植物色素的提取能用Arnon方法嗎？
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Arnon方法的原理和具體步驟又是什么？要測(cè)定植物色素的含量用什么方法？具體步驟是什么？萬(wàn)分感謝阿?。?.. Arnon方法的原理和具體步驟又是什么？ 要測(cè)定植物色素的含量用什么方法？具體步驟是什么？ 萬(wàn)分感謝阿?。? 展開
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- 為你R淪落 2008-08-26 00:00:00
- 能
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- pabu11 2017-09-06 00:00:00
- Arnon是傳統(tǒng)的葉綠素測(cè)定方法，是將材料在80%丙酮溶液中研磨并經(jīng)過濾或離心除去殘?jiān)?，測(cè)定提取液的光密度值來計(jì)算葉綠素含量，所以是使用分光光度計(jì)測(cè)量光的吸收值繼而估算出色素的含量。二甲基亞砜(DMSO)直接浸提高等植物葉綠素，同樣是測(cè)定提取液的光密度值來計(jì)算葉綠素含量，但步驟較為簡(jiǎn)省，但是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制要求較嚴(yán)格。呵呵！以下是大體的步驟：葉綠素的分子結(jié)構(gòu)是由四個(gè)吡咯環(huán)組成的一個(gè)卟啉環(huán)，此外還有一個(gè)葉綠醇的側(cè)鍵，由于分子具有共軛結(jié)構(gòu)，因此可吸收光能。葉綠素是脂類化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、己烷等有機(jī)溶劑，用有機(jī)溶劑提取的葉綠素可在一定波長(zhǎng)下測(cè)定葉綠素溶液的消光值，利用Arnon公式計(jì)算葉綠素含量。 二、材料、儀器與試劑 1．材料：菠菜葉片 2．儀器：分光光度計(jì)、天平、具塞刻度試管（15ml）、研缽、漏斗、滴管、濾紙、試管架。 3．試劑：丙酮、CaCO3 三、操作步驟 樣品處理及測(cè)定：準(zhǔn)確稱取洗凈，擦干（去葉片中脈）的菠菜葉片1.00g，于研缽中加少許CaCO3 研磨成勻漿，用80%丙酮浸提，將上清液過濾（濾紙先用80%丙酮濕潤(rùn)），用滴管吸取80%丙酮分次把研缽中葉綠素浸提液和殘?jiān)磧簦缓笤儆帽鸬伟褳V紙上的葉綠素溶液洗凈，全部轉(zhuǎn)移到具塞刻度試管，定容到15ml，于652nm波長(zhǎng)處測(cè)定消光值，如需測(cè)定葉綠素a和b的含量，可于663nm 和645nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定其消光值，按分式（2）或（3）計(jì)算。 四、結(jié)果計(jì)算 OD652 A＝ ×稀釋倍數(shù)×100 （1） 34.5×W 式中：A：葉綠素含量（mg/100g）； W: 樣品重（g ） Ca——0.0127×OD663－0.00269×OD645（2） Cb——0.0229×OD645－0.00468×OD663（3） Ca，Cb——分別代表葉綠素a和葉綠素b的含量（mg/ml） 五、注意事項(xiàng) 葉綠素是一種極不穩(wěn)定的化合物，它能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解，脫去葉醇基，轉(zhuǎn)變?yōu)槿~綠酸。光照和高漫都會(huì)使葉綠素發(fā)生氧化和分解，因此在分離提取葉綠素的過程中，必須注意控制這些因素，盡可能在低溫和弱光下進(jìn)行，并注意縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間，以防止葉綠素的破壞。
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- 虎牙秦柯 2017-10-09 00:00:00
- 可以用。 Arnon是傳統(tǒng)的葉綠素測(cè)定方法，是將材料在80%丙酮溶液中研磨并經(jīng)過濾或離心除去殘?jiān)?，測(cè)定提取液的光密度值來計(jì)算葉綠素含量，所以是使用分光光度計(jì)測(cè)量光的吸收值繼而估算出色素的含量。二甲基亞砜(DMSO)直接浸提高等植物葉綠素，同樣是測(cè)定提取液的光密度值來計(jì)算葉綠素含量，但步驟較為簡(jiǎn)省，但是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制要求較嚴(yán)格。呵呵！以下是大體的步驟：葉綠素的分子結(jié)構(gòu)是由四個(gè)吡咯環(huán)組成的一個(gè)卟啉環(huán)，此外還有一個(gè)葉綠醇的側(cè)鍵，由于分子具有共軛結(jié)構(gòu)，因此可吸收光能。葉綠素是脂類化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、己烷等有機(jī)溶劑，用有機(jī)溶劑提取的葉綠素可在一定波長(zhǎng)下測(cè)定葉綠素溶液的消光值，利用Arnon公式計(jì)算葉綠素含量。 二、材料、儀器與試劑 1．材料：菠菜葉片 2．儀器：分光光度計(jì)、天平、具塞刻度試管（15ml）、研缽、漏斗、滴管、濾紙、試管架。 3．試劑：丙酮、CaCO3 三、操作步驟 樣品處理及測(cè)定：準(zhǔn)確稱取洗凈，擦干（去葉片中脈）的菠菜葉片1.00g，于研缽中加少許CaCO3 研磨成勻漿，用80%丙酮浸提，將上清液過濾（濾紙先用80%丙酮濕潤(rùn)），用滴管吸取80%丙酮分次把研缽中葉綠素浸提液和殘?jiān)磧簦缓笤儆帽鸬伟褳V紙上的葉綠素溶液洗凈，全部轉(zhuǎn)移到具塞刻度試管，定容到15ml，于652nm波長(zhǎng)處測(cè)定消光值，如需測(cè)定葉綠素a和b的含量，可于663nm 和645nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定其消光值，按分式（2）或（3）計(jì)算。 四、結(jié)果計(jì)算 OD652 A＝ ×稀釋倍數(shù)×100 （1） 34.5×W 式中：A：葉綠素含量（mg/100g）； W: 樣品重（g ） Ca——0.0127×OD663－0.00269×OD645（2） Cb——0.0229×OD645－0.00468×OD663（3） Ca，Cb——分別代表葉綠素a和葉綠素b的含量（mg/ml） 五、注意事項(xiàng) 葉綠素是一種極不穩(wěn)定的化合物，它能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解，脫去葉醇基，轉(zhuǎn)變?yōu)槿~綠酸。光照和高漫都會(huì)使葉綠素發(fā)生氧化和分解，因此在分離提取葉綠素的過程中，必須注意控制這些因素，盡可能在低溫和弱光下進(jìn)行，并注意縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間，以防止葉綠素的破壞。
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