表達所用的全基因包含在擴增此序列的引物里，怎么用此全基因？
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我“克隆出來的酶基因片段送樣測序的部分”加上我原來“擴增此序列所用的引物上的一部分”才是全基因，要把這個全基因拿來做原核表達，行不行，怎么用這段全基因？應(yīng)該不能用這段克隆序列設(shè)計表達引物吧，用全基因設(shè)計表達引物的話，在原來擴增引物上的那部分... 我“克隆出來的酶基因片段送樣測序的部分”加上我原來“擴增此序列所用的引物上的一部分”才是全基因，要把這個全基因拿來做原核表達，行不行，怎么用這段全基因？應(yīng)該不能用這段克隆序列設(shè)計表達引物吧，用全基因設(shè)計表達引物的話，在原來擴增引物上的那部分序列怎么辦??？ 展開
全部評論(3條)
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- abc040621 2012-10-14 00:00:00
- 意思都表達不清楚，誰來答啊，你倒是說清楚啊
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- a340244226 2012-10-13 00:00:00
- 今天很乖
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- CH68453622 2012-10-26 00:00:00
- 明白一部分意思，告訴你怎么做吧，你現(xiàn)在測序的這個菌株已經(jīng)包括了全長基因。下一步是要把這個全長基因連接到表達載體上。你需要設(shè)計另一對引物，即在起始密碼子和終止密碼子后引入表達載體上的酶切位點即可，這樣PCR出來的產(chǎn)物再連接T載體，測序，酶切，回收目的片段，連接在表達載體上就可以了。 其實你開始設(shè)計引物的時候把酶切位點加進去就可以了，不用費這二遍事了。
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