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薄層色譜法具體操作包括什么步驟

koji198888 2018-11-22 21:07:02 476  瀏覽
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薄層色譜法具體操作包括什么步驟
 
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我知道“提取目的基因,目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,目的基因的檢測和表達(dá)。”這么些個(gè)教材上的話,但是一直覺得教材沒寫清楚提取目的基因之后,就要經(jīng)過前三步(... 我知道“提取目的基因,目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,目的基因的檢測和表達(dá)?!边@么些個(gè)教材上的話,但是一直覺得教材沒寫清楚 提取目的基因之后,就要經(jīng)過前三步(如導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi))進(jìn)行擴(kuò)增,以得到大量目的基因(然后再來將這些目的基因?qū)肓硗獾氖荏w。。。)這時(shí)是否也需要進(jìn)行目的基因的檢測呢?怎樣獲取細(xì)菌內(nèi)得到的大量目的基因? 若是把目的基因?qū)胫参锛?xì)胞(如用土壤農(nóng)桿菌),它是怎么把基因整合到植物的基因中去的? 有誰能解答疑難,本人表示感激不盡! 展開
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紙色譜法和薄層色譜法常用正丁醇-乙酸-水(4:1:5,體積比)作為展開劑,要將三種溶劑混合,靜置分層,取上層作展開劑,為什么要取上層? 為什么要這樣制展開劑?
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同上。急!
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TLC薄層色譜法。急?。?!
將供試液及供試液a、對照液b各5ul分別點(diǎn)于薄層板上,并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘,層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和,并且立即用同樣的混合溶劑展開至約15cm。用冷空氣流干燥薄層板,置于碘蒸氣中顯色直... 將供試液及供試液a、對照液b各5ul分別點(diǎn)于薄層板上,并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘,層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和,并且立即用同樣的混合溶劑展開至約15cm。用冷空氣流干燥薄層板,置于碘蒸氣中顯色直至得到對照液的主斑點(diǎn),在254nm處用紫外光檢測。 以上是原文省去了供試液等的制備及Z后結(jié)果的判斷。 我有以下疑問望各位前輩給予指點(diǎn): 1、“并將點(diǎn)好的薄層板置于層析室中放置15分鐘”,這個(gè)15分鐘是怎么樣放置的?層析室中是要放展開劑嗎?如果是的話,那不是已經(jīng)開始展開了嗎,何必下面又來句同樣的混合溶劑展開15cm呢?這點(diǎn)到底應(yīng)該怎么操作呢?我以前做其它樣品的時(shí)候是點(diǎn)完樣之后直接展開15cm的,沒有要求放置15分鐘。 2、“層析中應(yīng)由8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的展開劑的蒸汽所飽和”,如果按展開劑8體積濃氨、8體積甲醇和84體積乙酸乙酯所組成的話,展開樣品的時(shí)候,豈不是已經(jīng)超過點(diǎn)樣點(diǎn)了嗎?展開劑不是不能夠超過點(diǎn)樣的位置嗎?我是否可以把比例放小?既然能夠放小為何又說8:8:84呢,直接說2:2:21呢? 3、我在沒有放置15分鐘和展開劑按2:2:21得時(shí)候,分離效果不是很好,分不開。 謝謝各位,分都給你們了!??! 展開
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什么叫薄層色譜法?原理是什么???!急?。?
我一點(diǎn)也不懂,現(xiàn)在急用。所以請教各位,請說的淺顯點(diǎn),Z好是掃盲級介紹?。?!多謝各位了?。?.. 我一點(diǎn)也不懂,現(xiàn)在急用。所以請教各位,請說的淺顯點(diǎn),Z好是掃盲級介紹!?。? 多謝各位了??! 展開
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