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- 幻雪夜57 2017-11-21 19:42:41
- 提取細胞總RNA然后用試劑盒反轉錄成cDNA，用cDNA作為模板擴增基因的CDS區(qū)，然后想要轉染進細胞中。比如MYOD1基因，首先在NCBI找到它的mRNA序列，然后找到它的CDS序列，全部復制下來，在primer 5.0 中。正向引物直接從CDS的diyi個核酸開始（比如18bp），反向引物從CDSZ后一個核酸開始，向前選擇序列（比如17bp），調節(jié)2個引物的長度（不一定要一致），盡量避免錯配，二聚體，產生錯的產物即可。Z后在引物的5‘端添加酶切位點以及保護堿基。
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- 老師，你好，我想問克隆基因CDS區(qū)的時候，要設引物，設引物的時候，怎么設比較好
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