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直播邀請(qǐng)| FluidFM:CRISPR基因編輯技術(shù)的新突破

Quantum Design中國(guó)子公司 2020-03-23 16:14:29 239  瀏覽

  • [主題]

        FluidFM:CRISPR基因編輯技術(shù)的新突破


    [直播時(shí)間]

        2020年3月26日,16:00 - 17:00


    [報(bào)告簡(jiǎn)介]

        提高轉(zhuǎn)染物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞核的效率目前仍然是基因編輯中的一大挑戰(zhàn)。FluidFM 技術(shù)能夠?qū)⑥D(zhuǎn)染物質(zhì)直接注射到細(xì)胞核中,從根本上解決這一難題。這一技術(shù)對(duì)于極難轉(zhuǎn)染或原代的細(xì)胞系的基因編輯有著十分重要的意義。

        本次研討會(huì)是關(guān)于“提高CRISPR基因編輯效率的全新方法”的網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)。向您展示如何通過(guò)直接向細(xì)胞核中導(dǎo)入轉(zhuǎn)染物質(zhì),從而解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低下的問(wèn)題。


    特別提示:本次研討會(huì)還包括在線的實(shí)驗(yàn)演示!


    [產(chǎn)品簡(jiǎn)介]

        瑞士Cytosurge公司多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)—FluidFM BOT,是將原子力系統(tǒng)、微流控系統(tǒng)、細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)為一體的單細(xì)胞操作系統(tǒng)。主要功能包括單細(xì)胞注射、單細(xì)胞提取以及單細(xì)胞分離。

        FluidFM BOT打開(kāi)了傳統(tǒng)單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)手段無(wú)法觸及領(lǐng)域的大門。突破了單細(xì)胞研究、藥物開(kāi)發(fā)、細(xì)胞系開(kāi)發(fā)中的障礙,讓細(xì)胞膜不再成為阻礙單細(xì)胞研究的壁壘。

        多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)FluidFM BOT濃縮了FluidFM科技的全部精華,尤其是在自動(dòng)化程度和操作速度上的提高。它不僅保留了產(chǎn)品在生物學(xué)上的能力。更能夠?qū)⑦@些功能進(jìn)行組合來(lái)創(chuàng)造更加GX、便捷全新試驗(yàn)方法。


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    上海市靜安區(qū)威海路511號(hào)上海國(guó)際集團(tuán)大廈1405室,200041

    廣州市天河區(qū)珠江新城華強(qiáng)路2號(hào)富力盈豐大廈1216室 510623

    [主辦方]




參與評(píng)論

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熱門問(wèn)答

直播邀請(qǐng)| FluidFM:CRISPR基因編輯技術(shù)的新突破


[主題]

    FluidFM:CRISPR基因編輯技術(shù)的新突破


[直播時(shí)間]

    2020年3月26日,16:00 - 17:00


[報(bào)告簡(jiǎn)介]

    提高轉(zhuǎn)染物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞核的效率目前仍然是基因編輯中的一大挑戰(zhàn)。FluidFM 技術(shù)能夠?qū)⑥D(zhuǎn)染物質(zhì)直接注射到細(xì)胞核中,從根本上解決這一難題。這一技術(shù)對(duì)于極難轉(zhuǎn)染或原代的細(xì)胞系的基因編輯有著十分重要的意義。

    本次研討會(huì)是關(guān)于“提高CRISPR基因編輯效率的全新方法”的網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)。向您展示如何通過(guò)直接向細(xì)胞核中導(dǎo)入轉(zhuǎn)染物質(zhì),從而解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低下的問(wèn)題。


特別提示:本次研討會(huì)還包括在線的實(shí)驗(yàn)演示!


[產(chǎn)品簡(jiǎn)介]

    瑞士Cytosurge公司多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)—FluidFM BOT,是將原子力系統(tǒng)、微流控系統(tǒng)、細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)為一體的單細(xì)胞操作系統(tǒng)。主要功能包括單細(xì)胞注射、單細(xì)胞提取以及單細(xì)胞分離。

    FluidFM BOT打開(kāi)了傳統(tǒng)單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)手段無(wú)法觸及領(lǐng)域的大門。突破了單細(xì)胞研究、藥物開(kāi)發(fā)、細(xì)胞系開(kāi)發(fā)中的障礙,讓細(xì)胞膜不再成為阻礙單細(xì)胞研究的壁壘。

    多功能單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)FluidFM BOT濃縮了FluidFM科技的全部精華,尤其是在自動(dòng)化程度和操作速度上的提高。它不僅保留了產(chǎn)品在生物學(xué)上的能力。更能夠?qū)⑦@些功能進(jìn)行組合來(lái)創(chuàng)造更加GX、便捷全新試驗(yàn)方法。


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[主辦方]




2020-03-23 16:14:29 239 0
【網(wǎng)絡(luò)在線課堂】數(shù)字PCR與CRISPR基因編輯強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合!

