開始今天的內(nèi)容之前，先來回答三個問題~

Q1：“今天有好好洗手嗎？”

Q2：“今天出門戴口罩了嗎？”

Q3：“那今天你使用公筷了嗎？”

“公筷公勺”倡議，一直是飲食文化的熱點話題之一。那么使用公筷公勺究竟是不是有必要？

近日，杭州市疾控ZX健康危害因素監(jiān)測所和檢驗ZX的專家們?yōu)榇藢ｉT進(jìn)行了一場有趣的小實驗。

40分鐘，11名專家面對佳肴

只能眼睜睜地看，就是不能動筷

11名疾控專家組成的實驗小組就近選擇了一家餐館。健康危害因素監(jiān)測所檢測人員攜帶了一個藍(lán)白相間的“特殊拉桿箱”——取樣箱，里面裝有無菌袋、手套、口罩、酒精燈、鑷子、剪刀、記號筆等，內(nèi)部還配備了冰排，可冷藏運輸采樣標(biāo)本。

雖然從照片上看有滿滿一桌子的菜肴，但其實這餐飯，專家一共點了6道菜。

那為什么看起來這么多？

健康危害因素監(jiān)測所檢測人員解釋道，每道菜都被分為了兩份。一份使用公筷進(jìn)食，一份不使用公筷進(jìn)食；另外，還特意點了一道菜，作為空白對照。

這一餐飯，太特別了。一桌人眼睜睜看著菜在跟前晃，但就不能動筷，需要等采樣。

檢測人員換上了白大褂、帽子、無菌手套，用酒精燈對鑷子進(jìn)行消毒，他需要在動筷前采集食物樣本作為本底。每份至少25克樣本，經(jīng)過小心翼翼的嚴(yán)格無菌操作采樣后放入無菌樣品袋并迅速存放到采樣箱冷藏。

每個就餐者都要經(jīng)過“上崗”培訓(xùn)

動筷子前，還需要再三思考

沒想到的是不僅采樣費事，吃飯也成了燒腦的技術(shù)活。

每個“就餐者”都要經(jīng)過“上崗”培訓(xùn)，核心要求就是：夾取同一道菜必須使用公筷和不使用公筷交替進(jìn)行，以Z大限度保證每道菜使用公筷和不使用公筷的兩盤被同一人夾取的次數(shù)相同。

“要這么小心翼翼地吃飯也真是頭一遭”一位參與‘實驗’的人員打趣道，生怕一不小心用錯筷子前功盡棄。而且大家還不能放開肚子吃，因為每道菜都要留下一小部分待第二次采樣。

臨近用餐結(jié)束，檢測人員用同樣的步驟再次進(jìn)行取樣。餐前餐后一共取了19份食物樣本。

48小時后結(jié)果出來了

TA終于露出了馬腳

這次實驗采集的樣本通過冷鏈運送至實驗室后，定量進(jìn)行稀釋，取稀釋液加入培養(yǎng)基后培養(yǎng)48小時等待菌落生長。這一系列的高大上的專業(yè)操作，Z終是為了檢測樣本中生長的菌落總數(shù)。

如果樣本本身攜帶的細(xì)菌較多，那么培養(yǎng)48小時后生長形成肉眼可見的菌落總數(shù)也多，反之亦然。

通過菌落總數(shù)的比較來反映就餐中是否使用公筷對菜品受微生物污染程度的影響。

48小時后，實驗結(jié)果出爐了：

實驗共對6道菜品食用前后的樣本進(jìn)行了菌落總數(shù)的檢測，沒有使用公筷的菜品菌落總數(shù)均高于使用公筷的同種菜品。

使用公筷會明顯減少菜品中的細(xì)菌污染，不使用公筷的情況下，一方面大家可能會把自身口鼻腔攜帶的細(xì)菌通過筷子傳遞到菜品上，另一方面也會導(dǎo)致不同菜品本身攜帶細(xì)菌的交叉污染（尤其是冷菜），這些因素都增加了細(xì)菌滋長的機(jī)會。

