本生教您如何選擇ELISA試劑盒的正確步驟

　　ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應(yīng)用，然而實(shí)驗(yàn)新手們面對(duì)各種各樣、動(dòng)則上上千種的ELISA試劑盒，內(nèi)心應(yīng)該是崩潰的。

　　各種廠家、品牌，各種種屬，各種因子，琳瑯滿目，質(zhì)量良莠不齊，如何浪里淘金，選擇既符合研究需求，又品質(zhì)上乘的 ELISA 試劑盒呢?

　　本生技術(shù)小編教你幾招，一眼“相中”、最合適的那個(gè)ELISA試劑盒!

　　首先，你要明確研究種屬：

　　一般來說，廠家都會(huì)在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬，且為單詞，檢索種屬的常用語言為英文。

　　如果您需對(duì)不同物種的同一因子進(jìn)行定量，建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的 ELISA 試劑盒，產(chǎn)品介紹中會(huì)注明

　　其次，要明確樣本類型：

　　不同廠家驗(yàn)證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本，根據(jù)樣本處理方式的差異，分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿，因此購(gòu)買前需仔細(xì)核對(duì)。

　　第三步：要會(huì)預(yù)測(cè)自己的目標(biāo)因子的濃度

　　一般來說，待測(cè)因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測(cè)范圍，且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6，正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL，病人會(huì)顯著，CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。

　　因而，必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒極其重要。

　　若濃度太低，可選擇高敏試劑盒;若不確定待測(cè)濃度或樣本間濃度差異較大，建議使用檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。

　　如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒，各類型檢測(cè)范圍差異較大，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。

　　第四步：檢查試劑盒進(jìn)行過哪些質(zhì)控

　　質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說明書中即可找到，在購(gòu)買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn)，包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測(cè)試等，每個(gè)數(shù)據(jù)都看一下，確保的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。

　　第五步：確定需檢測(cè)的因子數(shù)量

　　如果待測(cè)因子超過 5 個(gè)，且樣本量較小時(shí)，單因子 ELISA 檢測(cè)方法并不是選擇。

　　建議考慮多因子檢測(cè)方法，如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個(gè)以內(nèi)，檢測(cè)指標(biāo)可達(dá)上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法 (檢測(cè)樣本多達(dá) 80 個(gè)，檢測(cè)指標(biāo)多達(dá) 50 個(gè))或微流控 ELISA 檢測(cè)系統(tǒng) Ella。

　　可節(jié)約樣本及時(shí)間成本，也可保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

　　第六步：預(yù)算評(píng)估

　　預(yù)算往往是大家優(yōu)先考慮的，實(shí)際上，不能夠一味講究產(chǎn)品價(jià)格，更需要考慮性價(jià)比。生物學(xué)是極其嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)，一致性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是基金、文章等評(píng)審過程中的因素，即使低廉的價(jià)格，不能夠重現(xiàn)結(jié)果，也是資源的另一種浪費(fèi)。

　　本生ELISA檢測(cè) 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來。

真空冷凍干燥機(jī)由于其能保持物料的原有成份和活性成份及物料形體不受損，適用于原料藥、脫水蔬菜、食品、水果、化工藥物中間體等物料的干燥。真空冷凍干燥機(jī)要如何保養(yǎng)？

1.開關(guān)機(jī)時(shí)的養(yǎng)護(hù)

　　打開真空冷凍干燥機(jī)械機(jī)箱右側(cè)的總電源開關(guān)，氣壓數(shù)顯為大氣壓110pk。按住控制面板上的總開關(guān)鍵三秒鐘以上，溫度數(shù)顯為冷阱的實(shí)際溫度。啟動(dòng)制冷機(jī)，預(yù)冷30分鐘以上。將樣品放入樣品架，蓋上有機(jī)玻璃罩，并啟動(dòng)真空泵。待氣壓數(shù)顯穩(wěn)定后，記錄溫度和氣壓數(shù)值。紀(jì)錄真空冷凍干燥機(jī)械停機(jī)前的溫度和氣壓數(shù)值。按住控制面板的充氣閥，并立即關(guān)閉真空泵。氣壓數(shù)顯為大氣壓時(shí)，打開有機(jī)玻璃罩，取出樣品。關(guān)閉制冷機(jī)，按住總開關(guān)鍵三秒以上，Z后關(guān)閉總電源開關(guān)。等冷阱中的冰完全化成水后，打開機(jī)箱左側(cè)的出水閥放水，并用干布清潔冷阱內(nèi)壁，蓋上大張濾紙防塵。

2.使用中的養(yǎng)護(hù)