1119日北京時(shí)間23:00巴黎時(shí)間:17:00),歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究員Moritz Kueblbeck將于Genomeweb平臺(tái)在線分享“CRISPR編輯的細(xì)胞系中使用數(shù)字PCR進(jìn)行標(biāo)記拷貝數(shù)評(píng)估”相關(guān)知識(shí)


本網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)將介紹如何使用dPCR快速定量CRISPR編輯的HeLa細(xì)胞中的綠色熒光蛋白拷貝數(shù)。討論還將介紹dPCR的工作原理和采集后的數(shù)據(jù)分析方法。


Moritz Kueblbeck在德國(guó)海德堡的癌癥研究ZX(DKFZ)做了八年的研究員。2014,他加入了Jan Ellenberg在海德堡的歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,在不同實(shí)驗(yàn)室的項(xiàng)目中,他使用CRISPR/Cas9方法利用內(nèi)源性的標(biāo)記蛋白(HeLaU-2 OS細(xì)胞進(jìn)行不同標(biāo)簽的純合敲入)進(jìn)行人類細(xì)胞系基因組編輯。

內(nèi)容簡(jiǎn)介

 

l  熒光蛋白或自標(biāo)記是使用熒光顯微鏡研究活細(xì)胞中蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的寶貴工具。然而,定量成像需要目標(biāo)蛋白(POI)的生理表達(dá)水平,特別是當(dāng)需要研究POI的化學(xué)計(jì)量相互作用時(shí)。

l  CRISPR使研究人員能夠標(biāo)記幾乎任何感興趣的目標(biāo)基因,使其可以研究相應(yīng)POI的生理表達(dá)水平。然而,正確編輯細(xì)胞克隆的產(chǎn)生和選擇——即標(biāo)記等位基因的預(yù)期數(shù)量和缺乏額外的整合——需要對(duì)標(biāo)記的拷貝數(shù)進(jìn)行定量評(píng)估。

l  探討dPCR是一種快速、可靠的熒光標(biāo)記CRISPR編輯細(xì)胞定量檢測(cè)方法。

注冊(cè)地址:https://event.on24.com/eventRegistration/EventLobbyServlet?target=reg20.jsp&partnerref=stilla&eventid=2111188&sessionid=1&key=2206BD6DA2548F0F9C46911E3A71DD

2019-11-13 15:35:16 440 0
2020年FluidFM技術(shù)線上技術(shù)研討會(huì)

Digital FluidFM User Conference 2020

    單細(xì)胞層次上的多組學(xué)研究方興未艾,單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)、單細(xì)胞基因組學(xué)、單細(xì)胞代謝組學(xué)等技術(shù)手段頻出,讓研究人員得以揭示同一組織不同細(xì)胞之間的基因與蛋白質(zhì)表達(dá)差異。而傳統(tǒng)細(xì)胞組學(xué)提取過(guò)程需要物理、化學(xué)或生物手段對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破膜處理,易產(chǎn)生裂解碎片;傳統(tǒng)的單細(xì)胞內(nèi)容物提取使用玻璃微管注射法,操作復(fù)雜、玻璃微光注射針制備困難,且提取的樣本量往往只有幾個(gè)pL,樣本處理十分困難。

    FluidFM BOT是瑞士科技公司Cytosurge開(kāi)發(fā)的單細(xì)胞顯微操作平臺(tái),它獨(dú)有的微型納米注射器以及液體微流控技術(shù)使得FluidFM BOT可以輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)單細(xì)胞內(nèi)容物的自動(dòng)化無(wú)損提取,操作方便,樣本品質(zhì)高。同時(shí)FluidFM BOT單細(xì)胞顯微操作系統(tǒng)還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行注射、分離,單細(xì)胞粘附力測(cè)定、3D打印等諸多功能。為了更好地了解這一技術(shù),全世界各地使用FluidFM 技術(shù)的科研工作者們將于2020年9月16日15:30—18:00(北京時(shí)間)匯聚一堂,一起討論并分享FluidFM 技術(shù)的使用經(jīng)驗(yàn),交流近期科研成果。我們誠(chéng)摯的邀請(qǐng)您蒞臨參加FluidFM BOT的用戶研討會(huì)。

會(huì)議日程:

