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- heitiansh1 2017-04-10 00:00:00
- 去哪里找Z出色的生命科學學術(shù)交流論壇?>>> 堿法質(zhì)粒抽提用到三種溶液:溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M 醋酸鉀 / 2 M 醋酸讓我們先來看看溶液I的作用任何生物化學反應(yīng),首先要控制好溶液的pH,因此用適當濃度的和適當pH值的Tris-Cl溶液,是再自然不過的了那么50 mM葡萄糖是干什么的呢?說起來不可思議,加了葡萄糖后Z大的好處只是懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部因此,如果溶液I中缺了葡萄糖其實對質(zhì)粒的抽提本身而言,幾乎沒有任何影響所以說溶液I中葡萄糖是可缺的.那么EDTA呢?大家知道EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑,配在分子生物學試劑中的主要作用是:YZDNase的活性,和YZ微生物生長在溶液I中加入高達 10 mM 的EDTA,無非就是要把大腸桿菌細胞中的所有二價金屬離子都螯合掉如果不加EDTA,其實也沒什么大不了的,只要不磨洋工,只要是在不太長的時間里完成質(zhì)粒抽提,就不用怕DNA會迅速被降解,因為Z終溶解質(zhì)粒的TE緩沖液中有EDTA如果哪天你手上正好缺了溶液I,可不可以抽提質(zhì)粒呢?當前共有 0 人對Z佳答案進行了補充或評論.查看全部評論|對Z佳答案進行評論或補充
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