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薄層色譜法實(shí)驗(yàn)步驟

gongelh31103 2010-01-05 04:08:30 477  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • 西子湖與頤和園 2010-01-06 00:00:00
    薄層色譜法的實(shí)驗(yàn)步驟包括薄層板的制備、點(diǎn)樣、樣品的展開和斑點(diǎn)定位。

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將供試液及供試液a、對(duì)照液b各5ul分別點(diǎn)于薄層板上,并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘,層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和,并且立即用同樣的混合溶劑展開至約15cm。用冷空氣流干燥薄層板,置于碘蒸氣中顯色直... 將供試液及供試液a、對(duì)照液b各5ul分別點(diǎn)于薄層板上,并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘,層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和,并且立即用同樣的混合溶劑展開至約15cm。用冷空氣流干燥薄層板,置于碘蒸氣中顯色直至得到對(duì)照液的主斑點(diǎn),在254nm處用紫外光檢測(cè)。 以上是原文省去了供試液等的制備及Z后結(jié)果的判斷。 我有以下疑問望各位前輩給予指點(diǎn): 1、“并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘”,這個(gè)15分鐘是怎么樣放置的?層析室中是要放展開劑嗎?如果是的話,那不是已經(jīng)開始展開了嗎,何必下面又來句同樣的混合溶劑展開15cm呢?這點(diǎn)到底應(yīng)該怎么操作呢?我以前做其它樣品的時(shí)候是點(diǎn)完樣之后直接展開15cm的,沒有要求放置15分鐘。 2、“層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和”,如果按展開劑8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的話,展開樣品的時(shí)候,豈不是已經(jīng)超過點(diǎn)樣點(diǎn)了嗎?展開劑不是不能夠超過點(diǎn)樣的位置嗎?我是否可以把比例放?。考热荒軌蚍判楹斡终f8:8:84呢,直接說2:2:21呢? 3、我在沒有放置15分鐘和展開劑按2:2:21得時(shí)候,分離效果不是很好,分不開。 謝謝各位,分都給你們了!??! 展開
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