15:30Welcome note
Pablo Doerig, Cytosurge
15:35New Chemistry Enabled by Combined Atomic Force Microscopy and Microfluidic Delivery
Gang-Yu Liu, UC Davis, USA
15:55Biomimetic membrane patterning with FluidFM
Eider Berganza, Autonomous University of Madrid, Spain
16:15Spotting of viral structures by FluidFM
Diana Remmel
16:30

FluidFM as a Tool to Study Adhesion Forces of Bacteria - Optimization of Parameters

 and Comparison to Conventional Bacterial Probe Scanning Force Spectroscopy

Christine Müller-Renno, TU Kaiserslautern, Germany
16:50Probing single-cell mechanosensitivity with cylindrical FluidFM probes
Ines Lüchtefeld, University of Zurich, Switzerland
17:10

Investigating the adhesion capacity of single Candida albicans yeast cells on bovine 

tooth enamel

Gubesh Gunaratnam, University of Saarland, Germany
17:25

Single cell organelle extraction and transplantation shows force induced mitochondrial fission

Christoph Georg Erich G?belein

17:45Live Cell Transcriptome Profiling
Orane Guillaume-Gentil, ETH, Switzerland
17:55Closing note
Pablo Doerig, Cytosurge

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2020-09-14 11:12:31 303 0
【深藍(lán)云直播課堂】Naica數(shù)字PCR技術(shù)用于基因編輯和多重突變檢測(cè)

基因編輯技術(shù)指能夠讓人類對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行“編輯”,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定DNA片段的敲除、加入等。而CRISPR/Cas9技術(shù)自問(wèn)世以來(lái),就有著其它基因編輯技術(shù)無(wú)可比擬的優(yōu)勢(shì),技術(shù)不斷改進(jìn)后,更被認(rèn)為能夠在活細(xì)胞中最有效、最便捷地“編輯”任何基因。



但是在CRISPR基因編輯之后,工作并沒(méi)有結(jié)束,你需要驗(yàn)證感興趣的基因是否成功突變。想知道如何利用高靈敏度、高jingzhun度的數(shù)字PCR技術(shù)來(lái)檢測(cè)基因編輯嗎?快來(lái)參加本次深藍(lán)云直播課堂吧!



2020-08-17 12:22:13 462 0
Alpha助力Alzheimer新突破

阿爾茲海默氏?。ˋlzheimer disease,AD)是一種進(jìn)行性疾病,涉及大腦神經(jīng)元退化,并導(dǎo)致各種癥狀,Z顯著的是記憶力喪失??茖W(xué)家們多年來(lái)一直致力于在此疾病的發(fā)病機(jī)制、診斷、ZL等方面開(kāi)展研究,力求解決這個(gè)威脅人類健康安全的世紀(jì)難題。


β-粥樣淀粉一直被科學(xué)家認(rèn)為是Alzheimer's disease (AD)疾病的起因。而γ分泌酶作為一種膜蛋白酶,可以直接或間接的產(chǎn)生各種amyloid peptide (Aβ) ,所以以γ分泌酶為靶點(diǎn)的機(jī)制和應(yīng)用研究也Z多。Presenilin早老素,作為γ-secretase四個(gè)亞基之一的催化亞基,負(fù)責(zé)β-amyloid (Aβ)肽的產(chǎn)生,超過(guò)200 Alzheimer’s 疾病相關(guān)的突變?cè)趐resenilin 1 (PS1) and PS2中被確認(rèn)。但有趣且有爭(zhēng)議的是,這些相關(guān)的AD疾病突變?cè)讦?secretase其他三個(gè)亞基中并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)。這預(yù)示著早老素有別于γ-secretase的其他功能。為證實(shí)這一假設(shè),找到與PS結(jié)合蛋白是非常重要的一步。

Alzheimer 新突破

近來(lái),清華大學(xué)施一公團(tuán)隊(duì)在阿爾茲海默病發(fā)病機(jī)制上又有了新突破:首次發(fā)現(xiàn)可與Presenilin相互作用并具有水解功能的蛋白Bax-inhibitor 1 (BI1)。

研究發(fā)現(xiàn),Bax-inhibitor 1 (BI1),是一個(gè)進(jìn)化保守的跨膜蛋白,可以穩(wěn)定與PS1結(jié)合,但不與具完整亞基結(jié)構(gòu)的γ-secretase結(jié)合。加入底物APP-C99,通過(guò)AlphaLISA檢測(cè)Aβ40和Aβ42的產(chǎn)生情況,來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證BI1的細(xì)胞功能。發(fā)現(xiàn)PS1–BI1復(fù)合物不具備水解酶活性。在等摩爾濃度下,BI1對(duì)γ-secretase的蛋白水解活性沒(méi)有影響,但在將BI1提高200倍摩爾的條件下,γ-secretase蛋白水解活性減少了一半。