　　制備樣品應(yīng)盡可能擴(kuò)大其表面積，其中不得含有酸堿物質(zhì)和揮發(fā)性有機(jī)溶劑。樣品必須完全凍結(jié)成冰，如有殘留液體會(huì)造成氣化噴射。注意冷阱約為零下65度，可以做低溫冰箱使用，但必須戴保溫手套操作防止凍傷。啟動(dòng)真空泵以前，檢查出水閥是否擰緊，充氣閥是否關(guān)閉，有機(jī)玻璃罩與橡膠圈的接觸面是否清潔無污物，良好密封。一般情況下，該機(jī)不得連續(xù)使用超過48小時(shí)。樣品在冷凍過程中，溫度逐漸降低，可以將樣品取出回暖一段時(shí)間后(仍處于冰凍狀態(tài))，繼續(xù)干燥，以縮短干燥時(shí)間。液晶顯示、中文界面，帶樣品干燥曲線。進(jìn)口壓縮機(jī)，另設(shè)有換熱器后，增大了制冷量，提高了捕水能力。冷阱開口大，無內(nèi)盤管，帶樣品預(yù)凍功能。預(yù)冷架，可作導(dǎo)流桶，加快干燥速度。冷阱和操作面為全不銹鋼，耐腐蝕易光潔，透明鐘罩。透明鐘罩式干燥室，安全直觀。不銹鋼樣品架，普通型樣品盤間距可調(diào)。設(shè)計(jì)新穎，體積小操作方便，減少實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面占用?？蛇x加有氮?dú)獬錃忾y。

（來源：四環(huán)福瑞科儀科技發(fā)展(北京)有限公司）

如何正確使用和保養(yǎng)直流高壓發(fā)生器？

一、直流高壓發(fā)生器保養(yǎng)的注意事項(xiàng)：  

1、防止異物進(jìn)入控制箱，如控制箱有風(fēng)扇時(shí)，應(yīng)經(jīng)常檢查風(fēng)扇是否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。  

2、經(jīng)常檢查各處防塵裝置，發(fā)現(xiàn)破損或連接松動(dòng)，應(yīng)及時(shí)處理，以防沙塵混入，損壞設(shè)備。  

3、當(dāng)倍壓筒絕緣筒臟污時(shí)請(qǐng)用干布擦凈，不可用酒精，汽油等有機(jī)類溶劑擦洗，可用洗滌劑清洗  

4、換保險(xiǎn)管時(shí)，請(qǐng)按保險(xiǎn)管座旁標(biāo)定的安培數(shù)更換保險(xiǎn)管。  

5、未經(jīng)允許，請(qǐng)勿開啟控制箱及倍壓筒，否則會(huì)影響產(chǎn)品的保修。  

6、儀器應(yīng)注意防震、防潮、防塵、防腐。  

7、定期校驗(yàn)電壓和電流表，確保儀器精度。  

二、直流高壓發(fā)生器試驗(yàn)的注意事項(xiàng)  

1、試驗(yàn)前檢查測(cè)試品、直流高壓發(fā)生器、倍壓筒、放電棒、接地線、試品聯(lián)接線是否接好，檢查接地線是否連接無誤。  

2、高壓輸出接線必須牢固，試驗(yàn)時(shí)防止高壓引線脫落，對(duì)地直接放電損壞儀器。  

3、高壓試驗(yàn)時(shí)周圍物體及人員必須保持足夠的安全距離  

3、在工作電源進(jìn)入試驗(yàn)器前加裝兩個(gè)明顯斷開點(diǎn)，更換被試品和接線時(shí)應(yīng)先將工作電源斷開點(diǎn)明顯斷開；  

4、在電纜耐壓試驗(yàn)過程中，升壓過程應(yīng)勻速緩慢，降壓過程也應(yīng)勻速緩慢，同時(shí)應(yīng)在高壓輸出端加上保護(hù)水阻。否則，反電壓易損壞儀器。  

5、對(duì)大容性被試品的放電應(yīng)經(jīng)100Ω/V放電電阻棒對(duì)被試品放電，放電時(shí)不能將放電棒立即接觸試品，應(yīng)先將放電棒逐漸接近試品，至一定距離空氣間隙開始游離放電有嘶嘶聲，當(dāng)無聲音時(shí)可用放電棒接地端放電，zui后直接接上地線放電；  

6、直流高壓發(fā)生器的直流高壓在200KV及以上時(shí)，盡管試驗(yàn)人員穿絕緣鞋且處在安全距離以外區(qū)域，但由于高壓直流離子空間電場(chǎng)分布的影響，會(huì)使幾個(gè)鄰近站立的體上帶有不同的直流電位，試驗(yàn)人員不要互相握手或用手接觸接地點(diǎn)等，否則會(huì)有輕微電擊現(xiàn)象，此現(xiàn)象在干燥地區(qū)和冬季較為明顯，但由于能量較小一般不會(huì)對(duì)人造成傷害；

摘要：本文使用上海光譜儀器有限公司生產(chǎn)的氫化物發(fā)生器SP HS-100和原子吸收分光光度計(jì)SP-3801，采用氫化發(fā)生原子吸收分析技術(shù)測(cè)定蔬菜中硒的含量，該方法的靈敏度為0.17ug/L，線性相關(guān)系數(shù)（0-40ug/L）大于0.999，RSD<3%（n=7），結(jié)果較滿意。

