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  399035308 2016-12-01 20:10:34

  可以. 我們經(jīng)常用它來看植物根內(nèi)的GFP. 神經(jīng)生物學(xué)上可以用它來做電生理實驗，當然也是活體啦. CLSM由共聚焦顯微鏡和飛秒紅外激光器Verdi/Mira兩部分組成，是光學(xué)顯微鏡與現(xiàn)代激光技術(shù)，高靈敏探測技術(shù)，掃描控制技術(shù)以及微機圖象處理技術(shù)，熒光及標記技術(shù)的結(jié)合。CLSM為生命科學(xué)開拓了一條觀察生命活細胞的結(jié)構(gòu)及特定分子、離子生物學(xué)變化的新途徑，成為分子細胞生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)，藥理學(xué)，遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代強有力的研究工具。 共聚焦及雙光子具有以下優(yōu)點： 1.熒光標記的特異性及可定量性。 2.共聚焦針孔的運用，有效的消除了焦平面上下散射光，提高軸向分辨率。 3.點光源激光的應(yīng)用，對熒光素能達到有效的激發(fā)，激發(fā)的特異性高，降低對熒光的淬滅，增強側(cè)向分辨率。 4.雙光子的應(yīng)用，相對較低平均功率的紅外激發(fā)，大大減低對活細胞的損傷；熒光激發(fā)高度聚焦在焦點處，可避免了焦點以外的光漂白（Photobleaching）和光毒（cytotoxicity）作用，延長觀察時間，是目前用于活細胞跟蹤的Z理想方法。 5.脈沖激光散射和吸收程度小，透射性強，對厚樣品的穿透可達400um，是對厚的組織分析的Z首先方法。 6.結(jié)合META新技術(shù)，尤其對熒光蛋白成像具有更方便，更精確的效果。 應(yīng)用領(lǐng)域： 共聚焦及雙光子在現(xiàn)代生物學(xué)研究中有如下應(yīng)用： 1.多色熒光成像(Multi-color imaging)，具有多磁道和雙向掃描，曲線掃描等特性。 2.三維重構(gòu)（Three dimentional reconstruction）及定量分析。 3.實時成像（Time series，real time imaging），可進行活細胞跟蹤。 4.離子成像（Ion imaging）/比率成像（Ratio imaging），可進行Ca2+，Mg2+，H+，Na+，K+，Zn2+，Ni2+，F(xiàn)e2+，Hg2+，Pb2+及Cd2+等成像。 5.熒光原位雜交（FISH:fluorescence in situ hybridization）； 6.熒光漂白恢復(fù)（FRAP：fluorescence recovery after photobleaching）； 7.熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRETM:fluorescence resonance energy transfer； 8.光生命期成像顯微術(shù)（FLIM:fluorescence lifetime imaging microscopy）。 9.熒光相關(guān)光譜（FCS:fluorescence correlation spectroscopy）。

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