 

AlphaLISA方法檢測(cè)PS1–BI1復(fù)合物對(duì)APP-C99的水解活性

這直接預(yù)示了PS1除了參與γ-secretase外,可能還具有其他的細(xì)胞功能。BI1是一種被認(rèn)為在細(xì)胞凋亡和鈣通道調(diào)控中起作用的蛋白,此研究結(jié)果直接將PS1與BI1聯(lián)系起來(lái),這一發(fā)現(xiàn)為研究PS1的功能和AD的發(fā)生提供了更多的可能性。

檢測(cè)理想之選AlphaLISA

AlphaLISA勻相檢測(cè)體系的突出特點(diǎn)是高通量、高信噪比、均相免洗、抗干擾能力強(qiáng),操作簡(jiǎn)單。在體外、細(xì)胞、組織等水平的檢測(cè)中,都顯示出傳統(tǒng)檢測(cè)方法無(wú)法媲美的zhuo越性能。

 

ALPHA的方法采用單體氧作為能量擴(kuò)散的載體,其擴(kuò)散距離可以達(dá)到200nm,發(fā)光原理為化學(xué)反應(yīng)發(fā)光,具有背景干凈、信噪比高的特點(diǎn),因此更適合于復(fù)雜樣品的檢測(cè),如組織液、血清、組織裂解液等,步驟少、方法簡(jiǎn)單、均相反應(yīng)、不需要洗滌,因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量更高。同時(shí)推薦選擇具有HTS ALPHA檢測(cè)模塊的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行抗體的篩選,可以大大縮短檢測(cè)時(shí)間。

使用ALPHA的方法進(jìn)行Aβ的檢測(cè)是理想之選,可以通過(guò)商品化的Aβ檢測(cè)劑盒檢測(cè)Aβ的量:

 

Amyloid β 1-15

Amyloid β 1-40 (human)

Amyloid ? 1-40 (mouse/rat)

Amyloid β 1-42 (human)

Amyloid β 1-42 (mouse/rat)

Amyloid β 1-x

Amyloid β oligomers

Total or oligomerized Aβ 42 (Two in one)

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參考文獻(xiàn)

1. Wu S, Song W, Wong CCL,et al.,(2019).Bax inhibitor 1 is a γ-secretase–independent presenilin-binding protein. Proc Natl Acad Sci U S A. Jan 2;116(1):141-147.

2. Stéphanie Chasseigneaux,et al.,(2012). Functions of Aβ, sAPPα and sAPPβ : similarities and differences. J. Neurochem. 120 (Suppl. 1), 99–108.

3. Ting-Hai Xu, Yan Yan, Yanyong Kang, et al., (2016). Alzheimer’s disease-associated mutations increase amyloid precursor protein resistance to γ-secretase cleavage and the Aβ42/Aβ40 ratio. Cell Discovery. 2, 16026.

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2019-08-22 13:10:58 321 0
科學(xué)家開(kāi)發(fā)重量級(jí)基因編輯工具

一篇在線發(fā)表于《細(xì)胞》雜志的論文介紹了一項(xiàng)重要突破:來(lái)自韓國(guó)的研究團(tuán)隊(duì)***在線粒體DNA中實(shí)現(xiàn)A堿基到G堿基的轉(zhuǎn)換,為基因編輯技術(shù)填補(bǔ)上一塊***關(guān)重要的拼圖,也帶來(lái)了治愈多種線粒體遺傳病的希望。

從上世紀(jì)60年代***發(fā)現(xiàn)***性內(nèi)切酶,到1985年發(fā)明PCR技術(shù),再到***近十年CRISPR技術(shù)誕生、用于活體生物的基因編輯,短短半個(gè)世紀(jì),人類在一次又一次的突破中實(shí)現(xiàn)了操縱DNA能力的巨大飛躍。其中,CRISPR的出現(xiàn)更是讓科學(xué)家能高效編輯基因組中的致病突變,為眾多遺傳病提供全新的方案。

不過(guò),還有一朵烏云長(zhǎng)期籠罩在基因編輯領(lǐng)域的上空,這就是線粒體DNA的編輯。

作為參與能量代謝的重要細(xì)胞器,線粒體中也含有少量來(lái)自母系的DNA。如果這部分基因發(fā)生突變,則可能導(dǎo)致多種與代謝相關(guān)的遺傳疾病。