比如涼拌黃瓜這類涼菜，因為沒有經(jīng)過高溫烹調(diào)本身攜帶的細(xì)菌數(shù)量會多一些。餐前樣本檢測結(jié)果為14000cfu/g，用公筷的剩菜中為16000cfu/g，沒用公筷的則高達(dá)45000cfu/g；干鍋茶樹菇?jīng)]用公筷的結(jié)果為79000cfu/g，而用公筷的只有4600cfu/g。

那我們再來看看那“空白對照”——與剩菜同時采樣、但完全沒吃過的香辣牛蛙。我們可以發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過1個多小時放置，菌落總數(shù)受環(huán)境影響從開始的60cfu/g增長到130cfu/g，趨近公筷的剩菜中為150cfu/g，而沒用公筷的則達(dá)到560cfu/g。

專家呼吁：在外就餐時

提倡帶上自己的筷子和勺子

在此，專家們還是想提醒廣大市民，使用公筷公勺很有必要。它有兩個“顯而易見”的好處：

一、干凈衛(wèi)生、預(yù)防疾病

使用公筷公勺可以避免共同用餐時個人使用的餐具接觸公共食物，減少對菜品的污染，降低病從口入的風(fēng)險，特別是降低胃幽門螺桿菌、甲肝病毒等食源性病原體的傳播。在疫情期間，避免混用餐具也能在一定程度上降低病毒傳播的風(fēng)險。

二、減少浪費、文明餐飲

使用公筷公勺可幫助大家養(yǎng)成定量取餐、按需進(jìn)食的習(xí)慣。在外用餐沒有吃完的，大家可以放心打包回家。減少浪費的同時，還培養(yǎng)了人們環(huán)保節(jié)約的良好風(fēng)尚。

總而言之，無論是杜絕病從口入，保護(hù)家人健康，還是倡導(dǎo)餐飲文明，使用公筷公勺都很有必要。

這次疫情的流行對于改變我們傳統(tǒng)的中式共餐習(xí)慣是一次加強(qiáng)引導(dǎo)的契機(jī)（尤其是近日，北京疫情的再次爆發(fā)，都需要引起大家的警惕）。關(guān)鍵要轉(zhuǎn)變觀念和認(rèn)識，通過每個人堅持不懈的努力，久而久之，使之成為代代相傳的健康生活方式。

*內(nèi)容來源：杭州疾控、網(wǎng)絡(luò)，侵刪

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　　菌落總數(shù)(Totalcoliforms)是判定水質(zhì)被細(xì)菌污染程度的重要指標(biāo)之一，其測定方法也有一定的標(biāo)準(zhǔn)。平皿計數(shù)法是早期傳統(tǒng)的水中菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)檢測方法，其應(yīng)用研究也比較多，如錢冬梅應(yīng)用平皿計數(shù)法測定了生活飲用水中的菌落總數(shù)。這種方法實驗步驟較為繁瑣，對操作人員的專業(yè)水平要求比較高，不適用于應(yīng)急快速檢測，無法對水的衛(wèi)生狀況做出快速評價。

　　酶底物法是近些年來新興的水中菌落總數(shù)檢測方法，操作簡便，結(jié)果易判斷，適用于快速檢測。但不少用戶對此種方法存疑，不知道這種方法出來的檢測結(jié)果是否科學(xué)準(zhǔn)確，下面優(yōu)爾普就以平皿計數(shù)法的檢測結(jié)果為準(zhǔn)，用酶底物法程控定量封口機(jī)進(jìn)行實驗檢測對比。

立科酶底物法程控定量封口機(jī)

酶底物法快速檢測水中菌落總數(shù)實驗

一、實驗操作部分

1、實驗原理

　　酶底物法使用的復(fù)合酶技術(shù)培養(yǎng)基包含多種獨特的酶物質(zhì)，每種酶物質(zhì)都針對不同的細(xì)菌酶設(shè)計(包含普遍的水介傳播細(xì)菌)，所有的酶底物被分解時均產(chǎn)生相同的信號。在檢測菌落總數(shù)時，這個信號顯示為365納米紫外4O城鎮(zhèn)供水NO.22013燈下的熒光。

2、材料與試劑

　　立科定量盤、lmL移液管或移液槍、10mL移液管或移液槍、培養(yǎng)箱(35±1)、6瓦366FIITI紫外燈、紫外燈箱(23cmx30onx17on1)、無菌水。