關(guān)鍵詞：氫化物原子吸收光譜法，氫化物發(fā)生器（SPHS100），蔬菜，硒

一.引言

硒是人體健康的必需元素，具有重要的生理功能，硒具有、抗氧化、增強(qiáng)人體免疫力和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成等功能。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)已經(jīng)證明，每日補(bǔ)充200微克硒對(duì)健康人是安全和有效的，但人體攝入過多的硒對(duì)健康也有很大的危害，硒Z高膳食攝入400微克/天。過量的硒可引起中毒，表現(xiàn)為頭發(fā)變干變脆、易脫落，指甲變脆、有白斑及縱紋、易脫落，皮膚損傷及神經(jīng)系統(tǒng)異常，嚴(yán)重者死亡。當(dāng)硒缺乏的時(shí)候，就很容易導(dǎo)致人體免疫能力下降，威脅人類健康，生命的四十多種疾病都與人體缺硒有關(guān)，如癌癥、心血管病、肝病、白內(nèi)障、胰臟疾病、糖尿病、生殖系統(tǒng)疾病等癥狀。氫化物原子吸收法測(cè)定硒方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，準(zhǔn)確性好，結(jié)果較滿意。

二.實(shí)驗(yàn)部分

儀器設(shè)備及試劑：

SP-3803火焰原子吸收分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司)
SP-HS100全自動(dòng)氫化物發(fā)生器 (上海光譜儀器有限公司)
KJ-100微波消解儀（上海屹堯科技）
TTL-10S超純水機(jī)（北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司）
BS-124-S電子天平（德國(guó)賽多利斯科學(xué)儀器公司）
硒元素空心陰極燈(河北寧強(qiáng))
奶油生菜（星星美蔬）
硝酸、鹽酸、雙氧水，優(yōu)級(jí)純（國(guó)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑有限公司）
硼氫化鉀，氫氧化鈉，分析純（國(guó)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑有限公司）

測(cè)試條件如下：

表1 原子吸收儀器的測(cè)試條件

表2 氫化物條件

溶液配制：

硒標(biāo)準(zhǔn)溶液500mg/L：用移液槍移取10mL 1000mg/L的硒標(biāo)準(zhǔn)溶液于燒杯中，然后加入10mL濃鹽酸混勻，將燒杯放置在電熱板上加熱，待微沸數(shù)分鐘后取下冷卻至室溫，此溶液為500mg/L。

硒中間液50mg/L：用移液槍取500mg/L溶液5mL，用20%HCl定容至50mL。

硒標(biāo)準(zhǔn)使用液1mg/L：用移液槍取2mL硒中間液（50mg/L），用20%HCl定容至100mL，待用。

硒標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制：用移液槍分別移取0、1.0、2.0、3.0、4.0mL的硒標(biāo)準(zhǔn)使用液，用20%HCl定容至100mL，此溶液為0， 10.0， 20.0， 30.0，40.0 ug/L。

1% KBH4：稱取1.5gNaOH和5.0g KBH4于燒杯中，加適量水溶解后轉(zhuǎn)移至500mL容量瓶中，加水定容至刻度，待用。

1%HCl：量取10mL鹽酸溶液至1000mL容量瓶中，加水定容至刻度，待用。

樣品制備與處理：

樣品用水洗凈，晾干，取可食部分，制成勻漿，儲(chǔ)于塑料瓶中。

微波消解：稱取0.8g已制備試樣于消化管中，加10mL硝酸、2mL過氧化氫，振搖混合均勻，于微波消解儀中消化，微波消化條件如下表所示，消解結(jié)束待冷卻后，將消化液轉(zhuǎn)移入錐形瓶中，加幾粒玻璃珠，在電熱板上加熱至近干。再加5mL鹽酸溶（6mol/L），繼續(xù)加熱至溶液變?yōu)榍辶翢o色并伴有白煙出現(xiàn)，冷卻，轉(zhuǎn)移，用20%鹽酸定容至20mL，混勻待測(cè)，同時(shí)做試劑空白實(shí)驗(yàn)。

表3 微波消解程序

三. 標(biāo)準(zhǔn)曲線

使用上海光譜有限公司研制的全自動(dòng)氫化物發(fā)生器，該儀器采用原子吸收分光光度計(jì)與氫化物聯(lián)用測(cè)定硒。硒的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

圖1 硒的標(biāo)準(zhǔn)曲線（0～40μg/L）

四. 測(cè)試結(jié)果（見表4）

表4 奶油生菜中硒含量的測(cè)試結(jié)果

五. 結(jié)論

1.使用上海光譜儀器有限公司研制的全自動(dòng)氫化物發(fā)生器進(jìn)行了初步的應(yīng)用研究，在該裝置上進(jìn)行了水質(zhì)砷的含量的測(cè)定，儀器使用正常，結(jié)果滿意。

2.此方法校正曲線相關(guān)性大于0.999，方法的檢出限為0.17ug/L，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3.0%。

3.該儀器溫度、氣體流量可調(diào)，軟件自動(dòng)化控制，操作方便、簡(jiǎn)單。

（來源：上海光譜儀器有限公司）