葉綠素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，畫濾液細(xì)線用的液體是什么
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和層析液是同一種東西嗎？這兩種液體具體作用分別是什么？
全部評(píng)論(5條)
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- 只是從世界路過 2013-02-06 00:00:00
- 應(yīng)該是酒精。
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- wubinzhang2003 2013-02-06 00:00:00
- 層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑，教材上給出了兩種層析液配方:一種是93號(hào)汽油，另外一種為20份石油醚， 2份丙酮， 1份苯混合而成。筆者經(jīng)研究提供下列4種配方供選用:a)四氯化碳加少許無水硫酸鈉;b)95%的酒精;c)9份95%酒精加1份苯;d)20份汽油， 2份丙酮， 2份石油醚， 1份苯。其中采用d)配方可獲得較好效果;在條件簡(jiǎn)陋狀況下，也可以考慮選用配方b，經(jīng)濟(jì)而且簡(jiǎn)便一些，果有一定折扣。提取液的改進(jìn)除丙酮外，也可用酒精替代，
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- 咹迪_sW黰噪襂8 2013-02-06 00:00:00
- 首先，兩者都是有機(jī)溶劑。 1、畫濾液細(xì)線的液體就是色素提取時(shí)用到的有機(jī)溶劑，過去用丙酮，因?yàn)閾]發(fā)物質(zhì)有毒，現(xiàn)在改用無水乙醇。原理是：色素是有機(jī)分子，可以溶解在有機(jī)溶劑中，從而將研磨后的色素提取出來，提取到的液體由于含有色素就叫色素濾過液。 2、層析液的成分主要是石油醚。主要用來分離色素。四種色素在層析液中溶解度不同，所以擴(kuò)散的速度不同。就如跑步速度不同所以會(huì)分出一、二、三名一樣，溶解度越大，在濾紙條上擴(kuò)散的速度越快，位于濾紙條上端。
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- 好好好好37 2013-02-06 00:00:00
- 葉綠素的乙醇溶液，當(dāng)然和層析液不同 無水乙醇用于提取葉綠素，層析液丙酮用于分離葉綠素，色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢，因而可用層析液將不同色素分離。四種色素的溶解度高低依次為胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a 、葉綠素b。
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- xiangyuewen123 2017-09-18 09:19:56
- 畫濾液細(xì)線用的液體：丙酮（作用：溶解葉綠體中的色素） 葉綠體中的色素都能夠溶解于有機(jī)溶劑丙酮中，所以，可以用丙酮提取葉綠體中的色素。 層析液（石油醚）：是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。（作用：溶解并分離色素） 根據(jù)葉綠體中的四種色素在石油醚中的溶解度不同來進(jìn)行分離，溶解度高的在濾紙上擴(kuò)散的快，溶解度低的擴(kuò)散得慢。溶解度Z高的是胡蘿卜素，它隨石油醚在濾紙上擴(kuò)散得Z快，葉黃素和葉綠素a的溶解度次之；葉綠素b的溶解度Z低，擴(kuò)散得Z慢。這樣，四種色素就在擴(kuò)散過程中分離開來。 附：實(shí)驗(yàn)教學(xué)方案—葉綠體中色素的提取和分離 實(shí)驗(yàn)原理 葉綠體中的色素都能夠溶解于有機(jī)溶劑丙酮中，所以，可以用丙酮提取葉綠體中的色素。 層析液（石油醚）是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。根據(jù)葉綠體中的四種色素在石油醚中的溶解度不同來進(jìn)行分離，溶解度高的在濾紙上擴(kuò)散的快，溶解度低的擴(kuò)散得慢。溶解度Z高的是胡蘿卜素，它隨石油醚在濾紙上擴(kuò)散得Z快，葉黃素和葉綠素a的溶解度次之；葉綠素b的溶解度Z低，擴(kuò)散得Z慢。這樣，四種色素就在擴(kuò)散過程中分離開來。 目的要求 1．學(xué)會(huì)提取和分離葉綠體中色素的方法和原理。 2．能分辨葉綠體中的四種色素。 材料用具 新鮮的綠色葉片（如菠菜葉片）。 干燥的定性濾紙，燒杯（ 100 mL），研缽，玻璃漏斗，吸管，剪刀，小試管，藥勺，量筒（10ml），天平，試管架 丙酮，層析液，二氧化硅，碳酸鈣。 方法步驟 1．提取綠色葉片中的色素 ?。?）取幾片綠色的葉片，去掉葉柄和主脈，用天平稱取5g葉片，剪碎，放入研缽中。 （2）向研缽中放入少許二氧化硅和碳酸鈣，進(jìn)行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮，倒入研缽中，迅速充分研磨。 （3）將研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中進(jìn)行過濾。將濾液收集到一個(gè)小試管中，及時(shí)用棉塞將試管目塞緊。 2．制備濾紙條 取一塊預(yù)先干燥處理過的定性濾紙，將濾紙剪成長(zhǎng) 10 cm、寬 1cm的濾紙條，在距濾紙條一端 1cm處用鉛筆畫一條細(xì)的橫線。 