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- sunmoon9927 2017-01-20 00:00:00
- 如果轉(zhuǎn)化成功的話,菌落里的菌就含有你克隆的質(zhì)粒載體了,用槍頭直接碰一下,然后作為PCR模板,就可以進行PCR擴增了。但是菌落PCR鑒定的假陽性率其實也不低,所以建議你挑取菌落擴培之后抽提質(zhì)粒,進行酶切鑒定,這樣比較準(zhǔn)確,酶切鑒定確認好之后再去測序以確定沒有堿基突變或缺失。 你說的T7通用引物是指載體上的T7 promtor引物嗎?那只是一條引物啊,如果加上GBH下游引物的話,擴增出來的就是你連接進去的目的基因的長度了。
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