例如,Leber遺傳性視神經(jīng)病變(LHON)可能導(dǎo)致患者失明,這種兇險(xiǎn)的疾病就是由線粒體DNA的點(diǎn)突變導(dǎo)致的。線粒體DNA突變還可能導(dǎo)致某些線粒體腦肌病,患者的大腦遭受損傷,可能出現(xiàn)癲癇、精神行為異常等癥狀。平均每5000個(gè)人里,就有一個(gè)人患上線粒體點(diǎn)突變導(dǎo)致的遺傳病。

盡管基因編輯工具***近十年迎來(lái)爆發(fā)式發(fā)展,但面對(duì)線粒體遺傳病時(shí),這些工具卻總是難以奏效。例如,當(dāng)下***為盛行的CRISPR-Cas系統(tǒng)就因?yàn)橄驅(qū)NA不能穿越線粒體膜,因而無(wú)法用于線粒體疾病。

線粒體DNA的編輯,可以說(shuō)是基因編輯領(lǐng)域***后一塊未經(jīng)涉足的土地,而這個(gè)難題也成為治愈多種遺傳疾病必須跨越的障礙。

2020年,一項(xiàng)***性的突破到來(lái)。Broad研究所的劉如謙教授團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一款名為DdCBE的基因編輯工具,可以直接修改雙鏈DNA上的堿基,實(shí)現(xiàn)從C堿基到T堿基的轉(zhuǎn)換,這也是科學(xué)家***在人體細(xì)胞中進(jìn)行線粒體DNA的編輯。

不過(guò),作為線粒體DNA編輯的開(kāi)拓性成果,DaCBE也有不足之處:其只能高效地進(jìn)行TC-TT序列的轉(zhuǎn)換,在90個(gè)已知的致病線粒體突變位點(diǎn)中,只有9個(gè)能得到修復(fù)。

而在這90個(gè)突變位點(diǎn)中,有多達(dá)39個(gè)都可以通過(guò)A-G堿基的轉(zhuǎn)換來(lái)修復(fù)。如果能找到實(shí)現(xiàn)A-G轉(zhuǎn)換的手段,那么包括上述兩種疾病在內(nèi),多種線粒體遺傳病都有望迎來(lái)治愈的方法。

在這項(xiàng)發(fā)表于《細(xì)胞》的***新研究中,來(lái)自韓國(guó)基礎(chǔ)科學(xué)研究所基因編輯中心的研究團(tuán)隊(duì)終于完成了這項(xiàng)“不可能的任務(wù)”,他們開(kāi)發(fā)出一款全新的基因編輯平臺(tái),命名為轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物相關(guān)脫氫酶(transcription activator-like effector-linked deaminases,簡(jiǎn)稱TALED)。

▲TALED編輯線粒體DNA的示意圖

論文***作者CHO Sung-Ik表示:“我們?cè)O(shè)計(jì)的新型堿基編輯器極大地拓展了線粒體DNA編輯的范圍,這不僅有助于構(gòu)建疾病模型,還將幫助人們開(kāi)發(fā)新療法?!?/p>

TALED到底是什么?接下來(lái)我們將看到,TALED由3個(gè)功能各異的主要部分組成,它們環(huán)環(huán)相扣、共同協(xié)作,***終完成這項(xiàng)基因編輯任務(wù)。

***個(gè)部分,可以看作TALED的向?qū)АG懊嬲f(shuō)到,常見(jiàn)的基因編輯系統(tǒng)無(wú)法進(jìn)入線粒體。為了解決這個(gè)問(wèn)題,TALED與劉如謙團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)的DaCBE一樣,使用了轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物(TALE)。作為一種DNA結(jié)合蛋白,TALE蛋白能夠靶向特異的DNA序列,其在線粒體靶向序列(MTS)的引導(dǎo)下進(jìn)入線粒體,并且與特定的線粒體DNA序列結(jié)合。

到這里,TALED就被帶到了工作場(chǎng)所。在這里,輪到TALED的第二個(gè)部分登場(chǎng)。研究團(tuán)隊(duì)需要找到合適的脫氫酶,在這里實(shí)現(xiàn)A-G堿基的轉(zhuǎn)換。為此,他們選擇是名為TadA8e的腺嘌呤脫氫酶,其由大腸桿菌的腺嘌呤脫氫酶改造而來(lái)。

這個(gè)選擇頗具創(chuàng)意,因?yàn)門adA8e被認(rèn)為是一種專門對(duì)單鏈DNA起作用的蛋白,但在這里,它需要在線粒體的雙鏈DNA中進(jìn)行堿基編輯。

