100萬元到200萬元不等，這些設(shè)備通常具有超高的分辨率、更強(qiáng)的多重成像能力以及更多定制功能，適合復(fù)雜的科研項(xiàng)目和高精度要求。

結(jié)語(yǔ)

激光共聚焦顯微鏡的價(jià)格受多種因素的影響，包括品牌、型號(hào)、技術(shù)配置、附加功能以及售后服務(wù)等。選擇適合自己實(shí)驗(yàn)室需求的設(shè)備，不僅需要根據(jù)預(yù)算合理規(guī)劃，還需要充分考慮設(shè)備的長(zhǎng)期使用價(jià)值和科研需求。對(duì)于科研人員來說，投資一臺(tái)合適的激光共聚焦顯微鏡將為實(shí)驗(yàn)帶來更高的精度和效率，是科研成功的重要保障。

這篇文章不僅緊扣了“激光共聚焦顯微鏡多少錢”這個(gè)主題，也涵蓋了與價(jià)格相關(guān)的主要因素，具有較強(qiáng)的SEO優(yōu)化效果。