3．畫濾液細(xì)線、 用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆線均勻地畫出一條細(xì)而直的濾液細(xì)線。待濾液于后，再畫2~3次。 4．分離葉綠體中的色素 將3 mL層析液倒入燒杯中，將濾紙條（有濾液細(xì)線的一端朝下）略微料靠著燒杯的內(nèi)壁，輕輕地插入到層析液中，隨后用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒體；注意，不能讓濾紙上的濾液細(xì)線觸到層析液。 5．觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果 看到四種色素的顏色后，取出濾紙條，觀察濾紙條上的色素帶顏色、位置、寬窄，并且填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
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通常葉綠素研磨儀主要應(yīng)用在對(duì)水質(zhì)樣品的葉綠素a提取。那該研磨設(shè)備的是怎樣對(duì)葉綠體的色素提取分離的呢，其操作原理如何，對(duì)色素的分離提取又在于哪些呢？
葉綠素A研磨儀可在幾分鐘內(nèi)完成對(duì)藻類細(xì)胞等樣品的研磨和粉碎，應(yīng)用丙酮溶液提取葉綠素a，可確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)對(duì)于水質(zhì)中葉綠素a濃度的準(zhǔn)確測(cè)量不受影響。另外，該研磨設(shè)備三維一體的振蕩研磨方式，可使樣品的研磨變得更均勻、更細(xì)、重復(fù)性更好，且樣品間無交叉污染，是真正的高通量研磨振蕩系統(tǒng)。
葉綠體色素分離的關(guān)鍵在于：葉片要新鮮、濃綠，研磨要快速、充分；在濾液收集后，要及時(shí)的應(yīng)用棉塞塞住試管口，防止濾液的揮發(fā)。葉綠體中色素的提取關(guān)鍵在于：濾液的細(xì)線不僅要細(xì)、直，而且要含有多種色素的存在，且過濾紙上的濾液細(xì)線不能接觸到層析液；避免接觸，濾紙上葉綠體中的色素將會(huì)在層析液中被溶解，則表示此次實(shí)驗(yàn)失敗。
應(yīng)用丙酮提取葉綠體色素的濾液，在光源面前看到的是綠色。因?yàn)樯貫V液對(duì)著光源，眼睛可感知到色素液的透射光。背對(duì)光源時(shí)看到的是紅色，也稱之為熒光。
應(yīng)用葉綠素A研磨儀可適用于這些樣品的應(yīng)用分析。組織勻漿液的快速分解，核酸、RNA、DNA和蛋白質(zhì)的提取純化；樣品PCR聚合酶鏈反應(yīng)的快速制備；酵母、細(xì)菌細(xì)胞的裂解分解；提取yao用活性成分；在LC/MS/MS 測(cè)試食品殘留農(nóng)藥或有毒物質(zhì)樣品處理，對(duì)農(nóng)藥/ 殺蟲劑等物的分析。
- 葉綠素研磨儀對(duì)浮游植物樣品的葉綠素提取測(cè)定
葉綠素研磨儀適用于對(duì)水質(zhì)葉綠素a的測(cè)定分光光度法的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用，同時(shí)也是環(huán)境監(jiān)測(cè)站、水文水資源等對(duì)水質(zhì)監(jiān)測(cè)檢測(cè)的常備實(shí)驗(yàn)設(shè)備；主要是用于對(duì)浮游植物葉綠素a的檢測(cè)提取。
葉綠素a本身對(duì)環(huán)境無害，但它是估計(jì)浮游植物生物量的重要指標(biāo)，通過對(duì)其浮游植物葉綠素a含量的檢測(cè)，可掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力情況和富營(yíng)養(yǎng)化水平；因此在環(huán)境監(jiān)測(cè)中，葉綠素a的含量也是評(píng)價(jià)水體富營(yíng)養(yǎng)化的指標(biāo)之一。
葉綠素研磨儀可適用于對(duì)生物樣品的快速裂解組織勻漿，提取核酸RNA/DNA和蛋白質(zhì)，酵母/細(xì)胞的裂解，藥物活性成分APIs提取，食品殘留農(nóng)藥或有毒物質(zhì)樣品的處理，PCR(聚合酶鏈反應(yīng))快速研磨制備等等。
把樣品組織和磨球同時(shí)放入球磨罐中，利用研磨設(shè)備系統(tǒng)開啟的高頻擺動(dòng)作用，磨球可在高速運(yùn)轉(zhuǎn)中與樣品組織碰撞和摩擦，導(dǎo)致樣品組織被研磨、破碎、混合可在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的實(shí)驗(yàn)前處理操作。
常用來檢測(cè)測(cè)定葉綠素的方法便是分光光度法，應(yīng)用三色方程664nm、647nm、630nm、750nm的吸光計(jì)算葉綠素a.b.c葉綠素的含量；單色方程測(cè)定了脫鎂葉綠素A校正后的含量。
葉綠素研磨儀研磨設(shè)備的高通量處理，大大提高了實(shí)驗(yàn)的工作效率，不但可用于對(duì)細(xì)胞破碎、細(xì)胞破裂，還可用于提取植物樣品中核酸和蛋白質(zhì)分析成分的應(yīng)用。另外，對(duì)于熱敏感生物樣品的前處理還可選低溫配件進(jìn)行低溫研磨。為確保樣品研磨前處理的重現(xiàn)性、有效性和可比性，在對(duì)研磨設(shè)備進(jìn)行參數(shù)設(shè)置時(shí)，需保證同一樣品的研磨條件相同。
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