這篇論文的通訊作者,基因編輯中心主任KIM Jin-Soo教授說(shuō):“沒(méi)有人想過(guò)用TadA8e在線粒體中進(jìn)行堿基編輯,因?yàn)樗徽J(rèn)為只對(duì)單鏈DNA起作用。正是這個(gè)跳出傳統(tǒng)框架的想法,幫助我們發(fā)明了TALED。”

而幫助TadA8e做到這一點(diǎn)的,是TALED的***后一個(gè)主要部分:胞嘧啶脫氫酶DddAtox。DddAtox使得雙鏈DNA可以短暫地解開(kāi),而TadA8e正是抓住了這個(gè)轉(zhuǎn)瞬即逝的時(shí)間窗口,在人類細(xì)胞的線粒體中高效催化A-G堿基的轉(zhuǎn)換,編輯頻率可高達(dá)49%。

▲TALED實(shí)現(xiàn)了A-G堿基的轉(zhuǎn)換

通過(guò)對(duì)TALED的調(diào)整,研究團(tuán)隊(duì)分別開(kāi)發(fā)出能同時(shí)實(shí)現(xiàn)A-G以及C-T堿基轉(zhuǎn)換的技術(shù),以及僅進(jìn)行A-G轉(zhuǎn)換的技術(shù)。

當(dāng)然,作為一項(xiàng)開(kāi)創(chuàng)性的技術(shù),TALED仍有不***之處,例如在進(jìn)行堿基編輯時(shí),可能會(huì)造成與目標(biāo)位點(diǎn)相鄰的核苷酸也發(fā)生轉(zhuǎn)換;此外,TALED是否會(huì)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中產(chǎn)生脫靶效應(yīng)也有待觀察。

但毫無(wú)疑問(wèn),TALED技術(shù)的出現(xiàn)讓我們又多了一種***潛力的基因編輯工具,展望這項(xiàng)技術(shù)的未來(lái)應(yīng)用場(chǎng)景,研究團(tuán)隊(duì)希望能提升TALED的編輯效率與特異性,***終能夠分別在胚胎、新生兒與成年患者體內(nèi)修正致病的線粒體突變。我們期待,那些受困于線粒體遺傳病的人們終將迎來(lái)治愈的一刻。

RNA提取磁珠屬于納米生物磁珠的一種,主要作用是用于核酸提取過(guò)程中的RNA提取,粒徑分布在500nm左右,是洛陽(yáng)吉恩特生物自主研發(fā)生產(chǎn)的高分子納米磁性微球,該磁珠懸浮時(shí)間長(zhǎng),磁響應(yīng)時(shí)間迅速,對(duì)DNA甲基化過(guò)程中的提取環(huán)節(jié)提供良好的支持,可明顯縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率,并在提取結(jié)果上保持穩(wěn)定,配合核酸提取儀,更能實(shí)現(xiàn)快速的RNA提取。


2022-05-19 09:29:54 635 0
除了石墨烯超級(jí)電容之外,目前儲(chǔ)能技術(shù)有沒(méi)有新的突破?
Z好直接使用的儲(chǔ)能模式就是電儲(chǔ)能,超級(jí)電容就是很好的例子,不過(guò)總覺(jué)得電容是不是還可以有別的原理,那種死搬教條的回答就不必了,電容原理大家都曉得,就是要有新的構(gòu)思,比如等離子體,蛋白質(zhì),或者某種絕緣與不絕緣可以隨意轉(zhuǎn)換的材料等等。
2013-02-25 11:50:13 448 2
戰(zhàn)“疫”直播 | 高通量測(cè)序技術(shù)助力新冠病毒解析

2020-03-31 17:51:02 314 0
數(shù)字PCR網(wǎng)絡(luò)研討會(huì):在CRISPR編輯的細(xì)胞系中使用數(shù)字PCR進(jìn)行標(biāo)記拷貝數(shù)評(píng)估

【數(shù)字PCR網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)】

CRISPR編輯的細(xì)胞系中

使用數(shù)字PCR進(jìn)行標(biāo)記拷貝數(shù)評(píng)估

       1119日北京時(shí)間23:00巴黎時(shí)間:17:00),歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室研究員Moritz Kueblbeck將于Genomeweb平臺(tái)在線分享“CRISPR編輯的細(xì)胞系中使用數(shù)字PCR進(jìn)行標(biāo)記拷貝數(shù)評(píng)估”相關(guān)知識(shí)。