3、方法步驟

酶底物法檢測方法操作步驟

(1)首先向100mL裝有固體培養(yǎng)基的瓶中加入無菌水至刻度，搖勻，制成液體培養(yǎng)基，然后放置在冰箱中保存，使用有效期為5天。見圖1。

(2)取1mL水樣及9mL液體培養(yǎng)基倒入立科定量盤中。見圖2。

(3)將定量盤蓋好，在水平桌面上旋動將所有水樣分配到定量盤的孔中(孔中的氣泡不會影響結(jié)果)。見圖3。

(4)將定量盤豎起呈垂直90度，將多余的水樣由盤內(nèi)海綿吸收。見圖4。

(5)將定量盤緩慢翻轉(zhuǎn)過來，于培養(yǎng)箱中(35±0.5)培養(yǎng)48h(若結(jié)果為可疑陽性則延長培養(yǎng)時間至72h)。見圖5。

(6)計數(shù)：培養(yǎng)完成后將培養(yǎng)盤蓋打開，用紫外燈在定量盤上方13on處照射，數(shù)顯熒光的孔數(shù)。對照MPN表得出結(jié)果。注意：海綿條顯熒光不必記錄在讀數(shù)范圍內(nèi)。由于本方法的Zda檢測上限為738MPN/mL，如需稀釋時，將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即為報告讀數(shù)(如稀釋l0倍時的操作為：加入0.1mL樣品和9.9mL液體培養(yǎng)基)。

二、結(jié)果與分析

1、盲樣比對實驗--T檢驗分析

　　選取三個水質(zhì)檢測實驗室對比同一盲樣(標(biāo)準(zhǔn)試劑)進(jìn)行酶底物法和平皿計數(shù)法比對試驗，具體試驗結(jié)果如圖。

EPA標(biāo)準(zhǔn)盲樣檢測結(jié)果

　　對比以上酶底物法和平皿計數(shù)法檢出共160個結(jié)果進(jìn)行配對T檢驗，兩種方法的配對T檢驗結(jié)果如下表。

配對檢驗結(jié)果

　　標(biāo)配比變量差值的T檢驗結(jié)果，Mean均值之間的差值為-1.78750，Std.Deviation差值的標(biāo)準(zhǔn)差16.10385，Std.ErrorMean差值的調(diào)準(zhǔn)誤為1.80047，95%ConfidenceIntervaloftheDifference置信區(qū)間上下限為-5.37124和1.79624，t-valuet值為-0.993，df自由度為79，Sig(2-tailed)雙尾T檢驗的結(jié)果，獲得t值的概率P值為0.324，檢驗結(jié)果表明酶底物法和平皿計數(shù)法檢測結(jié)果沒有統(tǒng)計學(xué)意義上的差別(P<0.50)。

2、水樣檢測--線性回歸分析

　　采集地表水水樣進(jìn)行檢測，為保證實驗結(jié)果的有效性和方便統(tǒng)計，要求檢測高、低濃度兩個水樣，同時，要求低濃度水樣的MPN值控制在50MPN/ml左右，高濃度水樣的MPN值控制在100MPN/ml左右，分別從國內(nèi)9個地區(qū)采集水樣，試驗結(jié)果如圖。

實驗室水樣檢測結(jié)果

　　對以上9家實驗室用酶底物法和平皿計數(shù)法共1160個檢測結(jié)果進(jìn)行線性回歸統(tǒng)計分析，兩種方法線性回歸分析見下表。

檢測結(jié)果線性回歸統(tǒng)計分析

　　從圖表中可知，標(biāo)準(zhǔn)化回歸系數(shù)Beta為0.95，表明兩組數(shù)據(jù)相關(guān)性較好，兩種方法的檢測結(jié)果具有可比性。檢驗結(jié)果P=0.00，均小于0.05，表明兩種方法在檢測菌落總數(shù)時沒有顯著差異性，具有等效性。此結(jié)果說明酶底物法的測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，可以替代平皿技術(shù)發(fā)作為水中菌落總數(shù)的測定方法。