本網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)將介紹如何使用dPCR快速定量CRISPR編輯的HeLa細(xì)胞中的綠色熒光蛋白拷貝數(shù)。討論還將介紹dPCR的工作原理和采集后的數(shù)據(jù)分析方法。

Moritz Kueblbeck在德國(guó)海德堡的癌癥研究ZX(DKFZ)做了八年的研究技術(shù)員。2014,他加入了Jan Ellenberg在海德堡的歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,在不同實(shí)驗(yàn)室的項(xiàng)目中,他使用CRISPR/Cas9方法利用內(nèi)源性的標(biāo)記蛋白(HeLaU-2 OS細(xì)胞進(jìn)行不同標(biāo)簽的純合敲入)進(jìn)行人類細(xì)胞系基因組編輯。

內(nèi)容簡(jiǎn)介

l  熒光蛋白或自標(biāo)記是使用熒光顯微鏡研究活細(xì)胞中蛋白質(zhì)動(dòng)力學(xué)的寶貴工具。然而,定量成像需要目標(biāo)蛋白(POI)的生理表達(dá)水平,特別是當(dāng)需要研究POI的化學(xué)計(jì)量相互作用時(shí)。

l  CRISPR使研究人員能夠標(biāo)記幾乎任何感興趣的目標(biāo)基因,使其可以研究相應(yīng)POI的生理表達(dá)水平。然而,正確編輯細(xì)胞克隆的產(chǎn)生和選擇——即標(biāo)記等位基因的預(yù)期數(shù)量和缺乏額外的整合——需要對(duì)標(biāo)記的拷貝數(shù)進(jìn)行定量評(píng)估。

l  探討dPCR是一種快速、可靠的熒光標(biāo)記CRISPR編輯細(xì)胞定量檢測(cè)方法。

 

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2019-10-24 15:58:10 485 0
測(cè)磁學(xué)領(lǐng)域新突破 量子鉆石原子力顯微鏡拓寬測(cè)磁新邊界

      從Z早的指南針到霍爾片,磁場(chǎng)測(cè)量一直在生活、科研、工業(yè)應(yīng)用等領(lǐng)域起著至關(guān)重要的作用。


精密磁場(chǎng)成像


       人們?yōu)榱诉_(dá)到更高的靈敏度,超導(dǎo)量子干涉儀芯片SQUID、原子蒸氣單元、核磁共振磁等物理學(xué)效應(yīng)相繼被用到磁場(chǎng)探測(cè)中來(lái)。盡管如此,測(cè)磁學(xué)仍然面臨巨大的挑戰(zhàn)。


地球磁場(chǎng)無(wú)處不在


       如今,人們迫切需要一種能夠進(jìn)行高空間分辨率、高靈敏度并且能夠?qū)悠繁砻嬉韵绿綔y(cè)和成像的探頭,來(lái)研究單個(gè)細(xì)胞、蛋白質(zhì)、DNA或進(jìn)行單分子識(shí)別、單原子核磁共振等。


       在保證高靈敏度的前提下,傳統(tǒng)的測(cè)磁芯片很難獲得高的空間分辨率,或者縮短與微觀樣品的距離。而對(duì)于一些可以達(dá)到高分辨率的系統(tǒng),其工作條件都要求超低溫和高真空,難以對(duì)活體細(xì)胞、病毒等進(jìn)行成像。可以在室溫大氣下成像的原子力顯微鏡、掃描隧道顯微鏡等能夠?qū)悠繁砻嫘蚊策M(jìn)行成像,但無(wú)法進(jìn)行表面磁場(chǎng)的成像。


基于NV色心的量子精密測(cè)量


金剛石中氮-空位(NV)色心原子結(jié)構(gòu)和室溫下的能級(jí)結(jié)構(gòu)


      金剛石(鉆石)氮-空位(NV)色心是指金剛石中的一種特殊的發(fā)光點(diǎn)缺陷,由一個(gè)替代的氮原子與其緊鄰的一個(gè)碳原子空位組成,是眾多順磁性雜質(zhì)中的一種。


      空位吸引了一個(gè)電子,加上氮原子的一個(gè)未成鍵電子,組成了一個(gè)軌道基態(tài)自旋為1的體系,電子基態(tài)為自旋三重態(tài),室溫下相干時(shí)間可以長(zhǎng)達(dá)1.8ms,可以被定位至小于10nm的精度,電子自旋對(duì)外界磁場(chǎng)非常靈敏,NV色心與其他待測(cè)樣品之間距離可以小于5nm。


      基于以上優(yōu)點(diǎn),NV色心可以作為一種非常強(qiáng)大的單量子傳感器,該傳感器不僅性能穩(wěn)定,并且可在樣品表面納米級(jí)精度掃描成像的同時(shí)可保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的高度穩(wěn)定。


QDAFM譜儀


       為了填補(bǔ)高精度、高分辨率磁場(chǎng)成像科研儀器的空缺,國(guó)儀量子推出了一款量子鉆石原子力顯微鏡(Quantum Diamond Atomic Force Microscope,簡(jiǎn)稱QDAFM)。


量子鉆石原子力顯微鏡


      QDAFM譜儀是一臺(tái)基于NV色心和AFM掃描成像技術(shù)的量子精密測(cè)量?jī)x器。


      QDAFM譜儀通過(guò)NV色心的自旋進(jìn)行量子操控與讀出,可實(shí)現(xiàn)磁學(xué)性質(zhì)的定量無(wú)損成像。QDAFM具有納米級(jí)的高空間分辨以及單個(gè)自旋的超高探測(cè)靈敏度,是發(fā)展和研究高密度磁存儲(chǔ)、自旋電子學(xué)、量子技術(shù)應(yīng)用等的新技術(shù)。


產(chǎn)品特點(diǎn)


QDAFM產(chǎn)品特點(diǎn)


QDAFM譜儀在量子科學(xué),化學(xué)與材料科學(xué),以及生物和YL等研究領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。

微納磁成像

      對(duì)于磁性材料,確定其靜態(tài)自旋分布是凝聚態(tài)物理中的重要問(wèn)題,也是研究新型磁性器件的關(guān)鍵。


      QDAFM提供了一種新的測(cè)量途徑,能夠?qū)崿F(xiàn)高空間分辨率的磁性成像,具有非侵入性、可覆蓋寬溫區(qū)、大磁場(chǎng)測(cè)量范圍等獨(dú)到優(yōu)勢(shì)。



超導(dǎo)磁成像


      對(duì)超導(dǎo)體及其渦旋的微觀尺度研究,能夠?yàn)槔斫獬瑢?dǎo)機(jī)理提供重要信息。利用工作在低溫下的QDAFM,可以對(duì)超導(dǎo)體的磁渦旋進(jìn)行定量的成像研究,并擴(kuò)展到眾多低溫凝聚態(tài)體系的磁性測(cè)量。



細(xì)胞原位成像


      在細(xì)胞原位實(shí)現(xiàn)納米級(jí)分子成像是生物學(xué)研究的重要手段。在眾多成像技術(shù)中,磁共振成像技術(shù)能夠快速、無(wú)破壞地獲取樣品體內(nèi)的自旋分布圖像,已經(jīng)廣泛應(yīng)用在多個(gè)科學(xué)領(lǐng)域中。


      特別是在臨床醫(yī)學(xué)中,因其對(duì)生物體幾乎無(wú)損傷,對(duì)疾病的機(jī)理研究、診斷和ZL起著重要的作用。然而,傳統(tǒng)的磁共振成像技術(shù)使用磁感應(yīng)線圈作為傳感器,空間分辨率極限在微米以上,無(wú)法進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)分子尺度的成像。


      利用QDAFM的高空間分辨率特性,研究人員觀測(cè)到了細(xì)胞內(nèi)部存在于細(xì)胞器中的鐵蛋白,分辨率達(dá)到了10納米。



拓?fù)浯沤Y(jié)構(gòu)表征


      磁性斯格明子是具有拓?fù)浔Wo(hù)性質(zhì)的納米尺度渦旋磁結(jié)構(gòu)。磁性斯格明子展現(xiàn)出豐富新奇的物理學(xué)特性,為研究拓?fù)渥孕娮訉W(xué)提供了新的平臺(tái),在未來(lái)高密度、低能耗、非易失性計(jì)算和存儲(chǔ)器件中也具有潛在應(yīng)用。


      但是室溫下單個(gè)斯格明子的探測(cè)在實(shí)驗(yàn)上仍具有挑戰(zhàn)性。QDAFM的高靈敏度和高分辨率特點(diǎn),是解決這一難題的有力工具,通過(guò)雜散場(chǎng)測(cè)量可重構(gòu)出斯格明子的磁結(jié)構(gòu)。



部分圖片及信息來(lái)源于網(wǎng)絡(luò),參考文獻(xiàn)如下:

1:Tetienne, J. P.et al. Nature Communications6, 6733(2015).

2:Thiel, L. et al. Nature Nanotechnology 11,677-681(2016).

3:Wang, P. et al. Science advances 5, 8038 (2019).

4:Dovzhenko, Y. et al. Nature Communications 9, 2712 (2018).

2020-03-30 15:31:05 873 0

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