　　從上述實驗可以看出，酶底物法快速檢測水中菌落總數(shù)的檢測結(jié)果與平皿計數(shù)法無統(tǒng)計學(xué)意義上的差別，是科學(xué)的、有效的、準(zhǔn)確的，可以用作評價水質(zhì)微生物污染的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。酶底物法操作簡單，結(jié)果判讀容易、準(zhǔn)確，無需稀釋即可檢測738個/1mL水樣，不僅適用于水源水、飲用水的檢測，還適用于應(yīng)急檢測和污水檢測，易于推廣，可以較好的彌補傳統(tǒng)方法的不足。

從事口罩微生物檢測的朋友都知道，在菌落總數(shù)檢測時，經(jīng)常添加TTC這種物質(zhì)，哪什么是TTC？添加TTC又有什么作用？

TTC：俗稱紅四氮唑，學(xué)名2,3,5-三苯基氯化四氮唑，化學(xué)式如下：

在菌落總數(shù)檢測時，添加TTC可以起到兩方面的作用：

其一，TTC可以使菌落顯紅色，便于區(qū)分菌落和雜質(zhì)，更利于計數(shù)；

其二，TTC可以有效的防止平板上的菌落蔓延情況。這兩種作用的原理是不同的，TTC溶于水是無色的，而嗜中溫性需氧菌在新陳代謝過程中產(chǎn)生的琥珀脫氫酶可以使無色的TTC被還原成紅色的TPF，使菌落顯色，這是顯色的原理；同時TTC還具有YZ某些革蘭氏陽性菌生長的作用，因此會防止菌落蔓延。但既然會YZ細(xì)菌的生長，那會不會造成檢測誤差呢？其實只要合理使用，注意添加量，對檢測結(jié)果的影響并不是很大，是可以忽略不計的。

有專家對此做過實驗，實驗結(jié)果表明培養(yǎng)基內(nèi)TTC濃度在0.0003%-0.001%（w/v）的范圍內(nèi)對菌落生長YZ作用不顯著，但濃度太低菌落的顯色效果并不是很好，因此推薦大家按照TTC濃度為0.0005%的量來添加就不會對檢測結(jié)果產(chǎn)生較大影響，還會使菌落顯色方便計數(shù)。為了方便大家在檢測過程中方便添加，潤揚儀器小科特意做了一個表格，方便大家查詢：

除了添加量之外，菌落總數(shù)檢測時使用TTC過程中我們還應(yīng)該注意以下幾點：

要點1：TTC的配制過程，一定要在無菌條件下進(jìn)行。因為我們配制好的TTC溶液在檢測時是直接加入到培養(yǎng)基中的，必須保證TTC溶液時無菌的，配制用水也必須是無菌水。

要點2：TTC具有比較強(qiáng)的光敏性，見光易分解，因此無論是TTC粉末還是配制好的TTC溶液都要注意避光冷藏保存，配制好的溶液一定要放在棕色的試劑瓶里。

要點3：TTC溶液要在菌落總數(shù)檢測過程中直接加入滅菌完的培養(yǎng)基中，即在傾倒平皿之前加入培養(yǎng)基然后搖勻使用。盡量不要將TTC溶液加入培養(yǎng)基后一起滅菌，這樣操作會使培養(yǎng)基顏色加深，不利于顯色和計數(shù)。

要點4：若顯色效果不是很好，可以考慮提高一下TTC濃度，但不要超過0.001%的濃度，否則會使檢測結(jié)果出現(xiàn)比較大的偏差。

要點5：加TTC溶液還可以有效的控制平板培養(yǎng)基上的菌落蔓延情況，若是添加試劑的主要目的是為了控制菌落蔓延，建議增加培養(yǎng)基中TTC的濃度，濃度大約0.0008%時就會起到比較好的效果，并且不會影響結(jié)果。

任何方法都會是雙刃劍，添加TTC顯色當(dāng)然也是如此，添加TTC蕞主要的問題就是它的YJ作用，會造成檢測結(jié)果偏低，因此很多人不愿使用。其實若是不存在雜質(zhì)干擾或者一些特殊情況可以比較準(zhǔn)確的計數(shù)，潤揚儀器小科也建議大家不要一昧因為顯色之后容易計數(shù)就進(jìn)行添加，畢竟這只是在一些特殊情況下采用的非常規(guī)手段。